SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4546—2017 代替SN/T1895—2007 商品化试剂盒检测方法 金黄色葡萄球菌 方法一 Commercial kit methodStaphylococcus aureusTest method I 行业标准信息服务平台 2017-05-12发布 2017-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4546—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T1895一2007《食品中金黄色葡萄球菌的快速计数法PetrifilmTM测试片法》。与 SN/T1895一2007相比，除编辑性修改外主要技术变化如下： 修改了标准的中英文名称； 一修改了附录A： -增加了计算公式； —增加了附录B； 删除了第二法PetrifilmTM测试片MPN法。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、大连启元科 技发展有限公司。 本标准主要起草人：蒋丹、刘淑艳、孙晓飞、丁健、万超、赵红阳、吴斌、林长军、卢行安、周振亚。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T1895—2007。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4546—2017 商品化试剂盒检测方法 金黄色葡萄球菌方法 1范围 本标准规定了食品中金黄色葡萄球菌检验测试片（PetrifilmTMStaphylococcusaureusCountPlate） 的检测方法。 本标准适用于出口食品和原料中金黄色葡萄球菌的计数， 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB19489实验室生物安全通用要求 3生物安全措施 为了保护实验室人员的安全和防止污染，应由具备资格的工作人员检测。所有培养物和废弃物的 处理应按照GB19489有关规定执行。 4技术概要 金黄色葡萄球菌测试片法是用一种预先制备的含有指示剂及冷水可溶性凝胶的培养基系统进行微 生物培养的方法。 金黄色葡萄球菌测试片STX（StaphExpressCountPlate）含有具有显色功能并经改良的Baird- Parker培养基，对金黄色葡萄球菌具有很强的选择性。测试片上的紫红色菌落为金黄色葡萄球菌。若 出现除紫红色以外的其他颜色，则必须使用含有显色剂和脱氧核糖核酸（DNA）的确认反应片。金黄色 葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶（DNase)会和反应片中的显色剂形成粉红色晕圈。 息服务平台 5 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下 5.1恒温培养箱：36℃土1℃。 5.2 电子天平：感量0.1g。 均质器（旋刀式或拍击式）或等效的设备。 5.4pH计或精密pH试纸：精密度0.1。 5.5 移液管：1mL（具0.01mL刻度），10mL（具0.1mL刻度）或移液器及吸头。 5.6 测试片压板。 5.7 放大镜或/和菌落计数器。 1 SN/T 4546—2017 6培养基和试剂 6.1无菌生理盐水：见附录A的A.1。 6.2磷酸盐缓冲液：见附录A的A.2。 6.31 mol/L NaOH:见附录 A的A.3。 6.41mol/LHCl:见附录A的A.4。 6.5金黄色葡萄球菌测试片和金黄色葡萄球菌确认反应片。 本标准使用的试剂盒由3M公司生产，参考SN/T2775一2011和SN/T3266一2012由国家认监委 商品化食品检测试剂盒评价专家委员会组织评价。具体评价结果参见附录B。 试剂盒储存于2℃~8℃，有效期18个月。 检测程序 检测程序见图1。 检样 25g(mL)+225mL生理盐水 1mL接种量，检样匀液加入测试片 36℃±1℃ 24h±2h 判读 无菌落 紫红色菌落 其他颜色的菌落 在测试片中置入确认反应片 计数金黄色葡萄球菌菌落 36℃士1℃培养1h~3h 36℃±1℃ 1h~3h 计数有粉红色晕的菌落为 金黄色葡萄球菌 报告 图1冷水可溶性金黄色葡萄球菌凝胶测试片快速计数法检测程序 2