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ICS 11.220 CCS B 41 团体标准 T/CVMA 357—2026 常见二宿主、三宿主硬蜱在兔体上的繁殖 技术规范 Technical specifications for the rearing of common two-host and three-host hard ticks on rabbits 2026 - 3 - 4发布 2026 - 3 - 4实施 中国兽医协会 发布 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 中国兽医协会 CVMA全国团体标准信息平台 T/CVMA 357—2026 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由 河北师范大学 提出。 本文件由中国兽医协会归口。 本文件起草单位: 河北师范大学、中国农业科学院兰州兽医研究所、河北农业大学、成都医学院 。 本文件主要起草人: 陈泽、刘敬泽、任巧云、关贵全、陈婧仪、许肖枫、于志军、杨小龙、胡永红、 王多、鲍荣、王辉、王芳、张艳凯、殷宏、刘军龙、韩蓉 。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 中国兽医协会 CVMA全国团体标准信息平台 T/CVMA 357—2026 1 常见二宿主、三宿主硬蜱在兔体上的繁殖技术 规范 1 范围 本文件规定了实验室繁殖常见二宿主、三宿主硬蜱的术语和定义、 设施要求 (光照培养箱和兔房) 、 繁殖管理技术以及动物福利与伦理 的要求。 本文件适用于二宿主和三宿主常见硬蜱在 新西兰白兔 上繁殖。 本文件适用于不携带人畜共患病病原的清洁蜱繁殖。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中, 注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB 3095 环境空气质量标准 GB 14925 实验动物 环境及设施 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 NY/T 1167 畜禽场环境质量标准及卫生控制规范 RB/T 061 实验动物安乐死技术规范 T/CVMA 228 普通级实验兔饲养管理规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 硬蜱 hard ticks 硬蜱是蜱螨亚纲 Acari寄螨总目 Parasitiformes 蜱目Ixodida硬蜱科Ixodidae 所含蜱类的简称, 身体 具有几丁质的盾板,故称硬蜱。它们暂时性寄生在陆地脊椎动物体表,主要宿主为家畜,也包括人。随 着气候变暖和人类活动的频繁干预,各种蜱媒病日益严峻,给畜牧业和人类健康带来极大危害。 3.2 二宿主蜱 two-host ticks 幼虫到若虫的发育阶段不离开宿主,在同一宿主上完成,成虫则需要寻找另一个宿主再行吸血寄生 的蜱称为二宿主蜱。其生活史为:卵孵化出幼虫后,幼虫寻找并附着在第一宿主上吸血直至饱血 ,但并 不脱离宿主,直接在宿主上蜕皮变为若虫并继续吸血,饱血后从该宿主上脱落,蜕皮变为成虫;成虫寻 找第二宿主 再行吸血,饱血后脱离第二宿主,在环境中完成产卵。 3.3 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 357—2026 2 三宿主蜱 three-host ticks 幼虫、 若虫和成虫三个阶段分别需要在三个不同的宿主上吸血寄生的蜱称为三宿主蜱。 其生活史为: 卵孵化出幼虫后, 幼虫会寻找并附着在第一宿主上吸血直至饱血, 然后从宿主体上脱落, 蜕皮变为若虫; 若虫再寻找第二个宿主再行吸血,饱血后从宿主体上脱落,蜕皮变为成虫;成虫最后寻找第三宿主再行 吸血,饱血后脱离宿主,在环境中完成产卵。 3.4 光照培养箱 illuminated incubator 是一种集光照、温度、湿度控制于一体的环境调控设备,能够为生物(如昆虫、植物、微生物)提 供一个稳定、均匀且可控的人工气候环境 。 4 生物安全要求 实验室生物安全要求参照 GB19489 的规定执行。特别注意下列事项 : 养殖过程中,操作人员身体的任何部位都避免与蜱直接接触;使用之后的新西兰白兔应立即处死并 进行消毒处理;严防养殖的蜱逃逸;弃用的蜱,在丢弃之前均处死并进行消毒处理。 5 光照培养箱的选择和使用 5.1 光照培养箱的选择 用于非寄生期硬蜱(卵、幼虫、若虫、成虫)的保存,通过稳定的温、湿度与光周期控制,保障蜱 的生长发育节律一致,为后续实验提供均一的实验材料。 在保存活蜱时,光照培养箱的选择十分关键。 