ICS 37.040.20 G 80 HG 备案号： 中华人民共和国化工行业标准 HG/T 4744—2014 照相明胶 重均分子量及其分布的测定 凝胶过滤色谱法 Determination of average molecular weight and molecular weight distribution of photographic gelatin by GFC 2014-12-31发布 2015-06-01实施 中华人民共和国工业和信息化部发布 HG/T 4744—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准参考了PAGIMETHODTenthEdition（2006）（日本照相/明胶工业协会，照相明胶测试 方法，第十版，2006）标准中有关重均分子量及其分布的测定标准。 本标准由中国石油和化学工业联合会提出。 本标准由全国数码影像材料与数字印刷材料标准化技术委员会（SAC/TC432）归口。 本标准起草单位：乐凯华光印刷科技有限公司、偃师市凯利达明胶股份有限公司。 本标准主要起草人：王怀功、张玉娜、李合成、高峰、张刚、潘展、张丽。 HG/T4744—2014 照相明胶 重均分子量及其分布的测定 凝胶过滤色谱法 1范围 本标准规定了照相明胶的重均分子量及其分布的测定方法。 本标准适用于感光材料用照相明胶的重均分子量及其分布的测定。 2试验方法 2.1分子量分布的测定 明胶的分子量分布对感光材料的物理特性和乳剂中卤化银颗粒的成长有重要的影响。借助于高效 液相色谱仪，用凝胶渗透过滤法测定明胶溶液，由得到的色谱图可得出明胶的重均分子量分布。 2.1.1试剂 （1）0.1mol/L磷酸二氢钾溶液：溶解13.6g磷酸二氢钾（分析纯）于1000mL水（一级蒸馏 水）中。在配制后72h内用完。 （2）0.1mol/L磷酸氢二钠溶液：溶解14.4g磷酸氢二钠（分析纯）于1000mL水（一级蒸馏 水）中。在配制后72h内用完。 （3）淋洗液：混合等量的0.1mol/L磷酸二氢钾溶液和0.1mol/L磷酸氢二钠溶液，用孔径为 0.45um的过滤膜过滤。使用前，要在加热和搅拌的情况下用真空泵或吸气器对其除气30min。用超 声波清洗仪将其处置5min，亦可充分除气。放于储液瓶中，阴凉、避光保存。在配制后72h内 用完。 2.1.2实验仪器与设备 （1）高效液相色谱仪（具备数据处理功能）。 （2）色谱柱：填料为聚乙烯醇，pH值范围2～12，渗透极限2000000，内径7.5mm，长 300mm，2根。 （3）紫外检测器。 （4）过滤膜：孔径0.45μm。 （5）真空泵、吸气器或超声波清洗仪。 2.1.3样品配制 2.1.3.1称取2.0g（精确到0.1mg）样品，置于100mL容量瓶中，加入淋洗液，放置1h保证样 品充分溶胀，然后放入40℃水浴，溶解60min，再冷却至室温，加人淋洗液定容至100mL。 2.1.3.2用淋洗液将2.1.3.1中配制的溶液精确稀释10倍。 2.1.3.3使用前用孔径0.45μm过滤膜过滤。 2.1.4实验过程 2.1.4.1在下列条件下用凝胶渗透过滤法得到色谱图。 色谱柱：双柱串联为分析用柱组。 流速：1.0mL/min。 柱 温：50℃。 进样体积：100μL。 HG/T4744—2014 检测方法：紫外检测器，波长230nm。 2.1.4.2得到的样品分子量分布图，纵坐标代表明胶的吸收值，横坐标代表保留时间。 2.1.4.3通过计算得到明胶的分子量分布，典型照相明胶的GFC色谱图见附录A。 2.2重均分子量的测定 本标准的目的是测量明胶的重均分子量，参考2.1中的分子量分布测定方法得到明胶的分子量分 布曲线，进而计算得到明胶的重均分子量。 2.2.1试剂 （1）0.1mo1/L磷酸二氢钾溶液：溶解13.6g磷酸二氢钾（分析纯）于1000mL水（一级蒸馏 水）中。