ICS 65.020.30 B 43 团 体 标 准 T/CAAA 020—2019 驴冷冻精液输精技术规程 Frozen semen insemination technical regulat ion for female donke ys 2019-01-21 发布 2019-01-21 实施 中国畜牧业协会 发布 T/CAAA 020—2019 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由中国畜牧业协会提出并归口。 本标准主要起草单位：东阿阿胶股份有限公司、中国农业大学、青岛农业大学、山东省农业科 学院奶牛研究中心、内蒙古东阿黑毛驴牧业有限公司 本标准主要起草人：吴帅帅、于杰、周祥山、嵇传良、曾申明、刘冰、张瑞涛、孙玉江、王长 法、张向阳、李敏、李雪贤、刘景辉、闫金华、李海静、姜桂苗、曲洪磊、赵付伟。 T/CAAA 020—2019 驴冷冻精液输精技术规程 1 范围 本标准规定了驴的发情鉴定、激素处理、输精、输精后检查、子宫炎诊治与输精、妊娠诊断和 档案管理。 本标准适用于驴的人工授精技术。 2 术语及定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 冷冻精液 frozen semen 将原精液过滤、离心后，用稀释液等温稀释、离心、装管、平衡后冷冻，在液氮中保存。 2.2 发情期 estrus peroid 母驴出现发情行为及生殖生理变化持续的时间，一般为 5d～8d。 2.3 试情公驴 jack for oe strus testing 性成熟后可用于辨别母驴是否发情的体格健壮、性情温顺、无恶癖的非种用公驴。 3 发情鉴定 3.1 外部观察 根据阴唇肿胀、抿耳、吧嗒嘴等表现判断发情程度，确定配种时间。 3.2 B 超检查 母驴保定后，手戴上涂有润滑剂的长臂手套，掏净直肠内的粪便，携带 B超探头进入直肠。使 用探头扫描子宫、卵巢，观察并记录卵泡大小、子宫环境和妊娠情况，填写记录表。见附录 A。 3.3 直肠检查 3.3.1 下滑法。一只手伸进直肠狭窄部，于第 3、第 4腰椎处触摸到卵巢韧带，顺卵巢韧带向下触 摸卵巢，经卵巢向下触摸子宫角、子宫体。 3.3.2 托底法。右手进入直肠狭窄部，四指向前下方摸触子宫底部，顺子宫底向左、右上方移动触 摸子宫角，经子宫角上部触摸左、右侧卵巢。触摸卵巢时，应注意卵巢形状、质地、卵泡大小、弹力、波动。 3.3.3 检后处理。检查完毕后，清水冲洗阴部和外阴部粪污，最后用无菌毛巾或无菌纸巾擦干。 3.4 试情 将试情公驴放入母驴圈内。发情的母驴表现出愿意接近试情公驴，弓腰举尾、后肢开张等动作； 未发情的母驴则远离、躲避试情公驴，甚至有踢咬等抗拒行为。 1T/CAAA 020—2019 4 激素处理 B超检查卵泡直径以及子宫情况，卵泡直径发育到 30mm～35mm时，肌肉注射 GnRH缓释液， 次日晚 8点和第三天凌晨 4点，分别进行子宫体深部输精。见附录 A。 5 输精 5.1 器材、药品准备 输精枪、塑料外套、长臂手套、显微镜、 5.0MHz B 超机、载玻片、解冻容器、温水和温度 计、注射器、消毒防腐药、生理盐水、生殖激素、子宫炎治疗药物以及 GnRH缓释液（在 4℃冰 箱储存）。 5.2 清洗消毒 5.2.1 保定栏内固定母驴，将驴尾包裹并向上直垂吊起，露出肛门部和外阴部。 5.2.2 用干净温水自上而下清洗肛门及外阴粪污 2次。 5.2.3 用洗洁精清洗外阴部 1次，温水洗净。 5.2.4 用酒精喷洒消毒外阴部 1次，温水洗净。 5.2.5 用无菌毛巾或无菌纸将肛门及外阴部擦干，等待输精。 5.3 冷冻精液的解冻与镜检 从液氮罐中随机取出冻精管一支（0.5m L/支，解冻后有效精子数大于 4500万/支），放入 38℃± 1℃的水中解冻，30s ～45s后取出、擦干。取 10μ L精液放置于预先加热 38℃～40℃的载玻片上镜 检精子活力。精子活力＞0.35 ，才可用于输精。 5.4 输精 输精员站在母驴的后方偏左侧，右手握输精管，五指形成锥形，缓慢插入阴道内，快速握住子 宫颈，将输精管轻插子宫颈口内 7cm～10cm处，左手握住注射器缓慢推入精液，每次输精量 3支～ 5支（0.5m L/支） 。 6 输精后检查 发现输精后有精液逆流应及时补输。 7 子宫炎的诊治与输精 7.1 患轻度子宫炎的，可在输精 3h前或输精后 1h～12h用抗生素子宫内灌药治疗。 7.2 患重度子宫炎的，先治疗、不输精。宫内注射子宫专用消炎药，待下次发情后，确认是否可以 输精。 8 妊娠诊断 8.1 B 超诊断法 排卵 14天后，用 B超扫描子宫与卵巢，检查黄体及胚胎发育情况。见附录 B。 8.2 直肠检查法 排卵后 25天，采用直肠检查法，触摸子宫角、卵巢、黄体情况，依据黄体有无、子宫质地、大 2 T/CAAA 020—2019 小、弹性、位置等断定是否妊娠。 9 档案管理 9.1 记录清晰、完整。见附录 C。 9.2 纸质版、电子版分别归档。 3T/CAAA 020—2019 附录 A （规范性附录） B 超检测卵泡发育情况测量 A.1 B 超检测卵泡发育情况 图 A.1 B 超检测卵泡发育情况测量图 附录 B （资料性附录） 不同妊娠天数胚胎图示 B.1 母驴不同妊娠天数胚胎发育图 图 B.1 不同妊娠天数胚胎图示 4 T/CAAA 020—2019 附录 C （规范性附录） 配种记录 C.1 配种记录表格 表 C.1 配种记录表 卵泡直径 处 理 序号 母驴号 舍号 栏号 检查 日期 左 右 GnRH PG OT其他公驴号 输精备注 预约观察 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 __________________________ 5