根据大部分硬蜱的生存适宜温度及湿度重点考虑以下因素: ①温度:可调控,范围 4 ℃ ~ 44 ℃(或更 大范围) ,精度 ± 1,;②相对湿度:可调控,范围 50 % ~ 94 %;③光照强度: 0 ~ 30000 lux 可调,且可 设定光周期。 5.2 光照培养箱的使用 将培养箱置于实验室内阴凉干燥、通风良好的区域,远离热源及阳光直射;保持放置平稳,防止移 位。同时,为保证有效散热,与墙壁之间距离应大于 10 cm, 箱体侧面应有 5 cm 间隙,箱体顶部至少 应有 30 cm 空间,保证培养箱内环境恒定,定时对环境温度及培养箱进行监测,确保一切正常,符合实 验要求。同时在培养箱的四壁涂抹凡士林或粘性胶带并定期检查,作为防止蜱逃逸的物理屏障。 5.3 替代方法 如果无光照培养箱, 可选用干燥器作为替代, 在干燥器中添加预先制备好的饱和 NaCl或KCl溶液, 在干燥器的托盘上放置一些纱布,一是避免装蜱的管子掉入饱和盐水中,二是起维持湿度的作用。干燥 器可放置在室温 阴暗处,维持正常的自然光。同时在干燥器 盖子附近 的内外壁涂抹凡士林或粘性胶带并 定期检查,作为防止蜱逃逸的物理屏障。 6 兔房建设要求 6.1 基本要求 :主要用于新西兰白兔的饲养,为寄生期硬蜱(幼虫、若虫、成虫)提供稳定的供血体 系,保障其顺利完成吸血及发育过程。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 357—2026 3 6.2 场地选择 :通风、排水良好 。 6.3 环境控制: 内部安装空调,保证室内温度适合新西兰白兔生存,场地干净,按照 GB 14925 的相 关要求执行。 6.4 防逃逸处理: 墙体、地面、天花板采用无缝材料(如耐腐蚀瓷砖、密封涂料)铺设,接缝处用防 水密封胶填充,杜绝蜱通过缝隙攀爬逃逸;门窗缝隙应涂抹凡士林或粘性胶带;饲养室入口处安装连续 不间断的隔离水槽以防止蜱逃逸。 6.5 空气质量要求: 符合GB 3095 中环境空气质量功能区二类区要求 。 6.6 水质要求: 符合 NY/T 1167中畜禽饮用水 的相关要求 。 6.7 清洁与灭蜱处理: 对兔粪定期清理,参考 有关硬蜱综合防治技术要求 对兔房定期清洁,并进行灭 蜱。 7 繁殖管理 7.1 蜱种源管理 建立种源管理记录表,登记蜱种来源,野外采集的要记录蜱种名、来源地(包括 GPS坐标)、采 集人、宿主物种、采集时间、采集生境;实验室繁殖的要记录蜱种名、繁殖人,并生成二维码标签。 7.2 繁殖条件 7.2.1 维持兔房温度恒定,气温稳定在 26 ℃左右。 7.2.2 兔房内可根据需要配备 相应数量的兔笼, 采用单笼饲养模式(每笼饲养 1 只新西兰白兔) 。 每 日定时饲喂新西兰白兔全价颗粒饲料确保实验兔营养均衡 ,及时清理笼内兔粪、 残留饲料及垫料等污物, 并进行灭蜱及消毒处理。 7.2.3 选择身体强健的 新西兰白兔作为硬蜱 繁殖宿主。 7.2.4 将新西兰白兔耳朵根部或背部的毛发用理毛器清理干净,并用白棉布依据兔耳、兔背的尺寸, 制备适配对应部位的白棉布套(耳套为圆筒状,背套上部为圆筒状但贴近背部区域为喇叭形) (见图 1、 图2);将布套对应贴合兔耳或兔背区域后,一端用医用胶带或胶水环绕固定于耳根处或背部周边部位, 随后将蜱放入布套内,再用橡皮筋扎紧布套的开口端,防止蜱爬出。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 357—2026 4 图1 兔耳上饲喂蜱 及耳套的切面图 图2 兔背上饲喂蜱 及背套的切面图 7.3 繁殖方法 7.3.1 二宿主蜱的繁殖方法 二宿主蜱的繁殖具体流程如下:将由卵孵化的饥饿幼虫接种于新西兰白兔体表,幼虫吸血 3 ~ 5 d 后饱血,在原宿主体表上直接蜕皮发育为若虫 (与幼虫相比, 若虫体型显著增大, 足由 3对增至 4 对) , 新蜕皮的若虫会持续叮咬宿主,直到饱血后才主动脱离宿主。从饥饿幼虫到若虫饱血脱离,整个阶段历 时10余天到数十天,具体时间因蜱类属种差异而异。若虫饱血脱落后,需及时收集到培养管中,置于 培养箱的管架上, 经数十天可蜕皮为成 虫(与若虫相比, 成虫体型进一步明显增大, 身体腹面具生殖孔) 。 蜕皮后的饥饿成 虫可接种到第二宿主体表,吸血 4 ~ 10 d饱血,之后脱离宿主。饱血雌蜱脱落后也需及 时收集到培养管中并放置培养箱内待其产卵, 子代幼虫孵化后可直接接种新的第一宿主, 实现连续培养。 需注意,多数饱血雄蜱不主动脱离

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T-CVMA 357-2026 常见二宿主、三宿主硬蜱在兔体上的繁殖技术规范 第 1 页 T-CVMA 357-2026 常见二宿主、三宿主硬蜱在兔体上的繁殖技术规范 第 2 页 T-CVMA 357-2026 常见二宿主、三宿主硬蜱在兔体上的繁殖技术规范 第 3 页
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