SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3329—2012 中国普氏野马的物种鉴定方法 PCR 方法 Protocol of species identification for Equus przewalsrii- PCRmethod 行业标准信息服务平台 2012-12-12发布 2013-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3329—2012 行业标准信 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 中国普氏野马的物种鉴定方法 PCR方法 SN/T33292012 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013） 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010)64275323 网址 www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×12301/16 印张0.75字数14千字 2013年6月第一版2013年6月第一次印刷 印数1—1600 * SN/T3329-2012 书号：155066·2-25386定价16.00元 SN/T3329—2012 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 疫局。 本标准主要起草人：郑小龙、王群、季新成、梁成珠、朱来华、邓明俊、岳志芹、肖西志、徐彪。 行业标准信息服务平台 SN/T3329—2012 中国普氏野马的物种鉴定方法 PCR 方法 1范围 本标准规定了中国普氏野马的物种鉴定的PCR方法。 本标准适用于中国普氏野马的物种鉴定。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 3方法原理 根据普氏野马线粒体DNA控制区（D-Loop区）设计合成1对特异性引物，对普氏野马的目的基因 进行PCR扩增，判断样品中是否含有普氏野马的基因。普氏野马形态特征参见附录A。 行业标准信息服务平台 4 仪器设备 4.1PCR仪。 4.2 高速台式离心机。 4.3台式离心机。 4.4混匀器。 4.5冰箱。 4.6微量可调移液器（10μL、100μuL、1000uL）及配套吸头 4.7 离心管。 5试剂与材料 5.1无水乙醇。 5.2蒸馏水（应符合GB/T6682中一级水的规格）。 5.3 蛋白酶K。 5.4 十二烷基磺酸钠（SDS）。 5. 5 十六烷基三乙基漠化铵（CTAB）。 5. 6 氯化钠。 5.7 三氯甲烷。 5. 8 异戊醇。 1