2 0 2 5 1 2 0 9 发 布 － － 2 0 2 6 0 5 0 1 － － 实 施 西 番 莲 （ 百 香 果 ） 脱 毒 种 苗 生 产 技 术 规 程 3 1 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 备 案 号 ： X X X X - X X X X Ｉ Ｃ Ｓ 6 5 . 0 2 0 . 2 0 C C S B 4 8 9 5 — 2 0 2 5 T e c h n i c a l c o d e f o r v i r u s - f r e e p l a n t l e t p r o d u c t i o n o f p a s s i o n f r u i t ( P a s s i f l o r a e d u l i s ) Ｎ Ｙ ／ Ｔ 中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部 发 布NY/T４８９５—２０２５ 前　　言 本文件按照GB/T１􀆰１—２０２０«标准化工作导则　第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定 起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部农垦局提出. 本文件由农业农村部热带作物及制品标准化技术委员会归口. 本文件起草单位:中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所、中国热带农业科学院热带生物技术 研究所、广西壮族自治区农业科学院、福建省农业科学院果树研究所、三亚碧兰春花卉发展有限公司、海南 美丽乡村果业有限公司. 本文件主要起草人:邢文婷、宋顺、黄东梅、吴斌、王健华、许奕、杨柳、应东山、魏秀清、韦晓霞、马伏宁、 蒋萍、蒋邦增、赵军涛. ⅠNY/T４８９５—２０２５ 西番莲(百香果)脱毒种苗生产技术规程 １　范围 本文件规定了西番莲(百香果,Passifloraedulis)脱毒种苗生产技术的术语和定义、脱毒组培苗培 养、脱毒组培苗驯化、脱毒种苗繁育、种苗质量、包装储运和育苗档案等要求. 本文件适用于西番莲(百香果)紫果和黄果品种及其杂交种的脱毒种苗生产. ２　规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件. GB/T８３２１(所有部分)　农药合理使用规则 GB/T４２４７８　农产品生产档案记载规范 NY/T５２５　有机肥料 NY/T１２７６　农药安全使用规范　总则 NY/T２５１７　植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南　西番莲 NY/T３９７２　西番莲　种苗 ３　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. ３􀆰１ 特定病毒　specificvirus 黄瓜花叶病毒(CMV)、夜来香花叶病毒(TeMV)、西番莲木质化病毒(PWV)、东亚西番莲病毒 (EAPV)、西番莲大戟曲叶病毒(EuLCV)、西番莲潜隐病毒(PLV)、广东番木瓜曲叶病毒(PaLCuGDV)７ 个西番莲常见病毒. ３􀆰２ 脱毒组培苗　virusＧfreetissueＧculturedplantlet 经脱毒处理且无特定病毒的组培苗. ３􀆰３ 生物隔离大棚　biologicalisolationgreenhouse 配备６０目以上防虫网、通风系统、遮阳和喷雾系统等设施大棚. ３􀆰４ 脱毒原种苗　virusＧfreepreＧelitestock 在生物隔离大棚内,移栽成活的脱毒组培苗经病毒检测,确认不带特定病毒且性状稳定、未经过代数 繁殖的组培苗. ３􀆰５ 脱毒种苗　virusＧfreecertifiedseedling 在生物隔离大棚内,由脱毒原种苗生产出符合质量要求的脱毒嫁接苗或扦插苗. ３􀆰６ 定植　planting 在生物隔离大棚中将组培苗种植于含育苗基质的控根器中. １NY/T４８９５—２０２５ ４　脱毒组培苗培养 ４􀆰１　外植体消毒 取经脱毒预处理后生长势旺盛的新梢,流水冲洗后用中性洗涤剂浸泡１５min~２０min,再用流水冲 洗干净后,切取长度２cm~３cm的新梢顶芽为外植体,并在无菌环境下用７５％酒精浸泡４５s,无菌水冲 洗２次,用含０􀆰１％吐温(Tween２０)的０􀆰５％~１􀆰０％次氯酸钠溶液浸泡５min~１５min或０􀆰１％~０􀆰１５％ HgCl２溶液浸泡５min~８min,无菌水洗４次~５次. ４􀆰２　外植体无菌体系 ４􀆰２􀆰１　无菌外植体筛选 取４􀆰１外植体的茎尖,长度≤１􀆰０cm,在MS培养基上培养１０d~１５d,筛选无污染的茎尖. ４􀆰２􀆰２　培养条件 昼/夜温度(２６℃~３０℃)/(２１℃~２５℃),光照强度２５００lx~３２００lx,昼/夜(１６h/８h). ４􀆰３　茎尖脱毒培养 ４􀆰３􀆰１　腋芽诱导 将４􀆰２茎尖接种至含植物细胞分裂素的腋芽启动培养基中诱导腋芽生长,培养条件见４􀆰２􀆰２;对每个 腋芽进行编号.