ICS 65.150 CCS B 50 T/ZNZ 浙 江 省 农 产 品 质 量 安 全 学 会 团 体 标 准 T /ZNZ 353—2025 水产品中药物残留免疫胶体金定性快速检 测试剂盒验证方法与评价规范 Validation method and evaluation specification for immunocolloidal gold qualitative rapid detection kit for drug residues in aquatic products 2025-06-19发布 2025-07-19实施 浙江省农产品质量安全学会 发布 全国团体标准信息平台 T/ZNZ 353—2025 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由浙江省农产品质量安全学会 提出并归口。 本文件起草单位： 浙江省水产技术推广总站（浙江省渔业检验检测与疫病防控中心）。 本文件主要起草人：柯庆青、周钦、王扬、李诗言、王鼎南、何辉、李思敏、陈则、孔俏丹、周凡。 全国团体标准信息平台 T/ZNZ 353—2025 1 水产品中药物残留免疫胶体金 定性快速检测试剂盒验证方法与评价 规范 1 范围 本文件规定了用于鱼、虾、蟹、龟鳖、贝类 、蛙类等水产品中药物残留的免疫胶体金法 定性快速检 测试剂盒的评价方法与技术要求。 本文件适用于水产品中药物残留免疫胶体金法 定性快速检测试剂盒 的评价。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 30891 -2014 水产品抽样规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 灵敏度 sensitivity 方法在实验条件下达到的实际最低检出水平时， 检出阳性结果的 阳性样品数 占总阳性样品数的百分 比。（来源： GB/T 42233 ，4.8，有修改） 3.2 特异性 specificity 快速检测产品能够区分样品中目标分析物和其他成分 （如其他待测物、基质成分、其他可能的干扰 物）的程度。 （来源 GB/T 42233 ，4.13，有修改 ） 3.3 假阴性率 false negative rate 使用的快速检测产品 在阳性样品中检出阴性结果的百分比。 [来源： GB/T 42233 -2022，4.3，有修改 ] 全国团体标准信息平台 T/ZNZ 353—2025 2 3.4 假阳性率 false positive rate 使用的快速检测产品 在阴性样品中检出阳性结果的百分比。（来源： GB/T 42233 ，4.2，有修改） 4 验证方法 4.1 抽样要求 对胶体金快速检测 试剂盒进行随机抽选，抽取的 试剂盒应为同一 品种规格，且在产品的保质期内， 产品如有储藏、运输条件按要求执行。产品的数量应至少满足验证测定的要求。 4.2 环境与人员 要求 实验操作场所的仪器设备配置及环境应当满足 胶体金快 速检测试剂盒说明书的 要求。 验证工作参与人员应包括盲样制备人员、检测人员、结果判读人员和评价人员， 盲样制备、盲样检 测、结果判读、试剂盒评价等工作应为独立环节，负责人员不得交叉，且均应 经过专业培训，具备 相应 工作经验 ，按照要求规范操作。 4.3 参比方法 选择与快速检测方法适用范围和检测指标相对应的 农业农村部 公告、 国家标准或行业标准等方法作 为参比方法。 4.4 盲样制备及要求 4.4.1盲样基质 样品基质种类包括但不限于 产品说明中适用的品种，应根据实际检测需要进行选择 。水产品基质一 般包括鱼类（高脂鱼、低脂鱼）、 虾蟹类、龟鳖类、贝类和 蛙类等。具体品种可选择本地区 大宗或特色 水产品种 。 注：高脂鱼可选择 脂肪含量 高的鱼类如鳗鲡、黄鱼 等，低脂鱼可选择 脂肪含量 相对较低的鱼类 如草鱼、鲫鱼等。 4.4.2盲样数量 每个批号产品 评价盲样数量应不少于 40个，其中包含 20个阴性样品和 20个阳性样品。 阳性样品 包含 10个低浓度加标样品（ 1倍检出限浓度 ）和 10个高浓度加标样品（ 10倍检出限浓度 ），可根据项 目开展需要添加实际阳性样品的检测 。若目标检测物存在可能交叉反应的物质， 可根据需要 增加 10个 干扰样品的检测。 