SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4142—2015 动物源性产品中多种抗生素 残留总量检测方法 微生物代谢抑制法 Determination of total residues of multi-antibiotic in animal-derived productsMicrobial metabolic inhibition method 行业标准信息服务平台 2015-02-09发布 2015-09-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4142—2015 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局 本标准主要起草人：韩伟、袁辰刚、宋青、顾鸣、朱坚。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 4142—2015 动物源性产品中多种抗生素 残留总量检测方法 微生物代谢抑制法 1范围 本标准规定了进出口动物源性食品中总抗生素残留检测的试样制备、保存和微生物代谢抑制检测 方法。 本标准适用于动物源产品集市贸易市场、食品工厂和实验室对（原料类）肉类、动物内脏、鸡蛋和牛 奶中总抗生素残留筛选检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682—2008ISO3696：1987，MOD） 试样的制备和保存 3.1试样制备 3.1.1牛奶：取不少于500mL试样，装人清洁容器内，进行标记。 3.1.2肉类、动物内脏：从原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放入高速组织捣碎机均质， 充分混匀，用四分法缩分不少于500g试样。装人清洁容器内，进行标记。 3.1.3蛋类：从原始样品中，随机分出一半（不少于500g），鲜蛋需去壳，进行标记。 准信息服务平台 3.2试样保存 3.2.1牛奶：0℃~4℃保存。 3.2.2肉类、动物内脏和蛋：试样于一18℃以下保存 3.3保存要求 在抽样和制样过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 4测定方法 4.1方法提要 本方法是利用特定的微生物细菌—一嗜热脂肪芽孢杆菌变种（BacillusStearothermophilusvar. Calidolactis），在一定的营养条件下生长。检测过程中，样品经处理获得样液，样液加到含有一定数量 1 SN/T4142—2015 的嗜热脂肪芽抱杆菌培养基中，65℃培养3h～4h。若样品中含有抗生素残留，就会干扰微生物的生 长代谢，细菌代谢所产生的显色变化将提示抗生素残留的存在与否，即利用抗生素对敏感细菌的抑制作 用来判别样品中是否含有抗生素。 4.2设备和材料 4.2.1 离心机。 4.2.2高速组织捣碎机。 4.2.3均质器。 4.2.41 恒温水浴锅：65℃。 4.2.5 涡旋振荡器。 4.2.6 榨汁器。 4.2.7 玻璃试管。 4.2.8 可调移液器：10μ~100μ，100μ~1000μ。 4.3 3试剂 本标准所用化学试剂为分析纯，试验用水为蒸馏水、去离子水，试验用水应符合GB/T6682的 规定。 4.3.1总抗生素检测试剂盒"’，可参见附录A。 4.3.2抗生素标准溶液（青霉素、四环素、土霉素和金霉素），纯度≥98%，标准储备均为10μg/mL，置 2℃～8℃冰箱中保存，可使用一个月；标准工作浓度按测定要求配制，置2℃8℃冰箱中保存，可使 用一周。 4.4测定步骤 4.4.1 样液制备 4.4.1.1肉类、动物内脏：用肉类榨汁器榨汁，取大约250uL汁液作为待测样液。 4.4.1.2 蛋：取禽蛋液体至清洁容器中，均质后直接取样。 4.4.1.3牛奶：直接取样测定，牛奶样品取样后尽快检测，4℃储存不超过48h，变质奶会导致假阴性 结果。 4.4.2测定 4.4.2.1预先准备好可调式、带顶盖的、温度稳定在65℃的水浴锅 4.4.2.2 根据检测样品数量，从试剂盒内取出足量的测试管或板孔，然后将不用的测试管或板孔重新封 口保存。 试管或板孔内。一次性吸嘴对应一个样品，防止交叉污染。 4.4.2.4封闭测试管或板孔，将其放置在65℃的水浴锅内培养，注意底部浸人水中，防止侧翻。培养温 度和时间控制很重要，水浴锅温度应该保持在65℃土2℃，培养3h～4h。 4.4.2.5 观察阴性对照管或孔颜色变为黄色时停止培养，观察培养液的颜色变化 1）由意大利Euroclone公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品 的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。 2