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ICS 11.220 CCS B 41 团体标准 T/CVMA 336—2026 犬科实验动物感染细粒棘球绦虫技术规范 Technical specification for experimental canine animals infected with Echinococcus granulosus 报批稿 中国兽医协会 发布 2026 - 1 - 14发布 2026 - 1 - 14实施 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 中国兽医协会 CVMA全国团体标准信息平台 T/CVMA 336—2026 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由 中国兽医协会 提出并归口。 本文件起草单位: 新疆畜牧科学院兽医研究所(新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心) 、新疆生 产建设兵团畜牧兽医工作总站、新疆兴牧源农业有限责任公司、吉木萨尔县动物疫病预防控制中心、木 垒县动物疾病预防控制中心、奇台动物疾病预防控制中心 、伊犁州动物疫病预防控制中心 、昌吉州动物 疾病预防控制中心、巴州动物疾病控制与诊断中心、新疆农业大学 。 本文件主要起草人: 班万里、赵莉、吾力江 ·卡马力、刘帅、潘星羽、王冰洁、张壮志、张旭、艾 尔肯·艾沙、王思云、艾分 ·沙比汗、雒维东、穆尼拉 ·特列吾汗、权晨曦、张玲、王延、古丽扎提 ·塔 力甫汗、喻昌盛、慕永辉 。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 336—2026 II 引 言 包虫病(棘球蚴病) 是一种严重的人兽共患慢性寄生虫疾病,呈世界性分布, WOAH将该病列为 B类病,我国农业农村部《一、二、三类动物疫病病种名录》 将其列为二类动物疫病。囊型包虫病是由 细粒棘球绦虫的幼虫(细粒棘球蚴)寄生于中间宿主组织器官所致,多见于农牧区,我国主要分布在新 疆、甘肃、宁夏、青海、四川、内蒙和西藏等西部 7省区,覆盖国土面积约 44%。囊型包虫病严重危害 疫区人民健康、 农副产品绿色生产、 畜牧业发展、 食品和环境安全, 极大的制约着乡村振兴战略的实施。 制定切实可行的囊型包虫病高效综合防制措施迫在眉睫,防控措施的制订需要以检测诊断、疫苗研 制、药物研发、致病机理等 方面研究为支撑。动物模型的建立对动物疫病发展趋势、临床表现、检测诊 断、疫苗研制、药物研发、治病机理研究和防控等起重要作用,特别是寄生虫病原学以虫体形态作为最 主要的鉴别依据, 因此急需 建立囊型包虫病病原,即细粒棘球绦虫感染动物模型。 本文件中动物模型建立方法适用于类似囊型包虫病的犬科动物寄生虫病感染模型建立、对疫苗免 疫效果保护判定、新药物研发药效判定及检测诊断方法的敏感性、特异性研究;获得的相关样品适用于 囊型包虫病的病原学基础研究、检测诊断、致病机理研究和防控等。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 336—2026 1 犬科实验动物感染细粒棘球绦虫 技术规范 1 范围 本文件规定了犬科动物感染细粒棘球绦虫模型建立的技术要求。 本文件适用于从事人兽共患囊型包虫病 防控研究、检测诊断、疫苗研制、药物研发、致病机理研究 等活动的单位和个人。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中, 注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 GB/T 14922.1 实验动物 寄生虫等级与监测 GB/T 14922.2 实验动物 微生物等级与监测 GB/T 14925 实验动物 环境及设施 GB/T 32948 犬科动物感染细粒棘球绦虫粪抗原抗体夹心酶联免疫吸附试验诊断技术 GB/T 36195 畜禽粪便无害化处理技术规范 GB/T 39646 实验动物 健康监测总则 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 DNA:脱氧核糖核酸( deoxyribonucleic acid ) Eg:细粒棘球绦虫( Echinococcus granulosus ) EgPSC:细粒棘球绦虫原头蚴( Echinococcus granulosus protoscolices ) HE染色法:苏木精 -伊红染色法( hematoxylin -eosin staining ) PCR:聚合酶链式反应( polymerase chain reaction ) PSC:原头蚴( Protoscolices ) 5 感染、剖检场所与人员要求 5.1 感染、剖检场所 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 336—2026 2 感染与剖检场所应远离人员 聚集区域 和动物饲养密集地区。