ICS 65.020 CCS B 16 43 湖南省地方 标准 DB 43/T 3239—2025 豆类朱砂叶螨抗药性测定技术规程 Code of practice for determination of Tetranychus cinnbarinus resistance to pestcides on beans 2025 - 07 - 18发布 2025 - 10 - 18实施 湖南省市场监督管理局 发布 DB 43/T 3239— 2025 I 目次 前言 ................................................................................. II 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 仪器设备 ........................................................................... 1 5 试剂与材料 ......................................................................... 1 生物材料 ....................................................................... 1 试验药剂 ....................................................................... 2 试验试剂 ....................................................................... 2 无虫苗培养 ..................................................................... 2 6 抗药性测定方法 ..................................................................... 2 试虫采集与饲养 ................................................................. 2 药剂配制 ....................................................................... 2 琼脂培养基制备 ................................................................. 2 浸叶 ........................................................................... 2 接螨 ........................................................................... 2 结果检查 ....................................................................... 3 7 统计分析 ........................................................................... 3 统计分析 ....................................................................... 3 死亡率计算方法 ................................................................. 3 统计分析 ....................................................................... 3 8 抗性评估 ........................................................................... 3 敏感基线制定 ................................................................... 3 抗性倍数计算 ................................................................... 3 抗性水平分级与评估 ............................................................. 4 附录A（资料性） 朱砂叶螨对部分常用杀螨剂的敏感基线 ................................... 5 DB 43/T 3239— 2025 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由湖南省农业农村厅提出。 本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：湖南 人文科技学院、湖南省农业科学院、中国农业科学院、岳麓山实验室、湖南 农业大学、娄底市农科所、长沙市农业技术推广中心、宁乡市农业技术推广中心、 娄底市植保植检站 。 本文件主要起草人：郑慧新、金晨钟、王培、吴青君、刘秀、方勇、朱赞江、姚艳红、徐灵超、颜 健红、卢小舟、杨中侠、符伟、史晓斌、唐涛、李意成、郭开发、张尚志、周静、虢婷婷、谢梵、周怀 博。DB 43/T 3239— 2025 1 豆类朱砂叶螨抗药性测定技术规程 1 范围 本文件规定了豆类朱砂叶螨抗药性测定的仪器设备 、试剂与材料、 抗药性测定方法、统计分析、抗 性评估等技术要求。 本文件适用于叶片浸渍法测定豆类作物上朱砂叶螨的抗药性。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 NY/T 1154.14 农药室内生物测定试验准则 杀虫剂第 14部分：浸叶法 NY/T 3539 叶螨抗药性技术监测规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 叶片浸渍法 leaf -dipping method 将叶片浸没于农药药液后，放置在琼脂上，接入待测昆虫进行毒理测定的方法。 抗药性 resistance 昆虫具有忍受杀死正常种群大多数个体的药量的能力在其种群中发展起来的现象。 敏感基线 susceptibility baseline 通过生物测定方法得到的害螨种群对药剂的剂量反应曲线。 致死中浓度 （LC 50） 药剂杀死害螨群体中一半个体所需要的药剂浓度。 4 仪器设备 电子天平（0.1 mg）、烧杯、量筒、培养皿、微波炉、打孔器、移液枪或移液器、毛笔、人工气候 培养箱。 5 试剂与材料 生物材料 供试害螨：采集自田间蔬菜作物上朱砂叶螨成螨。 DB 43/T 3239— 2025 2 供试作物：未接触任何农药的蔬菜叶片。 试验药剂 杀螨剂原药或制剂，制剂需注明通用名、商品名、有效成分含量、生产产家。 试验试剂 丙酮、二甲基亚砜、曲拉通 X 100、吐温 - 80、蒸馏水、琼脂粉。 无虫苗培养 将营养土湿润后放入育苗盘，将蔬菜种子埋入空穴中进行培养，培养条件为温度（26 ±1）℃，相 对湿度（60±5）%，光照周期 16 h:8 h（L:D），待蔬菜种子发育至两片真叶期后分苗待用，整个培养 周期不接触任何农药。 6 抗药性测定方法 试虫采集与饲养 按照随机抽样原则，在蔬菜作物上采集朱砂叶螨成螨，在室内人工气候培养箱内饲养，设定培养箱 温度（ 26± 1）℃，相对湿度 （60±5）%，光照周期 16 h:8 h（L:D ），待测叶螨采用无虫苗植株饲养， 或使用无虫苗叶片在培养皿（9 cm ）中饲养。当叶片被取食至红色斑点占叶面 l/3或叶片枯黄时更换无 虫苗和新鲜叶片。 药剂配制 6.2.1 试验制剂配制 用电子天平称量适量制剂，用去离子水或蒸馏水溶解后，等比稀释待用，以去离子水或蒸馏水作为 空白对照。 6.2.2 试验原药配制 用电子天平称量适量试