ICS65.020.20 LY B 61 中华人民共和国林业行业标准 LY/T2449—2015 霍山石斛种苗繁育技术规程 Technical specifications of seedlings breeding of Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng 2015-01-27发布 2015-05-01实施 国家林业局 发布 中华人民共和国林业 行业标准 霍山石斛种苗繁育技术规程 LY/T2449—2015 中国标准出版社出版发行 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029） 北京市西城区三里河北街16号（100045) 网址www.spc.net.cn 总编室：(010)68533533发行中心：(010)51780238 读者服务部：（010)68523946 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 各地新华书店经销 开本880×12301/16印张0.5 字数10千字 2015年5月第一版2015年5月第一次印刷 * 书号：155066·2-28610 定价 14.00元 如有印装差错由本社发行中心调换 版权专有侵权必究 举报电话：(010)68510107 LY/T2449—2015 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由安徽省林业厅提出。 本标准由国家林业局归口。 本标准起草单位：皖西学院、安徽圣农生物科技股份有限公司。 本标准主要起草人：陈乃富、戴军、李耀亭、戴亚峰、韩邦兴、陈存武、陈乃东、姚厚军、张莉、李维群、 何祥林、高久双、李名海、叶其斌、黄贤稳、姚皖湘。 LY/T2449—2015 霍山石斛种苗繁育技术规程 1范围 本标准规定了霍山石斛（DendrobiumhuoshanenseC.Z.TangetS.J.Cheng）种苗繁育的种源、果 选择与处理、种苗培育、种苗质量、存放及假植、文件记录和档案管理。 本标准适用于利用霍山石斛种子，采用无菌播种技术繁育霍山石斛种苗。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样 GB/T5749生活饮用水卫生标准 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 原球 protocorm 种子经过胚的膨大，种皮破裂后形成肉眼可见浅黄色呈球状或圆锥状的原胚。 3.2 丛生芽 multipleshoot 原球茎经诱导产生数量众多、簇生的芽。 4种源 4.1原植物 原植物应符合《中国植物志》收载的兰科植物霍山石斛（DendrobiumhuoshanenseC.Z.TangetS.J. Cheng)的植物特征，经过鉴定确认。 4.2 2留种要求 留种植株应选择生长健壮的植株，且在直径1km内无其他种类石斛。在花期，进行异花授粉，母 本在授粉后立即摘除唇瓣，及时挂牌标示。授粉当年10月以后，果开始转黄时，选择成熟饱满的 果采收。 5果选择及处理 5.1果选择 选择成熟饱满、无病虫害、无机械损伤、无自然开裂的果。 1 LY/T2449—2015 5.2果处理 用水充分清洗果表面的灰尘，所用水质执行GB/T5749。晾干表面的水分，用洁净纸进行包裹， 在4℃冰箱中保存1周。处理后的果用75%乙醇浸泡15min～20min后，在酒精灯火焰上灼烧1s~ 2s,备用。 6种苗培育 6.1无菌播种 在无菌条件下，用锻子夹住消毒处理过的果果柄，用解剖刀切开果顶端，将果置于培养瓶内 轻轻地抖动，均匀撒播一层种子于MS培养基表面，立即封住瓶口。 6.2种子萌发 播种的培养瓶置于温度为（25士2)℃的洁净环境中暗培养1周后，在光照强度为 1500μmol·m-².s~1~2000μmol·m-2.s-，光照时长为10h/d~12h/d的条件下，继续培养30d~ 45d形成原球茎。 6.3原球茎增殖 选取健康饱满、无污染的原球茎在改良MS培养基上，进行原球茎增殖。光照强度为 1500μmol·m-².s-1~2000μmol·m-2.s-，光照时长为10h/d~12h/d，继代培养55d~65d。 6.4 丛生芽诱导 选择健康，无污染的原球茎在改良MS培养基上，诱导丛生芽。光照强度为 1500μmol·m-2.s-1~2000μmolm-2.s-"，光照时长为10h/d~12h/d，培养40d~55d。 6.5丛生芽增殖 选择健康，无污染的丛生芽在改良MS培养基上，进行丛生芽增殖。光照强度为 1500μmol.m-².s-1~2000μmolm-2.s-，光照时长为10h/d~12h/d，培养50d~70d。 6.6生根壮苗 选择芽体健康，无污染，芽高1.5cm～2.5cm的丛生芽在1/2MS培养基上，生根壮苗。光照强度 为1500μmol.m-2.s-1~3000μmolm-².s-，光照时长为10h/d~12h/d，培养65d~75d。 6.7继代次数 原球茎和丛生芽继代次数控制在4代以内。 7种苗质量 7.1炼苗 种苗在温度15℃~35℃、光照2000μmol·m-²s-1~20000μmol·m-².s-范围条件下锻炼 15d～20d后，种苗叶片变深绿即可出瓶。 2 LY/T2449-2015 7.2出瓶洗苗 打开瓶口，用镊子将经过炼苗后的种苗轻轻夹出，在流动的水下进行清洗，洗净根部附着的培养基。 7.3消毒 将清洗好的种苗用广谱性杀菌剂稀释喷雾或浸泡5s～10s。处理后置于阴凉地方平摊存放，切忌 堆放过厚。 7.4 种苗要求 用于栽培的种苗应无污染、无烂茎、无烂根、无黄叶、叶色深绿且正常展开。 7.5 种苗分级 种苗分级见表1。 表1霍山石斛种苗分级 等级 指标 一级 二级 >3 1~2 根数/条 叶片数/片 ≥4 2~3 >3.5 2.5~3.5 苗高/cm 苗径/cm >0.25 0.15~0.25 7.6判定规则 7.6.1抽样 按GB/T3543.2执行。 7.6.2根数 目测根数。 7.6.3叶片数 目测叶片数。 7.6.4株高 用分度值1mm直尺测量茎基部至最高叶片尖端的距离。 7.6.5茎粗 用游标卡尺测量茎的最粗部位值。 7.6.6等级判定 根数、叶片数、株高、茎粗四项指标必须同时达到7.5指标要求的方可判定为一级苗或二级苗。四 项指标中即使有三项指标达到一级苗标准，而另一项只达到二级苗标准，则为二级苗；四项指标中即使 有三项指标达到二级苗标准，而另一项未达到二级苗标准，判定为不合格苗。