在配制后72h内用完。 （2）0.1mol/L磷酸氢二钠溶液：溶解14.4g磷酸氢二钠（分析纯）于1000mL水（一级蒸馏 水）中。在配制后72h内用完。 （3）淋洗液：混合等量的0.1mol/L磷酸二氢钾溶液和0.1mol/L磷酸氢二钠溶液，用孔径为 0.45um的过滤膜过滤混合液。使用前，用可加热搅拌的真空泵或吸气器对其减压并除气约30min。 若用超声波清洗仪除气，则需进行5min。放于干净玻璃瓶中，盖紧瓶塞，阴凉、避光保存，在配制 后72h内用完。 （4）GFC标准样品［用水作淋洗液的凝胶渗透色谱（GPC）」：用含有8种窄分布的支链淀粉 （pullulan）为标准样品做出标准曲线。8种窄分布标准样品的重均分子量分别是5900、11800、 22800、47300、112000、212000、404000、788000。 2.2.2实验仪器与设备 （1）高效液相色谱仪（具备数据处理功能）。 （2）色谱柱：填料为聚多羟基甲基丙烯酸甲酯，pH值范围3～10，渗透极限4000000，内径 7.5mm，长300mm，3根，一个保护柱。 （3）紫外检测器。 （4）滤膜：孔径0.45μm。 （5）真空泵、吸气器或超声波清洗仪。 2.2.3样品配制 2.2.3.1称取2.0g（精确到1.0mg）样品胶，置于100mL容量瓶中，加入淋洗液，放置1h保证 样品充分溶胀，然后放入40℃水浴，溶解60min，再冷却至室温，加人淋洗液定容至100mL。 2.2.3.2用淋洗液将溶液精确稀释10倍。 2.2.3.3使用前用孔径0.45μm过滤膜过滤。 2.2.4标准支链淀粉溶液的配制 2.2.4.1称取0.4g（精确到1.0mg）支链淀粉，加到100ml.2.2.1（3）的淋洗液中，得到浓度为 0.4%的标准溶液，并保证支链淀粉充分溶胀。 2.2.4.2溶胀后搅拌溶液，并在40℃下保持数分钟，以促进溶解。轻微搅拌，以避免支链淀粉 分解。 2.2.4.3得到均匀溶液后，用孔径0.45μm过滤膜过滤。 2.2.5测量步骤 2.2.5.1在下列条件下用凝胶渗透过滤法得到色谱图。 色谱柱：将2.2.2中的一个保护柱利3根色谱柱串联为分析用柱组。 流 速：1.0mL/min。 柱 温：50℃。 2 HG/T 4744—2014 进样体积：100μL。 检测方法：紫外检测器，波长230nm。 2.2.5.2绘制明胶样品的分子量分布曲线，保留时间为X轴，相对应的230nm的吸收值为Y轴。 2.2.5.3在相似条件下测定标准溶液，测定8个样品的保留时问，用三次方程法绘制标准曲线。 2.2.5.4用绘制的标准曲线计算样品明胶的重均分子量。 3 HG/T4744—2014 附 录 A （资料性附录） 典型照相明胶的GFC色谱图 0.050 0.045 0.040 0.035 0.030 nv 0.025 0.020 0.015 0.010 S00'0 0.000 00'01 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 /min 图 A.1 典型照相明胶的GFC色谱图 4 HG/T 4744—2014 中华人民共和国 化工行业标准 照相明胶 重均分子量及其分布的测定 凝胶过滤色谱法 HG/T 4744--2014 出版发行：化学工业出版社 （北京市东城区青年湖南街13号．邮政编码100011) 北京科印技术咨询服务公司海淀数码印刷分部 880mm×1230mm1/16印张字数7.5千字 2015年4月北京第1版第1次印刷 书号：155025·1938 购书咨询：010-64518888 售后服务：010-64518899 网址：http://www.cip.com.cn 凡购买本书，如有缺损质量问题，本社销售中心负责调换。 定价：10.00元 版权所有 违者必究