ICS 65.020.30 CCS B 41 13 河北省 地方 标准 DB 13/T 6273—2026 家禽心包积液 -肝炎综合征防控技术规程 2026 - 04 - 09发布 2026 - 05 - 09实施 河北省市场监督管理局 发布 DB 13/T 6273 —2026 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 本文件由 河北省农业农村厅 提出。 本文件起草单位： 河北农业大学、河北恩康牧业有限公司、尚义县农业农村局。 本文件主要起草人： 袁万哲、雷白时、韩荞忆、董晓峰、赵款、张武超、张云航、王淼、薛拥 志、陈福星、李伟、李睿文、李丽敏、张磊、李小永。 DB 13/T 6273 —2026 1 家禽心包积液 -肝炎综合征防控技术规程 1 范围 本文件规定了家禽心包积液 -肝炎综合征的诊断、预防和治疗等内容。 本文件适用于家禽心包积液 -肝炎综合征的防控。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用 文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单） 适用于本文件。 GB 16548 病害动物和病害动物产品生物安全处理规程 GB/T 25886 养鸡场带鸡消毒技术要求 GB/T 32148 家禽健康养殖规范 NY/T 388 畜禽场环境质量标准 NY/T 1168 畜禽粪便无害化处理技术规范 NY/T 3791 鸡心包积液综合征诊断技术 NY/T 5027 无公害食品 畜禽饮用水水质 NY/T 5038 无公害食品 家禽养殖生产管理规范 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 诊断 流行病学 4.1.1 流行特点 一年四季均可发生，但多发生于秋季、初春或春末、夏初 。 4.1.2 易感动物 鸡、鸭、鹅、鸽、鹌鹑等家禽 均可感染，多见于 20～30日龄的肉鸡。 4.1.3 传染源 病禽和带毒家禽 。 4.1.4 传播途径 主要通过粪便等途径水平感染 ，也可通过种禽垂直传播。 临床症状及病理变化 4.2.1 临床症状 家禽无明显临床表现突然死亡。 4.2.2 病理变化 DB 13/T 6273 —2026 2 剖检可见心肌柔软、心包积有淡黄色透明的液体，液体遇冷可凝固；肝脏肿胀、质地变脆，个 别死亡家禽脾脏肿大、肺脏淤血。发病家禽肝脏中央静脉和窦状隙广泛淤血、肝细胞脂肪变性，局 灶性肝细胞坏死，同时细胞浆和细胞核内可见嗜碱性包涵体。 病原学诊断 4.3.1 病原分离与鉴定 无菌采集棉拭子、组织等样本，选择鸡胚或 LMH等易感细胞，参照 NY/T 3791 进行病原分离， 将 收获的尿囊液或者细胞培养液选用 4.3.4或者4.3.5所述方法进行核酸鉴定与分析 。相关试剂的配制 见附录A。 4.3.2 病毒中和试验（ VN） 参照NY/T 3791 进行，相关试剂的配制见附录 A。 4.3.3 间接免疫荧光试验（ IFA方法） 按附录B规定的方法执行，相关试剂的配制见附录 A。 4.3.4 聚合酶链式反应（ PCR方法） 参照NY/T 3791 进行。也可 按附录C规定的方法执行，相关试剂的配制见附录 A。 4.3.5 实时荧光 PCR检测方法 参照NY/T 3791 进行。也可 按附录D规定的方法执行 ，相关试剂的配制见附录 A。 5 预防 生物安全管理 养殖场的场址选择、布局和卫生设施应符合 NY/T 5038 的要求；场区的空气环境质量应符合 NY/T 388的规定。