浙江省茶叶学会 发布 茶树田间炭疽病抗性鉴定与评价技术规程 Technical code of practice for identification and evaluation of field resistance of tea anthracnose 浙江省茶叶学会团体标准 2025-11-10 发布 2025-12-10 实施ICS 65.020.20 CCS B 05 ZJTSS T/ZJTSS 036—2025 全国团体标准信息平台 T/ZJTSS 036 —2025 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的 规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由浙江省农业科学院提出。 本文件由浙江省茶叶学会归口。 本文件起草单位：浙江省农业科学院、浙江农林大学、中国农业科学院茶叶研究所、浙江大 学。 本文件主要起草人：李清声、卢秦华、王玉春、李达、任苧、汪瑛琦、王新超、郑新强、叶 俭慧。 全国团体标准信息平台 T/ZJTSS 036 —2025 1 茶树田间炭疽病抗性鉴定与评价技术规程 1 范围 本文件规定了茶炭疽病的鉴定方法、调查方法和抗性评价方法。 本文件适用于浙江省茶区对茶炭疽病的抗性鉴定与评价。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用 文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单） 适用于本文件。 NY/T 2943 茶树种质资源描述规范 3 术语和定义 NY/T 2943 中界定的及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 茶炭疽病 Tea anthracnose 由茶座盘孢菌（ Discula theae-sinensis , 异名 Gloeosporium theae-sinensis ）侵染引发的一种主要危 害成熟叶片、形成红褐色大型枯斑的茶树真菌病害。茶炭疽病的症状、病原、病害循环、发病条件 见附录 A。 4 鉴定方法 4.1 样品采集 选取树冠中上部成熟病叶叶片，对出现褐色坏死病斑叶片进行视觉表征判别。症状见附录 A。 4.2 病原菌分离与鉴定 4.2.1 病原菌分离与培养 采用单孢分离法分离病斑上的真菌。用灭菌刀片刮取叶片病斑上的分生孢子盘，进行显微镜镜 检。后将分生孢子悬浮液涂布到马铃薯葡萄糖琼脂（ Potato Dextrose Agar ，PDA）培养基上，在 25 ℃ 下倒置培养。待长出菌落后，挑取单个菌落到新的 PDA培养基上培养，用于病原菌鉴定。 4.2.2 病原菌鉴定 采用形态学（附录 A）和分子生物学分析（附录 B）相结合的方式进行鉴定。 全国团体标准信息平台 T/ZJTSS 036 —2025 24.2.3 结果判断 病原菌形态特征符合附录 A的描述、分子生物学分析（附录 B）鉴定显示该病原菌可与模式种 聚为一簇，即可判定样本中含有茶炭疽病病原菌。 5 调查方法 5.1 调查时间 每年5月至10月，同区域易感品种出现病症时，进行病情调查。 5.2 调查方法 当茶园面积 ≤ 20亩时，以梅花形均匀选取 5个取样点，每个取样点随机选取一米茶行的茶树树 冠中上部叶片 20片；当茶园面积 > 20亩时，每 20亩设置为一个调查小区，每个小区内以梅花形均 匀选取5个取样点，每个取样点随机选取一米茶行的茶树树冠中上部叶片 20片，各小区独立进行 抗性评价。所有取样均排除边行及行头、行尾 2 m ~ 3 m 。重复3次。连片茶园种植不同品种茶树， 应区分品种设定调查区域，并根据各品种面积按照上述方法进行调查。 5.3 病情分级 依据茶树叶片发病程度，进行病情分级，见表 1。 表 1 茶炭疽病病情级别与症状 病情级别 症状描述 0 叶片健康无病斑 1 病斑面积占整片叶面积的 ≤ 10% 2 10% < 病斑面积占整片叶面积的 ≤ 25% 3 25% < 病斑面积占整片叶面积的 ≤ 50% 4 病斑面积占整片叶面积的 > 50% 5.4 发病率 用病叶数占调查总叶数的百分率表示。计算公式见式 1。 发病率=发病叶片数 调查叶片数×100% （式1） 5.5 病情指数 全国团体标准信息平台 T/ZJTSS 036 —2025 3 评价植物病害发生程度的综合性指标，根据调查总数、病情级别以及对应级别的发病样本数计 算而来。计算公式见式 2。 𝐷𝐼=∑(௡೔×௦೔) ே×ସ×100 （式2） DI——病情指数； ni——各级发病级别叶片数； si——各级发病级数； N——调查总叶片数； 4——最高发病级别。 6 抗性评价方法 通过间隔 10天的2次调查，依据茶树叶片病情指数最大值进行抗性评价。评价标准见表 2。 表 2 茶炭疽病抗性评价标准 抗性评价 评价标准 抗 (R) DI ≤ 5 中抗 (MR) 5 ＜ DI ≤ 15 感 (S) 15 ＜ DI ≤ 25 高感 (HS) DI ＞ 25 全国团体标准信息平台 T/ZJTSS 036 —2025 4附 录 A （资料性） 茶炭疽病症状、病原及发病条件 A.1 症状 发生于当年生成熟叶上。病斑从叶缘或叶尖发生，初为浅绿色病斑，水渍状，迎光观察病斑呈 半透明状，后病斑逐渐扩大，颜色逐渐转为黄褐色或红褐色，最后变为灰白色，病健分界明显。后 期病斑正面散生细小的黑色颗粒，为病原菌的分生孢子盘。 图 A.1 茶炭疽病病叶典型症状 A.2 病原菌形态 病原菌为茶座盘孢菌（ Discula theae-sinensis , 异名Gloeosporium theae-sinensis ）。分生孢子盘 圆形、黑色，直径 71 µm ~ 143 µm 。分生孢子盘内有分生孢子梗，无色，单胞，顶端着分生孢子。 分生孢子无色，呈纺锤状，内有 1个 ~ 2个脂滴，大小为 3.2 ~ 6.3 × 1.7 ~ 3.1 µm 。 标引号说明： 1——PDA 培养基上菌落正面； 2——PDA 培养基上菌落背面； 3——分生孢子。 图 A.2 茶炭疽病病原菌形态特征图 20 µm 全国团体标准信息平台 T/ZJTSS 036 —2025 5 A.3 病害循环 茶炭疽病病原菌以菌丝体或分生孢子盘在茶树病叶上越冬。来年春季，温度上升到 20 ℃，相 对湿度达 80% ~ 90% 时，病原菌便可产生分生孢子。在适宜的温度和湿度条件下，分生孢子可通过 叶片的毛状体侵入叶片内部，并形成菌丝在组织间蔓延，经 15天 ~ 20天产生新的病斑。随后病斑 经生长发育产生分生孢子盘和分生孢子，借风雨传播，进行再侵染。 A.4 发病条件 茶炭疽病易发生在高温高湿的环境条件下。当温度在 20 ℃~30 ℃范围内，相对湿度 90%以上 时，有利于分生孢子侵入。 全国团体标准信息平台 T/ZJTSS 036 —2025 6附 录 B （规范性） 茶炭疽病分子鉴定 B.1 真菌基因组DNA提取 将分离到的病原菌接于 PDA培养基上，倒置于培养箱中， 25℃黑暗培养 7天。使用灭菌后的 玻片刮取培养基表面的菌丝，采用 CTAB法或商品化的丝状真菌 DNA提取试剂盒，提取菌株的基 因组DNA。 B.2 分子生物学鉴定 以基因组 DNA为模板，分别以引物对 LR0R/LR7 和EF1-728F/EF1-986R ，扩增LSU和EF基 因序