ICS 65.020.01 CCS B 01 15 内蒙古自治区 地方 标准 DB15/T 4298—2026 大麦抗叶斑病（ Bipolaris sorokiniana ） 田间鉴定技术规程 Technical code of practice for identification resistant level to barley leaf spot caused by Bipolaris sorokiniana in field 2026-02-10发布 2026-03-10实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发布 DB15/T 4298 —2026 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。 本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（ SAM/TC 20 ）归口。 本文件起草单位：内蒙古民族大学、内蒙古自治区农牧业科学院、通辽市农业技术推广中心、通辽 市高林屯种畜繁育中心、通辽市农牧科学研究所、巴彦淖尔市农牧科学研究所、呼伦贝尔市海拉尔区农 牧技术推广中心、乌兰察布市农林科学研究所。 本文件主要起草人： 李建波、徐寿军、赵艳琴、刘志萍、巴图、马宇、王磊、李国兴、王文迪、王 海泽、徐广祥、吕二锁、渠佳慧、李涛、温瑞强、葛明然、邢丽伟、郑成忠。 DB15/T 4298 —2026 1 大麦抗叶斑病（ Bipolaris sorokiniana ） 田间鉴定技术 规范 1 范围 本文件规定了进行大麦叶斑病抗性鉴定及评价技术的接种体制备、田间接种鉴定、病情调查、抗病 性评价和田间档案。 本文件适用于大麦叶斑病（ Bipolaris sorokiniana ）的田间抗性鉴定和评价。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 接种体制备 培养基的 制备 4.1.1 PDA培养基 马铃薯200 g，葡萄糖 20 g，琼脂18 g～20 g，蒸馏水 1000 mL。分装在三角瓶中， 121 ℃高压灭 菌20 min～30 min。 4.1.2 高粱粒培养基 将高粱粒用蒸馏水浸泡 20 min，煮沸后持续 10 min，取出后用蒸馏水冲 2次，平铺在吸水纸上待 微润、互不粘连后分装至三角瓶容量的 1/2～2/3，121 ℃高压灭菌 20 min～30 min。 接种液制备 4.2.1 病原菌的活化 将在-20 ℃保存的 B.sorokiniana 接种在PDA培养基上，置于 25 ℃条件下培养 5 d～7 d，从菌 落边缘打取直径为 6 mm的菌丝块，置于 PDA培养基上进行活化 2～3次用于病原菌扩繁。 4.2.2 病原菌扩繁 待PDA上的病原菌菌落生长至 2/3皿时，用打孔器沿菌落边缘打取菌丝块置于灭菌的高粱粒培养 基中进行扩繁。置于 25 ℃条件下培养 10 d～15 d，每隔3 d轻摇三角瓶 1次。 4.2.3 孢子悬浮液制备 DB15/T 4298 —2026 2 将接种病原菌的高粱粒培养基倒入盆中，加入适量的蒸馏水进行清洗，双层纱布过滤后用血球计数 板测定滤液中孢子数量，调整孢子浓度至 5.0×104个/mL左右，加入 0.03%Tween -20，备用。 5 田间接种鉴定 鉴定材料准备 鉴定材料采取随机区组排列，人工点播，每个品种播种 3行，行长 1 m，行距0.4 m，株距5 cm； 每5个品种设置 1个感病对照， 3次重复。 接种 5.2.1 接种时期 大麦孕穗到抽穗期对叶片进行人工喷雾接种。 5.2.2 接种方法 选择无风、凉爽的傍晚进行接种，保证叶片正反面均匀接种。 1 d后再次重复上述操作。 5.2.3 田间管理 接种前后适 时补灌，保持土壤潮湿。 6 病情调查 调查时间 在大麦抽穗期，待感病对照品种病斑占叶面积达到 50%以上时开始调查，每隔 7 d调查1次，共调 查 2次，记载病情严重程度。 调查方法 每个鉴定品种和对照品种随机抽样 30株，根据病害症状描述（见表 1），调查每株的病情级别， 并计算病情指数。 表1 大麦叶斑病抗性分级及病状描述[1,2] 严重度分级 病状描述 0 叶部无病斑 1 病斑占叶面积≤ 10% 2 10%＜病斑占叶面积≤ 30% 3 30%＜病斑占叶面积≤ 50% 4 50%＜病斑占叶面积 7 抗病性评价 DB15/T 4298 —2026 3 根据调查的病级，计算病情指数，病情指数计算公式如公式（ 1）： DI=∑（𝑁𝐴×𝑋𝐴） 𝑁×𝑀×100 ································ ······························· (1) 式中： DI——病情指数； NA ——各病级发病株数，单位为株； XA ——相对病级数值； N ——调查总株数，单位为株， M ——病害分级中的最高级别的代表数值。 鉴定材料的抗性评价方法按照表 2执行。 表2 大麦叶斑病抗性评价标准 病情指数（ DI） 抗性 DI=0 免疫 DI≤10.0 高抗 Highly resistant (HR) 10.0＜DI≤20.0 中抗 Moderately resistant (MR) 20.0＜DI≤40.0 中感 Moderately susceptible (MS) DI＞40.0 高感 Highly susceptible (HS) 8 田间档案 应建立田间档案，内容包括：鉴定材料名称、接种时间、调查时间、接种总株数、各病情级别发病 株数、病情指数和抗病性评价。 DB15/T 4298 —2026 4 参考文 献 [1] Fetch TG ，Steffenson BJ.Rating Scales for Assessing Infection Responses of Barley Infected with Cochliobolus sativus. Plant Disease ，1999，83：213-217. [2] 郭焕强，王文峰，姚全杰，等 .大麦主栽品种亲缘系数和对叶斑病的抗性分析 .植物遗传资源 学报，2016，17(4)：586-598.