SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3034—2011 出口水产品中无机汞、甲基汞和 乙基汞的测定 液相色谱-原子荧光光谱联用（LC-AFS）法 Determination of inorganic mercury,methylmercury and ethylmercury in aquatic products for export- Liquid chromatogram-atomic fluorescence spectrometry(LC-AFS) 标准信息服务平台 2011-09-09发布 2012-04-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3034—2011 前言 本标准根据GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国湖南出人境检验检疫局、中华人民共和国深圳出人境检验检疫 局、中华人民共和国湖北出入境检验检疫局、北京吉天仪器公司。 本标准主要起草人：陈新焕、林燕奎、黄志强、崔海容、秦德元、颜治、肖陈贵、李勇、杨万彪、周亚敏、 陈练、孟令兵、刘欣、吕小园。 行业标准信息服务平台 I SN/T3034—2011 出口水产品中无机汞、甲基永和 乙基的测定 液相色谱-原子荧光光谱联用（LC-AFS）法 1范围 本标准规定了出口水产品中无机汞、甲基汞和乙基汞的液相色谱-原子荧光光谱联用方法。 本标准适用于出口水产品中无机汞、甲基汞和乙基汞含量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 样品中多种形态的汞以盐酸-硫脲-氯化钾提取液提取后，通过C18色谱柱进行分离，柱后洗脱液首 先和氧化剂混合，再和空气混合，通过紫外光照射，将有机汞都氧化成无机汞。在酸性介质中，无机汞被 硼氢化钾或硼氢化钠还原成原子态汞，由载气（氩气）带入原子化器中，在特制汞空心阴极灯照射下，基 态汞原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与汞含量成正比， 与标准系列比较定量。 4试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中二级水的规定。液相色谱流 动相所用溶剂均为高效液相色谱级并经过0.45um滤膜过滤。 4.1流动相（水溶液）：5%乙十0.5%乙酸铵十0.1%半胱氨酸，经溶剂过滤器过滤后，放在超声波清 洗器中超声20min，除去气泡。 4.2载流：7%HCI（优级纯）。 4.3还原剂：0.5%KOH+2%KBH。 4.4氧化剂:0.5%KOH+1%K,S,O8 4.5清洗液：CHOH-H,O(1+1)。 4.6 提取液：10%HCI+1%硫脲+0.15%KCl。 4.7 氨水。 4.8无机汞标准储备溶液：1000μg/mL。 4.9 甲基汞标准储备溶液：100μg/mL。 4.10乙基汞标准储备溶液：100μg/mL。 I SN/T 3034—2011 - 4.11混合标准使用溶液：用水将标准储备溶液（4.8、4.9、4.10）稀释成浓度均为1000ug/L的无机 汞-甲基汞-乙基汞混合标准使用溶液，保存于4℃冰箱中。 4.12氩气（纯度≥99.99%）。 5仪器和设备 5.1原子荧光形态分析仪（包括：形态分析预处理装置、原子荧光光谱仪、高压液相泵）。 5.2溶剂过滤器。 5.3涡旋混合器。 5.4离心机。 6试样制备与保存 取可食部分，用捣碎机打成匀浆，均分成两份作为试样，装人洁净的容器内，密封并标明标记。在制 样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。试样应于一18℃下保存。 7 测定步骤 7.1提取 称取试样约0.25g（精确到0.001g）于5mL塑料离心管中，加人2.00mL提取液（4.6），涡旋混合 5min，离心，取上层清液，再加2.00mL提取液重复提取一次，合并两次提取液，用过滤器过滤。加入 0.7mL氨水（4.7)中和pH至2～8，过C8小柱净化处理，再用4mL流动相（4.1)分两次洗脱，每次2mL， 最后定容至10mL测定。为更好保护色谱柱，必要时可以再离心一次。 7.2测定 7.2.1标准工作溶液 根据需要用混合溶液（提取液：流动相：水3：4：3）将混合标准使用溶液（4.11)逐级稀释成无 机汞、甲基汞和乙基汞含量均为1.25ug/L、2.50ug/L.5.00g/L、7.50ug/L、10.00ug/L的混合标准 工作溶液。 7.2.2液相色谱条件 7.2.2.1色谱柱：Cis柱150mm×4.6mm（内径），5um或相当者。 7.2.2.2流动相：5%乙睛（HPLC级）+0.5%乙酸铵十0.1%半胱氨酸，经溶剂过滤器过滤后，放在超 声波清洗器中超声20min，除去气泡 7.2.2.3流速:1 mL/min。 7.2.2.4进样量：100μL。 7.2.3形态分析预处理装置原子荧光联用条件 参见附录A。 7.2.4定量测定 开机后按上述条件进行设置，待稳定后，先测定标准系列，绘制标准曲线，然后测定样品溶液。在上 述色谱和原子荧光条件下用进样针吸取0.3mL～0.5mL，用峰高或峰面积外标法定量。在上述色谱 2