ICS _ 65.160 X 85 备案号：30433—2011 中华人民共和国烟草行业标准 YC/T 376—2010 烟用添加剂 β-萘酚的测定 气相色谱-质谱联用法 Determination of β-naphthol in tobacco additives Gas chromatography-mass spectrometry method 2010-12-01发布 2011-01-01实施 国家烟草专卖局 发布 YC/T 376—2010 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由国家烟草专卖局提出。 本标准由全国烟草标准化技术委员会烟用材料分技术委员会(SAC/TC144/SC8)归口。 本标准起草单位：国家烟草质量监督检验中心、郑州烟草研究院、红云红河烟草（集团）有限责任公 司、红塔烟草(集团)有限责任公司。 本标准主要起草人：边照阳、张洪非、李中皓、唐纲岭、胡清源、钱强、范多青、陆舍铭、孟昭宇、 卢斌斌、李炎强。 YC/T376—2010 烟用添加剂β-萘酚的测定 气相色谱-质谱联用法 1范围 本标准规定了烟用添加剂中β-萘酚含量的测定方法一一气相色谱-质谱联用法。 本标准适用于烟用添加剂中β-蔡酚的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 YC/T145.10—2003烟用香精抽样 3原理 利用含内标物的二氯甲烷溶液萃取试样中的β-蔡酚，用气相色谱-质谱联用法测定萃取液中β-蔡酚 的含量，进而计算出试样中β-萘酚的含量。 4试剂 除特殊要求以外，均应使用分析纯级试剂。 4.1试剂 4.1.1 β-萘酚。 4.1.2丙酸苯乙酯（内标)，若以其他物质为内标，应验证其适用性。 4.1.3 无水乙醇。 4.1.4二氯甲烷。 4.1.5 无水硫酸钠：使用前在550℃马弗炉中烘2h。 4.2 内标溶液的配制 称取0.02g丙酸苯乙酯（4.1.2）（精确至0.1mg）于100mL容量瓶中，用无水乙醇（4.1.3）溶解并 定容到刻度，混匀，得到浓度为200μg/mL的内标溶液。内标溶液在0℃~4℃冰箱内密封存放，有效 期为3个月。 4.3标准溶液的配制 4.3.1标准储备液：称取0.02g的β-萘酚（4.1.1）（精确至0.1mg）于100mL的容量瓶中，以无水乙 醇（4.1.3）溶解并定容到刻度，配制成200Hg/mL的标准储备液。标准储备液在0℃~4℃冰箱内密 封存放，有效期为6个月。 YC/T376—2010 4.3.27 标准溶液：移取1mL的β-蔡酚标准储备液（4.3.1)于10mL的容量瓶中，以二氯甲烷（4.1.4) 定容到刻度，配制成20μg/mL的标准溶液。 4.3.3标准工作溶液：分别准确移取0.05mL、0.1mL、0.2mL、0.5mL、1mL、2mL、5mL的标准溶 液（4.3.2)于10mL容量瓶中，加入50μL内标溶液（4.2），用二氯甲烷（4.1.4)定容到刻度，得到7级 标准工作溶液。系列标准溶液浓度为0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.4μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、 4μg/mL、10μg/mL。 5仪器设备及条件 常用实验仪器以及下述各项。 5.1气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)：进样口具有分流/不分流进样方式。进样口、柱箱分别配有独立 可控制的加热单元。可使用选择离子模式(SIM)定量。 5.2色谱柱：弹性毛细管聚乙二醇色谱柱[30m（长度）×0.25mm（内径）×0.25μm（膜厚)]。 5.3 GC-MS分析条件： 载气：He，恒流模式，流量：1.5mL/min。 进样口温度：230℃。 进样量：1μL，不分流进样。 升温程序：初始温度60℃，保持1min，以25℃/min的升温速率升至230℃，保持20min。 质谱条件：传输线温度230℃；电离能量：70eV；离子源温度：230℃；溶剂延迟时间：4.0min。 定量分析：采用选择性离子扫描模式，以特征离子进行定量分析，丙酸苯乙酯的特征离子为178、 105（其中178为定量离子），β-萘酚的特征离子为144、115，89（其中144为定量离子）。 