SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4537.3—2016 商品化试剂盒检测方法 氯霉素 方法三 Commercial kit methodChloroamphenicolTest method III 行业标准信息服务平台 2016-06-28发布 2017-02-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4537.3—2016 前言 本部分为SN/T4537《商品化试剂盒检测方法氯霉素》的第3部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分主要起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、深圳市易瑞生物技术有限公司、中 肥工业大学、北京三元食品股份有限公司。 本部分主要起草人：薛峰、袁芳、张文国、曾德新、林季敏、蒋原、杨捷琳、蔡宝亮、陈立俊、陈伟、钱志娟、 薛强。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 4537.3—2016 商品化试剂盒检测方法 氯霉素方法三 1范围 SN/T4537的本部分规定了纯牛奶中氯霉素残留量的胶体金免疫层析检测方法， 本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中氯霉素残留进行筛选检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法 3原理 应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的氯霉素与检测线上的氯霉素抗原共同竞争 胶体金标记的特异性抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中氯霉素的含量定性判读。 4试剂与材料 4.1 氯霉素检测试剂盒 本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价·评价 结果参见附录A。 商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2℃～8℃、干燥、避光条件下保存，产品有效期不得少于12个 月。试剂盒组成如下： a）氯霉素检测试纸条； b）微孔试剂（主要成分为胶体金标记的氯霉索抗体）。 息服务平台 4.2试剂 氯霉素对照品。 5 仪器设备 5.1 温育器：40℃±2℃。 5.2 便携式读数仪： 测量波长：525nm，带宽土8nm，波长准确度±3nm。 计算方式：峰面积分析，并可计算检测线峰面积/控制线峰面积比值。 5.3移液器：200μL。 1 SN/T 4537.3—2016 6样品制备 检测前样品需充分混匀。 7分析步骤 7.1将温育器温度设定为40℃；吸取200μL样品于微孔中，5～10次抽吸，迅速混合均匀并置于温育 器中温育15min。 7.2温育结束后，将试纸条插人到微孔中温育8min。 7.3温育结束，停止计时，从微孔中取出测试条，去掉测试条下端的吸水海绵并进行结果判定。 7.4检验完毕，余下的测试条放回铝箔袋中并密封好，放到试剂盒中，2℃～8℃保存。 8结果判定 通过对比控制带和检测带的颜色深浅来进行结果判定。由于长时间放置会引起检测带颜色的变 化，需在5min内进行结果判定。 a）目视结果判定依据（如图1所示）： 1）无效：控制线（C线）不显色； 2）阴性：检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色深或者强； 3） 弱阳性：检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当： 4） 阳性：检测线（T线）不显色，或检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色浅或者弱。 一吸水纸 控制线 NC膜 氯霉素检测线 海绵端 试纸条示意图 空白试纸 无效阴性勇阳性阳性 图1 目视判定示意图 b） 通过便携式读数仪对试纸条读值，并依据下列方式进行判定： 1）阴性：读数数值>1.1，则判为阴性； 2）弱阳性：0.9≤读数数值<1.1，则判为弱阳性；需要重新检测，若结果依然为弱阳性，则判 定为阳性；若结果为阴性，则判定为阴性； 3） 阳性：读数数值<0.9，则判为阳性。 2