严格消毒，其消毒方法和操作步骤应符合 GB/T 25886 的要求。定期开展杀虫、防蝇灭 鼠工作，消灭传播媒介和传染源。对病死鸡按 GB 16548 的要求、粪便按 NY/T 1168 的要求进行无害化 处理。 饲养管理 饲养管理按照 GB/T 32148 的规定执行；饮水按照 NY/T 5027 的规定执行。 检疫 引进家禽应隔离观察 14天后，采集泄殖腔拭子通过实时荧光 PCR检测阴性后混入大群饲养。 免疫接种 5.4.1 疫苗 宜采用鸡新城疫、禽流感（ H9亚型）、禽腺病毒病（ Ⅰ群，4型）三联灭活疫苗，禽腺病毒（ I群， 4型）灭活疫苗，鸡新城疫、禽流感（ H9亚型）、传染性法氏囊病、禽腺病毒病 （Ⅰ群，4型）四联灭 活疫苗等。 5.4.2 预防接种 按照疫苗使用说明书执行。 6 治疗 隔离消毒 对发病家禽立即隔离，并彻底消毒用具和鸡舍。对病死、剖检家禽尸体应进行无害化处理。 DB 13/T 6273 —2026 3 对症治疗 选用干扰素等抗病毒药物与禽腺病毒（Ⅰ群 4型）蛋黄抗体，混合肌注， 1次/天，连用 3 d～5 d； 饲料或饮水中添加保肝利尿等药物减轻肝脏炎症，排出积液；饲料或饮水中添加黄芪多糖提高机体 抵抗力； 1～2次/天，连用 3 d～5 d。 DB 13/T 6273 —2026 4 A A 附录 A （资料性） 试剂配制 A.1 1.0%琼脂糖凝胶 称取琼脂糖 1.0 g，放入100 mL 1 ×TAE电泳缓冲液中，加热融化，温度降至 60℃时，加入 5 μL核 酸染料，均匀铺板，厚度为 3 mm～5 mm。 A.2 50×TAE电泳缓冲液 A.2.1 0.5 mol/L EDTA溶液（pH 8.0） 称取EDTA 18.61 g ，加灭菌双蒸水至 100 mL，后用氢氧化钠调 pH至8.0。 A.2.2 TAE电泳缓冲液（ 50×） Tris 242 g ，冰乙酸 57.1 mL，0.5 mol/L EDTA 100 mL ，加灭菌双蒸水至 1000 mL。 A.3 溴化乙锭（ EB）溶液 溴化乙锭 20 mg，加灭菌双蒸水至 20 mL。 A.4 DEPC水 焦碳酸二乙酯（ DEPC）50 μL，加灭菌双蒸水至 100 mL，室温放置 6 h～8 h，121℃高压灭菌 20 min，分装到 1.5 mL DEPC 处理过的离心 管。 A.5 PBS缓冲液 A.5.1 A液（0.2 mol/L 磷酸二氢钠水溶液） NaH2PO4·H2O 27.6 g 先用适量蒸馏水溶解，最后用蒸馏水稀释至 1000 mL。 A.5.2 B液（0.2 mol/L 磷酸氢二钠水溶液） Na2HPO4·7H2O 53.6 g ，（或Na2HPO4·12H2O 71.6 g 或Na2HPO4·2H2O 35.6 g ）先用适量蒸馏水溶解， 最后用蒸馏水稀释至 1000 mL。 A.5.3 0.01 mol/L pH 7.2 磷酸盐缓冲液的配制 A液14 mL，B液36 mL，加氯化钠（ NaCl）8.5 g，最后用蒸馏水稀释至 1000 mL。 A.6 细胞培养用溶液 A.6.1 2×104 U/mL青霉素链霉素液（双抗） 青霉素、链霉素各 2×106 U溶于100 mL三蒸水中，过滤除菌，分装后， -20℃冻存备用。 A.6.2 500 mmol/L Hepes 贮存液 1.2 g Hepes 溶于10 mL三蒸水中，经 121℃高压灭菌 15 min，置-20℃冻存备用。 A.6.3 7.5%NaHCO 3 7.5 g NaHCO 3溶于100 mL三蒸水中， 115℃高压灭菌 20 min，4℃保存备用。 A.6.4 5×DMEM浓缩液