4.4.3盲样制备 4.4.3.1阴性样品 按照 GB/T 30891 -2014附录 B规定进行各类水产品制样， 采用参比方法对拟测定药物进行检测，测 定结果为未检出，可作为 空白基质样品 使用。依照产品说明书中标识的称样量，称取空白基质样品，密 封，编号后置于 -18 ℃保存。 全国团体标准信息平台 T/ZNZ 353—2025 3 4.4.3.2阳性加标样品 依照产品说明书中标识的称样量，准确称取不同空白基质，并向其中加入拟测定药物的标准物质溶 液，添加水平分别为产品说明书中标识的 1倍检出限浓度 （低浓度加标样品） 和10倍检出限浓度 （高 浓度加标样品） ，漩涡均匀后，密封，编号后置于 -18℃保存。 4.4.3.3实际阳性样品 采用参比方法检测结果为阳性的样品作为实际阳性样品 ，实际阳性样品中目标物浓度 应高于产品的 检出限。依照产品说明书中标识的称样量，准确称取实际阳性样品，密封，编号后置 -18 ℃保存。 4.4.3.4干扰样品 依照各产品说明书中标识的称样量，称取空白基质样品，加入 可能与目标检测物存在交叉反应的物 质，添加 浓度≧目标检测物检出限浓度的 10倍。 注：与目标检测物存在交叉反应的物质 一般为其 结构类似物、代谢产物 等，如恩诺沙星的交叉反应物为氧氟沙星等 喹诺酮类药物 。 以上所有验证样品 应在现场验证实验前 24小时之内 进行制备。 对盲样制备情况进行记录，验证样 品制备记录表格式可参考附表 A.1。 4.5盲样检测 检测人员按照产品说明书中的操作步骤对盲样进行检测， 并记录 从开始样品 前处理至得到最终检测 结果所经历的时间 。由2名判读人员现场依据 产品说明书中的 结果判读原则 对检测结果 进行判读，当 2 人的判读结果一致时， 认为判读结果有效。 若2人判读结果不一致，或 肉眼无法判 读的样品应使用胶体 金读数仪对结果进行判读 。记录盲样检测结果，检测结果原始记录表格式可参考附表 A.2。 5 评价指标 和方法 5.1 一般性指标 5.1.1 评价方法 由2名评价人员 随机抽取 胶体金定性快速检测试剂盒 进行核对检查并记录， 1个批号至少抽取 3个 产品。 5.1.2 产品包装 产品包装应完整，产品组成齐全，应包含产品合格证、使用说明 书、免疫胶体金快速 检测卡 /试纸 条、金标微孔（必要时） 、试剂等。 5.1.3 中文标签 标签应清晰、规范，内容包括产品名称、批号、规格、数量、有效期、保存条件、注意事项、生产 者、地址、联系方式等。 5.1.4 使用说明书 使用说明书内容表述清晰、完整，内容包括简介、检测原理、 检出限、 适用范围、检测时间、特异 全国团体标准信息平台 T/ZNZ 353—2025 4 性（存在交叉反应的化合物及其交叉反应率）、产品组成、需增加的试剂设备、样品 前处理、操作步骤、 结果判断、注意事项、安全性说明、保存时间、 运输和储存条件等。 5.1.5 产品质量证书 应具有产品质量合格证书，可附有验证的技术指标等内容。 5.1.6 生产者资质 生产者名称和地址应当是依法登记注册 ，能够承担产品安全质量责任。 5.1.7 产品安全性 实验过程应避免使用致癌、剧毒、易燃易爆、强腐蚀性的试剂。若需使用时，应在说明书中的醒目 位置清晰地标示，并且指出其在使用过程中的注意事项及急救措施等 ，包括安全提示、废弃物处理、可 能存在危害的操作步骤。 5.2 技术指标 5.2.1 评价方法 由2名评价人员根据 4.5盲样检测结果对 技术指标 进行计算并根据 5.2.7技术指标要求开展评价。 5.2.2 检测用时 取6个样品按照产品说明书要求进行平行检测， 记录从样品前处理开始到完成检测结果判读的整个 过程的时间。 5.2.3 灵敏度 将判读结果按公式（ 1）计算灵敏度。 S = (d1/d0 ) × 100…………………………………………… （1） 式中： S—灵敏度，%； d1—检出限浓度阳性样品检出阳性的个数 ； d0—检出限浓度阳性样品总数 。 5.2.4特异性 当验证设置干扰样品时，将判读结果按公式（ 2）计算特异性。 SP= (i1/i0 ) × 100…………………………………………… （2） 式中： SP—特异性，%； i1—干扰样品检出阴性的个数 ； i0 —干扰样品总数 。 全国团体标准信息平台 T/ZNZ 353—2