ICS 07.100.30 SN CCS C 53 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4544.2—2022 商品化试剂盒检测方法 菌落总数 方法二 Commercial kit method--Aerobic count-Test method Il 2022-03-14发布 2022-10-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T4544.2—2022 前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件是SN/T4544《商品化试剂盒检测方法 菌落总数》的第2部分。SN/T4544已经发布了 以下部分： 商品化试剂盒检测方法 菌落总数 方法一； 商品化试剂盒检测方法菌落总数方法二。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位：中华人民共和国福州海关。 本文件主要起草人：郑晶、林杰、郭菁、肖颖、陈彬、董健、柯璐、徐珊、张温玲、戴晓丽。 SN/T 4544.2—2022 商品化试剂盒检测方法 菌落总数方法二 1范围 本文件规定了食品中两种3M菌落总数测试片（3MPetrifilmTMAerobicCountPlate和3MPetri- filmTMRapidAerobicCountPlate)的检测方法 本文件适用于食品中菌落总数的测定。该方法不适于米粉等10倍稀释后流动性不强的食品；不适 于10倍稀释后色度较深的食品。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定 GB19489实验室生物安全通用要求 GB/T27405实验室质量控制规范食品微生物检测 SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法 SN/T3266食品微生物检验方法确认技术规范 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 V 4生物安全措施 为了保护实验室人员的安全和防止污染应由具备资格的工作人员检测菌落总数。所有培养物和 废弃物应按照GB19489和GB/T27405中的有关规定执行 5技术概要 菌落总数测试片（3MPetrifilmTMAerobicCountplate)是一种预先制备好的培养基系统，其培养基 为标准的平板计数琼脂（PCA）培养基，并且含菌落指示剂，菌落在测试片上呈红色，这样可增强菌落计 数效果。 含营养成分、冷水可溶性凝胶及双联指示剂技术，菌落在测试片上呈红色和蓝色，24h即可对食品基质 进行菌落计数。 SN/T 4544.2—2022 6 仪器和设备 除微生物实验室常规灭菌和培养设备外，其他设备和材料如下： 6.1恒温培养箱：36℃±1℃,30℃±1℃。 6.2 冰箱：2℃~5℃。 6.3 恒温水浴箱：46℃土1℃ 6.4 天平：感量为0.1g。 6.5 均质器。 6.6 振荡器。 6.7 无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度），10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。 6.8 无菌锥形瓶：容量为250mL、500mL。 6.9 无菌培养皿：直径为90mm。 6.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。 6. 11 放大镜或/和菌落计数器。 6.12 3M压板。 7 试剂和材料 文本为准 菌落总数测试片：本文件使用的测试片3MPetrifilmTM 7. 1 Aerobic CountPlate和3MPetrifilmTM RapidAerobicCountPlate由3M有限公司生产，参考SN/T2775和SN/T3266，按商品化食品检测试 剂盒评价程序进行评价，评价结果参见附录A和附录B。 7. 2 磷酸盐缓冲液(PBS)：按附录C中C.1。 7.3 无菌生理盐水：按附录C中C.2。 7. 4 1mol/L氢氧化钠（NaOH）：称取40gNaOH溶于1000mL蒸馏水中。 7.5 1mol/L盐酸（HCl)：移取90mL浓盐酸，用蒸馏水稀释至1000mL。 8 3检测程序 2