团体标准 T/CAPDA 004-2020 14-羟基芸苔素甾醇原药 14-hydroxylated brassinoste roid technical material 2020 - 02 - 18 发布 2020-02-18 实施 中国农药发展与应用协会 发布 ICS 65.100 G 25 全国团体标准信息平台 T/CAPDA 004-2020 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 本标准由中国农药发展与应用协会提出。 本标准由中国农药发展与应用协会归口。 本标准起草单位：成都新朝阳作物科学有限公司、农业农村部农药检定所、沈阳化工研究院有限公 司。 本标准主要起草人：杨闻翰、杨艳芹、张嘉月、石凯威、任丹。 全国团体标准信息平台 T/CAPDA 004-2020 1 14-羟基芸苔素甾醇原药 1 范围 本标准规定了 14-羟基芸苔素甾醇原药的要求、试验方法、验收和质量保证期以及标志、标签、 包装、储运。 本标准适用于由 14-羟基芸苔素甾醇及其生产中产生的杂质组成的 14-羟基芸苔素甾醇原药。 注：14-羟基芸苔素甾醇的其他名称、结构式和基本物化参数参见附录 A。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 1600-2001 农药水分测定方法 GB/T 1601 农药 pH值的测定方法 GB/T 1604 商品农药验收规则 GB/T 1605—2001 商品农药采样方法 GB 3796 农药包装通则 GB/T 6682—2008 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 8170—2008 数值修约规则与极限数值的表示和判定 3 要求 3.1 外观 类白色固体。 3.2 技术指标 14-羟基芸苔素甾醇原药还应符合表 1要求。 全国团体标准信息平台 T/CAPDA 004-2020 2 表1 14-羟基芸苔素甾醇原药控制项目指标 项 目 指 标 14-羟基芸苔素甾醇质量分数 / % ≥ 90.0 水分 / % ≤ 2.0 pH范围 4.0~7.0 4 试验方法 警示：使用本标准的人员应有实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有的安全问题。使用者有 责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规的规定。 4.1 一般规定 本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和 GB/T 6682—2008 中规定的三 级水。检验结果的判定按 GB/T 8170—2008 中4.3.3进行。 4.2 抽样 按GB/T 1605—2001 中的 5.3.1方法进行，用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量应不少于 10 g。 4.3 鉴别试验 液相色谱法 ——本鉴别试验可与14-羟基芸苔素甾醇质量分数的测定同时进行。在相同的色谱操作 条件下，试样溶液中某色谱峰的保留时间与14-羟基芸苔素甾醇标样溶液中14-羟基芸苔素甾醇衍生物色谱峰的保留时间，其相对差值应在1.5%以内。 4.4 14-羟基芸苔素甾醇质量分数的测定 4.4.1 方法提要 试样用甲醇溶解， 在30℃±2℃环境下与苯硼酸甲醇溶液反应 30 min，定容后以乙腈 +水为流动相， C 18为填料的不锈钢柱和紫外检测器，在波长 222 nm下，对试样中的 14-羟基芸苔素甾醇衍生物进行反 相高效液相色谱分离，外标法定量。 4.4.2 试剂和溶液 甲醇：色谱纯。 乙腈：色谱纯。 水：新蒸二次蒸馏水或超纯水。 苯硼酸。 苯硼酸甲醇溶液： ρ（苯硼酸） =1.0 mg/mL 。 14-羟基芸苔素甾醇标样：已知质量分数， ω≥95.0%。 4.4.3 仪器 全国团体标准信息平台 T/CAPDA 004-2020 3 高效液相色谱仪：具有可变波长紫外可见检测器。 色谱柱： 150 mm×4.6 mm(i.d.) 不锈钢柱，内装 C18、5 m填充物 (或同等效果的色谱柱 )。 过滤器：滤膜孔径约 0.45 μm。 微量进样器： 50 μL。 定量进样管： 5 μL。 超声波清洗器。 