SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4538.3—2016 商品化试剂盒检测方法 三聚氰胺 方法三 Commercial kit methodMelamineTest method II 行业标准信息服务平台 2016-06-28发布 2017-02-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4538.3—2016 前言 本部分为SN/T4538《商品化试剂盒检测方法 三聚氰胺》的第3部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分主要起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、深圳市易瑞生物技术有限公司、深 圳市检验检疫科学研究院、合肥工业大学、内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司、江苏农牧科技职业 学院。 本部分主要起草人：薛峰、曾德新、涂小柯、郝福星、蒋原、蔡宝亮、付辉、李梅、陈伟、熊贝贝。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 4538.3—2016 商品化试剂盒检测方法 三聚氰胺 安方法三 1范围 SN/T4538的本部分规定了纯牛奶中三聚氰胺、β-内酰胺类和四环素类残留量的胶体金免疫层析 检测方法。 本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中三聚氰胺、β-内酰胺类（含头孢氨苄）和四环 素类残留筛选检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法 3原理 应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的待测物与检测线上的待测物抗原共同竞争 4试剂与材料 4.1 三聚氰胺、β-内酰胺类（含头孢氨苄）和四环素类四联检测试剂盒 本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价 结果参见附录A。 商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2℃～8℃、干燥、避光条件下保存，产品有效期不得少于 12个月。试剂盒组成如下： a）三聚氰胺、β-内酰胺类（含头孢氨苄）和四环素类四联检测试纸条； b) 微孔试剂（主要成分为胶体金标记的三聚氰胺抗体、胶体金标记的β-内酰胺类抗体、胶体金标 务平台 记的头孢氨芒抗体和胶体金标记的四环素类抗体）。 4.2试剂 三聚氰胺、β-内酰胺类和四环素类对照品。 5仪器设备 5.1 温育器：40℃±2℃。 5.2移液器：200μL。 1 SN/T 4538.3—2016 6样品制备 检测前样品需充分混匀。 7分析步骤 7.1将温育器温度设定为40℃；吸取200uL样品于微孔中，5～10次抽吸，迅速混合均匀并置于温育 器中温育3min。 7.2温育结束后，将试纸条插人到微孔中温育9min。 7.3温育结束，停止计时，从微孔中取出测试条，去掉测试条下端的吸水海绵并进行结果判定。 7.4检验完毕，余下的测试条放回铝箔袋中并密封好，放到试剂盒中，2℃～8℃保存。 8结果判定 通过对比控制带和检测带的颜色深浅来进行结果判定。由于长时间放置会引起检测带颜色的变 化，需在5min内进行结果判定。 目视结果判定依据（如图1所示）： a）无效：控制线（C线）不显色； b）阴性：检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色深或者强； 弱阳性：检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当； d）阳性：检测线（T线）不显色，或检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色浅或者弱。 控制线 四环素类检测线 头孢氨芊检测线 B-内酰胺类检测线 三聚氰胺检测线 空白试纸 无效 弱阳性 ：四环素类头孢氨苯β-内酰胺类三聚氰胺阳性 阴性 阳性 阳性 阳性 图1日 目视判定示意图 9方法性能指标 9.1检出限 三聚氰胺：150μg/kg青霉素G：3μg/kg；氨芊西林：4μg/kg；阿莫西林：4ug/kg；氯唑西林：8μg/kg； 2