SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3306.3—2012 国境口岸环介导恒温扩增(LAMP)检测方法 第3部分：志贺氏菌 Loop-mediated isothermal amplification detection method at frontier port- Part 3:Shigella 行业标准信息服务平台 2012-12-12发布 2013-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 行业标途 中华人民共和国出人境检验检疫 行业标准 国境口岸环介导恒温扩增（LAMP）检测方法 服务平台 第3部分：志贺氏菌 SN/T 3306.3—2012 * 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013） 北京市西城区三里河北街16号（100045) 总编室：（010)64275323 网址www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×12301/16 印张0.5 字数10千字 2013年6月第一版 2013年6月第一次印刷 印数1—1600 * 书号：155066·2-25404 定价14.00元 SN/T 3306.3—2012 前言 SN/T3306《国境口岸环介导恒温扩散（LAMP）检测方法》共分为4部分： 第1部分：鼠疫杆菌； 第2部分：产毒素霍乱弧菌； 第3部分：志贺氏菌； 第4部分：嗜肺军团菌。 本部分为SN/T3306的第3部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局、中华人民共和国山东出人境检验检疫 局、正元盛邦（天津）生物科技有限公司。 本部分主要起草人：左锋、柴宏森、李国鹏、杨春江、刘涛、祁军、谭绪良。 行业标准信息服务平台 I SN/T3306.3—2012 国境口岸环介导恒温扩增（LAMP）检测方法 第3部分：志贺氏菌 1范围 SN/T3306的本部分规定了国境口岸检测疑似传染病的粪便样品中志贺氏菌的环介导恒温核酸 扩增（LAMP)法。 本部分适用于国境口岸志贺氏菌的筛选检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 WS/T230—2002临床诊断中聚合酶链反应（PCR)技术的应用 WS287一2008细菌性和阿米巴性疾诊断标准 3缩略语 下列缩略语适用于本文件。 Bst酶：BstDNApolymerase(largefragment),BstDNA聚合酶（大片段）。 DNA：deoxyribonucleicacid，脱氧核糖核酸。 dNTP：deoxyribonucleosidetriphosphate，脱氧核苷三磷酸。 LAMP：loop-mediatedisothermalamplification，环介导恒温扩增。 4 生物安全措施 养物和废弃物应参照GB19489中的有关规定执行。 5防污染措施 防止污染措施应符合WS/T230的规定。 6# 技术概要 根据志贺氏菌的特异性序列基因设计特异性内引物、外引物各一对，或再增加环状引物一对，特异 性识别靶序列上的独立区域，利用Bst酶启动循环链置换反应，在特异性基因序列启动互补链合成，在 同一链上互补序列周而复始形成有很多环的花椰菜结构的茎-环DNA混合物；从dNTP析出的焦磷酸 1