4.4.4 高效液相色谱操作条件 流动相： ψ(乙腈∶水 )＝50∶50，经滤膜过滤，并进行脱气。 流量： 1.0 mL/min 。 柱温：室温 (温度变化应不大于 2℃)。 检测波长： 222 nm； 进样体积： 5 μL； 保留时间： 14-羟基芸苔素甾醇衍生物 约12.0 min。 上述操作参数是典型的，可根据不同仪器特点对给定的操作参数作适当调整，以期获得最佳效果。 典型的 14-羟基芸苔素甾醇原药高效液相色谱图见图 1。 说明： 1—14-羟基芸苔素甾醇衍生物。 图1 14-羟基芸苔素甾醇原药衍生化后的高效液相色谱图 4.4.5 测定步骤 4.4.5.1 标样溶液的制备 称取 0.01 g（精确至 0.00001g）14-羟基芸苔素甾醇标样于 25 mL容量瓶中，用 10 mL甲醇溶液溶 解，再加入苯硼酸甲醇溶液 10 mL，置于 30℃±2℃环境下衍生化 30 min。反应完成后，用甲醇稀释至 刻度，摇匀，过滤。 4.4.5.2 试样溶液的制备 称取 0.01 g（精确至 0.00001 g ）14-羟基芸苔素甾醇的试样于 25 mL容量瓶中，用 10 mL甲醇溶液 溶解，再加入苯硼酸甲醇溶液 10 mL，置于 30℃±2℃环境下衍生化 30 min。反应完成后，用甲醇稀释 全国团体标准信息平台 T/CAPDA 004-2020 4 至刻度，摇匀，过滤。 4.4.5.3 测定 在上述操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针 14-羟基芸苔素甾醇衍 生物面积相对变化小于 1.2%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。 4.4.5.4 计算 将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中 14-羟基芸苔素甾醇衍生物峰面积分别进行平 均，试样中 14-羟基芸苔素甾醇质量分数按式（ 1）计算： 21 1 12=Am Am ………………………………………………（1） 式中： ω1——试样中 14-羟基芸苔素甾醇的质量分数，以 %表示； A2——试样溶液中14-羟基芸苔素甾醇衍生物峰面积的平均值； m1——标样的质量，单位为克（ g）； ω ——标样中 14-羟基芸苔素甾醇标样的质量分数，以 %表示； A1——标样溶液中14-羟基芸苔素甾醇衍生物峰面积的平均值； m2——试样的质量，单位为克（ g）。 4.4.6 允许差 14-羟基芸苔素甾醇质量分数两次平行测定结果之差应不大于 1.2%，取其算术平均值作为测定结 果。 4.5 水分的测定 按 GB/T 1600-2001 中2.1进行。 4.6 pH值的测定 按 GB/T 1601 进行。 5 验收和质量保证期 5.1 验收 应符合 GB/T 1604 的规定。 5.2 质量保证期 在规定的储运条件下， 14-羟基芸苔素甾醇原药的质量保证期，从生产日期算起为 2年。质量保证 期内，各项指标均应符合标准要求。 全国团体标准信息平台 T/CAPDA 004-2020 5 6 标志、标签、包装、储运 6.1 标志、标签、包装 14-羟基芸苔素甾醇原药的标志、标签和包装应符合 GB 3796 的规定。 6.2 储运 14-羟基芸苔素甾醇原药应用清洁、 干燥的铝箔袋、 玻璃瓶或塑料瓶包装， 其包装件应储存在通风、 干燥（低温）的库房中，堆放方式应符合安全、搬运方便的原则。储运时，严防潮湿和日晒，不得与食物、种子、饲料混放，避免与皮肤、眼睛接触，防止由口鼻吸入。 全国团体标准信息平台 T/CAPDA 004-2020 6 A A 附 录 A （资料性附录） 14-羟基芸苔素甾醇的其他名称、结构式和基本物化参数 本产品有效成分 14-羟基芸苔素甾醇的其他名称、结构式和基本物化参数 英文通用名： 14- hydroxylated brassinosteroid CAS登记号： 457603-63-3 化学名称： (20R, 22R)-2β, 3β,14,20,22,25- 六羟基 -5β-胆甾 -6-酮 结构式： 实验式： C27H46O7 相对分子质量： 482.7 溶解度：溶于甲醇、乙醇、四氢呋喃、丙酮等多种有机溶剂 稳定性：在酸性、中性介质中稳定；在碱性条件下分解 _________________________________ 全国团体标准信息平台