ICS65.080 CCSB13 T/SNLT 团体标准 T/SNLT0045-2025 农用芽孢杆菌发酵培养技术规程 2025-12-08发布 2025-12-08实施 石河子农产品流通协会发布 全国团体标准信息平台 T/SNLT0045-2025 I目次 前言................................................................................II 1范围.................................................................................1 2规范性引用文件.......................................................................1 3术语和定义...........................................................................1 4生产环境和设备要求...................................................................2 4.1生产环境......................................................................2 4.2生产设备......................................................................2 5培养基...............................................................................2 5.1一般要求......................................................................2 5.2种子培养基....................................................................2 5.3发酵培养基....................................................................2 5.4固体培养基....................................................................3 6发酵工艺流程.........................................................................3 6.1发酵生产流程..................................................................3 6.2菌种要求......................................................................3 6.3灭菌方法......................................................................3 6.4接种方法......................................................................4 6.5发酵工艺参数..................................................................4 6.6发酵液处理....................................................................4 7指标检测.............................................................................4 7.1抽检检测......................................................................4 7.2感官检测......................................................................5 7.3有效活菌数测定................................................................5 7.4杂菌率测定....................................................................5 8储运.................................................................................5 附录A（资料性）发酵生产用培养基.......................................................6 全国团体标准信息平台 T/SNLT0045-2025 II前言 本文件按照GB/T1.12020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》给出的 规则起草。 本文件由石河子农产品流通协会提出并归口。 本文件起草单位：中国农业大学、阿克苏嘉邦肥业有限公司、石河子大学。 本文件主要起草人：郭岩彬、邵长龙、王开勇、崔振岭、王琛、王彤、刘俊林、樊华、潘旭东、王 雪静、陆璐。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 全国团体标准信息平台 T/SNLT0045-2025 1农用芽孢杆菌发酵培养技术规程 1范围 本文件规定了农用芽孢杆菌发酵培养技术的术语和定义、生产环境和设备要求、培养基、发酵工艺 流程、指标检测和储运等内容。 本文件适用于农用芽孢杆菌发酵培养，微生物肥料生产企业和其他相关单位参照使用。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本使用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB3095环境空气质量标准 GB3838地表水环境质量标准 GB20287农用微生物菌剂 GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求 GB/T41727农用微生物菌剂功能评价技术规程 NY/T1109微生物肥料生物安全通用技术准则 SN/T2632微生物菌种常规保藏技术规程 3术语和定义 GB20287、GB/T41727界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1农用芽孢杆菌Bacillusinoculantsappliedinagriculture 芽孢杆菌科、芽孢杆菌属，革兰氏阳性菌，一种需氧菌。菌体杆状，无荚膜，周生鞭毛，能运动。 可形成内生抗逆芽孢，生长、繁殖速度较快，菌落表面粗糙不透明，灰白色或微黄色。无致病性，并具 有直接或间接改良土壤、恢复地力，维系根际微生物区系平衡，促进作物生长，调节作物抗逆，降解有 毒、有害物质等作用，应用于农业生产，通过其中生命活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长、 改善农产品品质及农业生态环境。 3.2菌种strain 全国团体标准信息平台 T/SNLT0045-2025 2单一遗传背景、由单菌落来源，用于微生物扩繁或菌种资源保藏的培养物。按照来源、扩繁体积可 以分为初级菌种、一级菌种、二级菌种等。 3.3溶解氧dissolvedoxygen 溶解在水中的空气中的分子态氧称为溶解氧，水中的溶解氧的含量与空气中氧的分压、水的温度都 有密切关系，在发酵聚谷氨酸时所测值为溶解在发酵液中的分子态的氧被菌体消耗利用后的剩余含量。 4生产环境和设备要求 4.1生产环境 应符合如下条件： ——厂区空气质量达到GB3095中二类环境空气质量标准要求。 ——发酵生产用水应符合GB3838中III类水质要求，其他用水应符合GB3838中IV类水质要求。 ——发酵生产场地及发酵相关设施应符合安全、环保、消防等条件要求。 ——发酵生产场地需配置消毒灭菌设施。菌种储藏、无菌操作设备应与生产场地相对隔离并定期消 毒。 4.2生产设备 采用不锈钢发酵罐，设备体积根据生产规模自定。主要生产设备有种子罐、液体发酵罐、补料罐、 冷水机、配料机、空压机、蒸汽锅炉等。 5培养基 5.1一般要求 培养基所使用的原材料应满足菌液生产要求，具体按GB4789.28的规定执行。对于首次使用的发 酵原料应通过摇瓶或小型发酵试验后再用于发酵生产。 5.2种子培养基 农用芽孢杆菌的初级菌种及一级菌种使用的种子培养基中应含有易被菌种吸收利用的碳氮源，营养 丰富。种子培养基见附录A中的表A.1。 5.3发酵培养基 5.3.1发酵培养基原料主要包括淀粉、淀粉糖、蔗糖、葡萄糖、糖蜜、甘油等为主要碳源，豆粕粉、 蛋白胨、酵母提取物、硫酸铵为氮源，适量的金属盐离子，碳酸钙等pH缓冲剂等。 5.3.2高含菌量发酵培养基配方需要以发酵菌量为目标，通过单因子实验、正交实验和响应面实验等 实验优化培养基的原料和用量。 全国团体标准信息平台 T/SNLT0045-2025 35.3.3高活性代谢物发酵培养基配方需要以代谢产物合成量为目标，通过单因子实验、正交实验和响 应面实验等实