腋芽萌发培养基相关信息见附录A中的A􀆰１. ４􀆰３􀆰２　二次茎尖培养 切取腋芽的茎尖,长度≤０􀆰５cm,接种至增殖培养基上培养.培养条件:(２５±１)℃,光照强度３０００lx~ ４５００lx,昼/夜(１６h/８h).增殖培养基相关信息见A􀆰１. 注:每个茎尖编写品种、茎尖号、接种日期. ４􀆰３􀆰３　继代培养 将４􀆰３􀆰２培养材料切成带芽茎段,每３０d~４５d更换一次新培养基,同一个腋芽的培养材料为同一个 芽系,统一编号,继代培养４次~５次,培养条件见４􀆰２􀆰２;对不同芽系材料进行病毒检测,将检测无特定病 毒的材料进一步培养. ４􀆰３􀆰４　生根诱导培养 选取嫩茎长度≥１􀆰５cm的单芽,在含植物生长素的MS培养基中诱导生根.培养条件:温度(２６±１)℃,光 照强度４５００lx~５０００lx,昼/夜(１６h/８h).生根培养基相关信息见A􀆰１. ５　脱毒组培苗驯化 ５􀆰１　炼苗 在生物隔离大棚内,选取主茎高≥３􀆰０cm的组培瓶苗,放置于２０℃~３０℃温度下闭瓶炼苗７d~ １４d,接着揭盖５０％炼苗２d~３d. ５􀆰２　移栽 在生物隔离大棚内,流水冲洗组培苗基部培养基,移栽到育苗基质中,用塑料薄膜和遮阳网保湿、遮阳 ２０d~３０d,保持温度２６℃~２８℃,空气相对湿度７０％~８５％.对移栽成活的组培苗进行特定病毒检 测,检测方法见附录B. ５􀆰３　定植 将５􀆰２检测无特定病毒的组培苗定植于含育苗基质的控根器中.对定植之后的组培苗按照NY/T２５１７ 的规定进行稳定性鉴定,获得性状稳定的组培苗即为脱毒原种苗. ５􀆰４　驯化条件 ５􀆰４􀆰１　生物隔离 生物隔离大棚应减少人员出入,周边应无十字花科、茄科及其他易引诱蚜虫、橘小实蝇、蓟马和粉虱的 作物. ２NY/T４８９５—２０２５ ５􀆰４􀆰２　基质 选用含泥炭土、蛭石、珍珠岩主要成分的混合材料或其他满足脱毒组培苗正常生长的基质. ５􀆰４􀆰３　基质及器具消毒 用０􀆰５g/L~２􀆰０g/L的５０％多菌灵可湿性粉剂、甲基托布津８００倍~１０００倍液或经１２１℃、 １０５kPa条件下消毒３０min. ６　脱毒种苗繁育 ６􀆰１　嫁接繁育 ６􀆰１􀆰１　砧木培育 采集抗根腐、茎基腐病品种的种子,嫁接前２个~３个月在育苗基质中播种,当实生苗叶片达到６片~ １０片叶,茎粗为２􀆰５mm~３􀆰５mm时,切除顶端,作为嫁接砧木备用. ６􀆰１􀆰２　穗条准备 在生物隔离大棚内,以脱毒原种苗为母本,选择带１个~２个饱满叶芽的新梢和半木质化枝条作为穗 条.母本园每半年病毒检测１次,每株一年内至少被抽检１次. ６􀆰１􀆰３　嫁接培育 选择直径为２􀆰０mm~３􀆰０mm的穗条,剪成５􀆰０cm~７􀆰０cm的新梢或茎段作为接穗,在下端离下芽 眼４􀆰０cm以上,削成１􀆰０cm~２􀆰０cm的楔形切口,插入对应纵切深度的砧木中,用嫁接夹或嫁接套管固 定、愈合,保持环境温度２６℃~３３℃,前期(７d~１０d)保持空气相对湿度８５％~９５％,１０d之后相对湿 度为５０％~７０％. 注:在嫁接操作过程中,应保证所有物品都经消毒和干净,刀具经高温消毒或每切１棵砧木用７５％酒精消毒１次. ６􀆰２　扦插繁育 ６􀆰２􀆰１　插条准备 在生物隔离大棚内,以脱毒原种苗为母本,选择带１个~２个饱满叶芽的半木质化枝条作为插条.母 本园每半年病毒检测１次,每株一年内至少被抽检１次. ６􀆰２􀆰２　扦插培育 在生物隔离大棚内,将６􀆰２􀆰１半木质化插条切成１０cm~１５cm带芽茎段,在下端的最低端１􀆰０cm~ ２􀆰０cm处,斜切成(１􀆰０±０􀆰１)cm的切口,顶端侧芽处留１/３~１/２叶片,经含IBA、IAA、NAA等生根剂 处理,扦插于消毒的育苗基质中,保持温度２６℃~２８℃,空气相对湿度８０％~９５％. ６􀆰３　育苗管理 ６􀆰３􀆰１　水肥管理 脱毒原种苗浇灌用水应采用经过滤处理的天然水或自来水,所使用的有机肥料应符合NY/T５２５的 相关规定.脱毒种苗灌溉用水和施肥与常规管理相同,并注意及时排水. ６􀆰３􀆰２　病虫害防治 根据病虫害情况,选择高效低毒的药剂防治,使用农药应符合GB/T８３２１和NY/T１２７６的要求.隔 离棚内种苗常见病虫害防治方法见附录C. ７　种苗质量 ７􀆰１　基本要求 脱毒种苗应符合NY/T３９７２扦插苗、嫁接苗的基本要求. ７􀆰２　分级指标 脱毒嫁接苗、扦插苗的分级指标按照NY/T３９７２的规定执行. ７􀆰３　病毒检测 采用随机抽样,抽样数量参照NY/T２７２４的规定执行.特定病毒检测方法见附录B.病毒检测不合 ３NY/T４８９５—２０２５ 格的应立即移除. ８　包装储运 ８􀆰１　包装 应用洁净、透气性好、无带孔的硬纸箱或其他材