应划分为准备区和污染区,两区之间应 设物理屏障。准备区为防护用品及工作人员穿戴防护用品的区域;污染区为感染区和剖检操作区域,严 禁非工作人员进入。 5.2 剖检器材、试剂和耗材 5.2.1 配备手术台、绳子、解剖刀、剪刀、止血钳、镊子等剖检材料。 5.2.2 配备普通光学显微镜、载玻片、盖玻片、离心机、 15 mL离心管、 50 mL离心管、 2 mL 离心 管、温度计、 1000 mL锥形瓶、 500 mL烧杯、 2 mL冻存管、 5 mL注射器、 无菌培养皿 、巴斯德吸 管、水桶、封口袋、摄影器材。 5.2.3 配备 0.9 %氯化钠溶液、 4 %多聚甲醛、 RNAlater 、0.9 %氯化钠溶液( 37 ~ 40 ℃)、麻醉剂。 5.2.4 实验(采样)场所应设置更衣室,人员进入实验室前应跟换防护服,穿着防护设备。 5.3 实验人员要求 5.3.1 开展实验前需通过动物伦理委员会审定,实验操作要符合实验动物伦理标准。 5.3.2 应对所有参与实验人员进行生物安全、实验室规则的培训,掌握相关仪器、设备、防护用品使 用的操作步骤和要点,使其能进行正确操作并使用;对实验室人员进行人工感染实验犬的操作及知识 培训,主要包括:临床样本采集、处理 方法;动物的饲养 、观察、称重、测温、记录及动物福利 等; 动物麻醉、感染、采样等技术操作 方法; 动物解剖、病理取材 方法。 6 实验犬质量控制要求 6.1 实验犬要求 6.1.1 细粒棘球绦虫人工感染犬选用 10 ~ 18月龄健康的比格 实验犬。 6.1.2 实验犬体重 约9 kg ~ 12 kg,需满足实验条件。 6.2 感染、剖检场所实验犬背景资料的确认 应选用背景清楚的比格实验犬进行人工感染实验。实验犬的背景信息应包括:年龄、性别、微生物 监测情况、寄生虫监测情况、动物 繁育及运转记录等。寄生虫监测 和微生物监测 分别按 GB/T 14922.1 、 GB/T 14922.2 的相关内容进行 。 6.3 动物饲养 6.3.1 动物饲养环境按 GB/T 14925 相关要求进行。 6.3.2 实验犬应单笼饲养; 6.3.3 实验犬应建立档案,编号并记录耳号。 6.3.4 按时为实验犬提供狗粮和饮水,并及时清洁。 6.3.5 实验犬的食盆和水盆单独使用,避免混用。 6.4 实验犬常规检查 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 336—2026 3 6.4.1 实验犬临床观察 实验过程中对实验犬的临床 状况进行观察并记录,如发现异常,应对异常进行记录并作后续处置。 观察项目包括 以下内容: a) 实验犬的摄食和摄水量。 b) 实验犬自然状态下被毛外观。 c) 实验犬的活跃度,是否存在行动障碍,有无持久弓背、震颤等现象。 d) 实验犬头部、眼睑、肛门、外生殖器、尾部、四肢等处有无异常。 6.4.2 实验犬外观评价 实验犬的外观评价 包括以下内容: a) 实验犬精神状态良好、活动自如。 b) 实验犬肢体匀称、四肢无残缺、无畸形和外伤。 c) 实验犬皮肤弹性良好紧贴身体无创伤且被毛光亮、色正。 d) 实验犬发育良好且体质健壮。 e) 实验犬天然孔无异常分泌物。 6.5 实验犬驱虫操作要求 6.5.1 操作规程 6.5.1.1 实验犬环境适应 购置的实验犬经 检疫合格后,在动物室犬笼中按标准饲养,进行至少 7 d的适应性饲养,具体饲养 管理技术要求 见附录 A。 6.5.1.2 驱虫 对实验犬联用吡喹酮( 5 mg/kg)和阿苯达唑( 20 mg/kg)进行驱虫,每天驱虫一次, 连续驱虫 3 d。 采集驱虫后的粪便置于 -80 ℃ 冷冻 7 d备用。 7 实验犬人工感染的技术要求 7.1 EgPSC的采集 从屠宰场采集患有囊型包虫病的脏器若干套,选用包囊直径需在 2 cm以上,在实验室收集 EgPSC, 具体操作见附录 B。 7.2 EgPSC的鉴定 7.2.1 形态学鉴定 7.2.1

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