定性确证：待测试样与标准品的选择离子色谱峰在相同保留时间处（土0.2min）出现，并且对应质 谱碎片离子的质荷比与标准品一致，其丰度比与标准品相比应符合：相对丰度大于50%时，允许士10% 偏差；相对丰度20%50%时，允许土15%偏差；相对丰度10%～20%时，允许士20%偏差；相对丰度小 于等于10%时，允许有士50%偏差，此时可定性确证目标分析物。 典型标准工作溶液、试样色谱图参见附录A。 5.4分析天平：感量0.1mg 5.5振荡器。 5.6高速匀浆机。 5.7锥形瓶，50mL。 6分析步骤 6.1抽样 按照YC/T145.10—2003的规定进行抽样。 6.2试样处理 称取1g（精确至0.1mg）的烟用香精或料液样品于50mL锥形瓶中，加入50uL内标溶液（4.2)和 10mL二氯甲烷（4.1.4)，然后加人5g无水硫酸钠，用手轻摇几下，然后在振荡器上以200r/min的速 率振荡20min，静置10min，取上清液进行GC-MS分析。 若加入5g无水硫酸钠，摇匀后，无水硫酸钠结块，应再加入无水硫酸钠，至无水硫酸钠不结块 2 YC/T3762010 为止。 对于不溶于二氯甲烷的试样（如浸膏），称取1g试样（精确至0.01g）于50mL锥形瓶中，加入 10mL二氯甲烷（4.1.4)和50μL内标溶液（4.2），使用高速匀浆机匀浆（8000r/min～10000 r/min) 5min后，添加约5g无水硫酸钠，然后在振荡器上以200r/min的速率振荡20min，静置10min，取上 清液进行GC-MS分析。 6.3标准工作曲线建立 对标准工作溶液进行选择性离子扫描，计算每个标准溶液中β-蔡酚与丙酸苯乙酯的峰面积比，作 出β-萘酚的浓度与峰面积比的标准工作曲线，该标准工作曲线为直线关系，相关系数R>0.99 每次试验均应制作标准工作曲线，每20次样品测定后应加人一个中等浓度的标准工作溶液，如果 测得的值与原值相差超过5%，则应重新进行标准工作曲线的制作。 6.4样品测定 按照仪器测试条件测定样品溶液（6.2)，每个试样重复测定两次。 7结果的计算与表述 试样中β-蔡酚的含量按式（1)计算： X=10c (1) m 式中： X—试样中β-萘酚的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)。 c一一由标准工作曲线上读取的试样溶液中β-蔡酚的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)： m—试样的质量，单位为克(g)。 以两次平行测定的平均值作为最终测定结果，精确至0.01mg/kg。 两次平行测定结果的相对平均偏差应小于10%。 回收率、检出限和定量限 本方法的回收率、检出限和定量限结果见表1. 表1方法的回收率、检出限和定量限结果 检出限 回收率 定量限 化合物 % mg/kg mg/kg β-蔡酚 98. 17 0. 01 0. 03 9试验报告 试验报告应说明： 识别被测样品需要的所有信息； 参照本标准所使用的试验方法； 3 3762010 YC/T 一测定结果，包括各单次测定结果及其平均值； 一与本标准规定的分析步骤的差异； 一一在试验中观察到的异常现象 一一试验日期； 一试验人员。 YC/T376—2010 附录A (资料性附录) 色谱图示例 A.1标准工作溶液色谱图 按照本标准所规定方法，对标准溶液进行气相色谱-质谱联用选择离子分析，所得到色谱图如 图A.1所示。 丰度 350d 3000 2500 2000 1500 1000 500 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 t/min 丙酸苯乙酯（内标）； β-蔡酚。 2- 图A.1标准工作溶液色谱图 A.2 试样色谱图 按照本标准所规定方法，对试样溶液进行气相色谱-质谱联用选择离子分析，所得到色谱图如 图A.2所示。 丰度 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 W 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 t/min 1一一丙酸苯乙酯（内标）： —β-萘酚。 图A.2 试样色谱图