ICS 67.160.10 CCS C 151 T/NAIA 团 体 标 准 T/ NAIA 0449—2025 葡萄酒中三氟乙酸的测定 高效液相色谱 -串联质谱法 Determination of Trifluoroacetic acid (TFA) in Wine by HPLC-MS/MS 2025-12- 30发布 2026-01- 10实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0449—2025 I前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定 编写。 本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草 单位：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞 及葡萄酒质量安全） ）、宁夏工商职业技术大学 、宁夏医科大学 、天津市食品安全检测技术研究院 、 宁夏化学分析测试协会。 本文件主要起草人：汤丽华、辛世华、马雪梅、岳苑、吕毅、于永杰、郭文丽、赵娟、李智 、 马桂娟、张小飞。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0449—2025 1葡萄酒中三氟乙酸的测定 高效液相色谱 -串联质谱法 1范围 本文件规定了葡萄酒中三氟乙酸的高效液相色谱 -串联质谱检测方法。 本文件适用于葡萄酒中三氟乙酸的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 试样经乙腈稀释定容后，反相色谱柱分离，以保留时间定性，高效液相色谱 -串联质谱仪 （HPLC-MS/MS ）测定，外标法定量。 5试剂和材料 本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯， 水为 GB/T 6682规定的一级水。 5.1试剂 5.1试剂 5.1.1 甲醇：色谱纯。 5.1.2 乙腈：色谱纯。 5.1.3 乙酸铵溶液（ 10mmol/L ）：称取 0.771g乙酸铵用水溶解定容至 1000mL容量瓶中，混匀。 5.2标准品 标准品： 三氟乙酸（ TFA，CAS号76-05-1），浓度为 1000mg/L 。 5.3标准溶液配制 5.3.1 标准储备液（ 10.0μg/mL ）：准确移取三氟乙酸标准溶液适量，用甲醇溶解并定容， 配制成 10.0μ g/mL的标准储备溶液，于 -20℃保存。 5.3.2 标准工作溶液：准确吸取不同体积三氟乙酸标准储备液， 用空白葡萄酒基质定容至 1.0 mL， 配制成三氟乙酸的浓度 分别为 2.0、5.0、10.0、50.0、100.0、200.0n g/mL的系列标准工作溶液，临 用现配。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0449—2025 226仪器和设备 6.1 液相色谱 -串联质谱仪：配备电喷雾离子源。 6.2 涡旋混合器。 6.3 有机微孔滤膜， 孔径 0.22μm，或相当者。 7分析步骤 7.1制备与保存 取适量葡萄酒样品充分混匀，盛装于聚丙烯（ PP）材质的容器中， -18℃以下保存。 7.2提取 准确移取 2.0mL混匀的葡萄酒样品， 加入乙腈定容至 10mL PP容量瓶中，混匀， 经0.22μ m有 机滤膜过滤后，高效液相色谱 -串联质谱仪 进行分析。 7.3仪器参考条件 7.3.1液相色谱参考条件 7.3.1.1 色谱柱：HILIC，2.1×100mm×3.5μm或性能相当。 7.3.1.2 柱温： 40℃。 7.3.1.3 流动相： A：10mmol/L 乙酸铵， B：乙腈； 梯度洗脱见表 1。 7.3.1.4 流速： 0.4mL/min 。 7.3.1.5 进样量： 10μL。 表1 流动相及梯度洗脱条件 时间 /min 流速 /（mL/min） 流动相 A/% 流动相 B/% 0.00 0.40 15 85 1.00 0.40 15 85 5.00 0.40 35 65 7.00 0.40 15 85 9.00 0.40 15 85 7.3.2质谱参考条件 7.3.2.1 离子源：电喷雾离子源（ AJS ESI-）。 7.3.2.2 扫描方式：负离子扫描。 7.3.2.3 检测方式：多反应监测（ MRM）。 7.3.2.4 离子源温度： 300℃。 7.3.2.5 鞘气温度： 300℃。 7.3.2.7 鞘气流速： 7L/min。 7.3.2.7 雾化气压力： 45Psi。 7.2.2.8 定性离子对、定量离子对、碰撞能量等参数 见表 2。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0449—2025 3表2 三氟乙酸的质谱参数 被测物名称 母离子（ m/z） 子离子（ m/z） 碎裂电压 /V 碰撞能量 /eV 59 60 16 三氟乙酸（ TFA） 113 69* 60 10 注： *表示定量离子 7.4定性测定 被测物质色谱峰保留时间与标准物质色谱峰保留时间相比较，相对误差应在 ±2.5%以内。相同 实验条件下进行样品测定时 ，如果检出色谱峰的保留时间与标准样品相一致 ，并且在扣除背景后的 样品质谱图中 ，所选择的离子均出现 。而且样品化合物的离子丰度比与质量浓度相当的标准溶液相 比，相对丰度的允许偏差不超过 表3规定的范围，则可判定样品中存在目标组分。 表3 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 ＞50% ＞20%至50% ＞10%至20% ≤10% 允许的相对偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 7.5定量测定 将基质标准溶液与试液依次注入液相色谱 -串联质谱仪中 ，采用基质标准溶液校准曲线外标法定 量，待测试液中目标物的响应值均应在仪器检测的定量线性范围内 ，超过线性范围时应进行适当倍 数稀释后再进行分析。在上述液相色谱质谱条件下， TFA标准溶液的特征离子质量色谱图见附录 A。 7.6空白试验 除不加试样外，均按上述步骤进行。 8结果与表达 试样中三氟乙酸的含量按式（ 1）进行计算： 式中： X──试样 中TFA含量，单位为微克每升（ μg/L）； c──由标准曲线计算出的试样溶液浓度，单位为 纳克每毫升（ ng/mL）； V──试样的最后定容体积，单位为毫升（ mL）； w──试样体积，单位为毫升（ mL）； 注：测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。 9精密度 在重复性测定条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 15%。 10其他 当取样量为 2mL，定容体积为 10mL时，三氟乙酸的检出限为 2.5μg/L，定量限为 5μg/L。 )1(10001000 wV cX 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0449—2025 4