ICS 67.100.1 CCS C 144 T/NAIA 团 体 标 准 T/ NAIA 0448—2025 牛奶中6种全氟化合物含量的测定 高效液相色谱 -串联质谱法 Determination of 6 Perfluorinated Compounds in Milk by HPLC-MS/MS 2025-12- 30发布 2026-01- 10实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0448-2025 I前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定 编写。 本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位 ：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞 及葡萄酒质量安全） ）、宁夏工商职业技术大学、宁夏医科大学、重庆市计量质量检测研究院、宁 夏化学分析测试协会。 本文件主要起草人：汤丽华、辛世华、郭阳、马雪梅、岳苑、吕毅、于永杰、汪恩婷、赵娟 、 李智、马桂娟、张小飞。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0448—2025 1牛奶中6种全氟化合物含量的测定 高效液相色谱 -串联质谱法 1范围 本文件规定了牛奶中全氟丁酸（ PFBA）、全氟壬酸（ PFNA）、全氟癸酸（ PFDA）、全氟 -4- 甲氧基丁酸（ PFMBA）、全氟十三烷酸（ PFTrDA）和全氟十四酸（ PFTeDA）6种全氟化合物含量 的液相色谱 -串联质谱检测方法。 本文件适用于牛奶中全氟丁酸（ PFBA）、全氟壬酸（ PFNA）、全氟癸酸（ PFDA）、全氟 -4- 甲氧基丁酸（ PFMBA）、全氟十三烷酸（ PFTrDA）和全氟十四酸（ PFTeDA）含量的的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 试样经乙腈提取，固相萃取柱净化，反相色谱柱分离，液相色谱 -串联质谱仪测定，内标法定 量。 5试剂和材料 本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯， 水为 GB/T 6682规定的一级水。 5.1试剂 5.1.1 乙腈：色谱纯。 5.1.2 甲醇：色谱纯。 5.1.3 氯化钠：分析纯。 5.1.4 乙酸铵：色谱纯。 5.1.5 5mmol/L 乙酸铵溶液： 称取 0.3854g乙酸铵， 用水溶解并定容至 1000mL，混匀。 5.1.6 50%甲醇乙腈溶液： 取500mL甲醇，用乙腈定容至 1000mL，混匀。 5.1.7 50%甲醇溶液： 取500mL甲醇，用水定容至 1000mL，混匀。 5.2标准品 6种全氟化合物混合标准溶液和 6种全氟化合物内标混合标准溶液（13C9-PFNA、13C6-PFDA、 13C5-PFPeA、13C2-PFDoA、13C2-PFTeDA 、13C4-PFBA）的名称、化学分子式 、CAS号和浓度见附录 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0448—2025 2A。 5.3标准溶液配制 5.3.1 混合标准储备液（ 10.0μg/mL ）：准确移取 100.0μg/mL 混合标准溶液 1.0mL，用甲醇（ 5.1.2） 溶解并定容至 10.0mL中， -18℃保存。 5.3.2 混合内标储备液（ 2.0μg/mL ）：准确移取 20.0μg/mL 混合内标标准溶液 1.0mL，用甲醇 （5.1.2）溶解并定容至 10.0mL中，于 -18℃保存。 5.3.3 混合标准中间液（ 1.0μg/mL ）：准确移取 上述标准储备液（ 5.3.1）1.0mL，用甲醇（ 5.1.2） 定容至 10.0mL，于 -18℃贮存。 5.3.4 混合内标中间液（ 20.0ng/mL ）：准确移取 上述标准储备液（ 5.3.2）0.1mL，用甲醇（ 5.1.2） 定容至 10.0mL，于 -18℃贮存。 5.3.5 标准工作液：移取适当体积的混合标准中间液（ 5.3.3）和混合内标中间液（ 5.3.4），用空白 样品基质溶液配制成质量浓度为 1.0 ng/mL、2.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL、50.0 ng/mL的标准工作液（内标浓度为 2.0ng/mL ），临用现配。 6仪器和设备 6.1 液相色谱 -串联质谱仪：配备电喷雾离子源。 6.2 天平：感量 0.01g。 6.3 涡旋混合器。 6.4 高速离心机： 转速 9000r/min 。 6.5 氮吹仪。 6.6 Captiva EMR PFAS Food Ⅰ小柱（ 680mg，6mL或性能相当者）。 6.7 有机微孔滤膜， 孔径 0.22μm，或相当者。 7分析步骤 7.1制备与保存 牛奶样品混合均匀，装入密闭洁净 聚丙烯（ PP）材质容器，冷冻保存。 7.2提取与净化 7.2.1提取 称取5g试样（精确至 0.01g）置于 50mL具塞 PP离心管中 ，加入内标工作液 ，混匀，加入 10mL 乙腈，涡旋混匀 10min，8000r/min 离心 5min。 7.2.2净化 取Captiva EMR PFAS FoodⅠ小柱（6.6），用5mL 50%甲醇乙腈溶液 （5.1.6）预清洗活化小柱 ， 先用 0.6mL上清液平衡小柱， 取5.0mL上清液过柱，收集全部流出液，流出液加 入1.5g氯化钠 （5.1.3）混匀震荡分层， 5000r/min 离心 5min，准确吸取 乙腈层 4.0mL氮吹近干， 1.0 mL甲醇溶液 （5.1.7）复溶， 过0.22μ m滤膜（ 6.7），供HPLC-MS/MS 分析。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0448—2025 37.3仪器参考条件 7.3.1液相色谱参考条件 a）色谱柱： C18色谱柱（ 2.1mm×150mm×3.5μm) ，或性能相当者。 b）柱温： 30℃。 c）流动相： A：5mmol/L 乙酸铵（5.1.5），B：乙腈（5.1.1）；梯度洗脱见表 1。 d）流速： 0.4mL/min 。 e）进样量： 5μL。 表1 流动相及梯度洗脱条件 时间 /min 流速 /（mL/min） 流动相 A/% 流动相 B/% 0.0 0.4 90 10 2.0 0.4 70 30 8.5 0.4 55 45 11.5 0.4 25 75 13.5 0.4 70 30 15.0 0.4 90 10 7.3.2质谱参考条件 a）电离方式：电喷雾离子源（ AJS ESI-）。 b）扫描方式：负离子扫描。 c）检测方式：多反应监测（ MRM）。 d）离子源温度： 300℃。 e）鞘气温度： 300℃。 f）鞘气流速： 11.0L/min 。 g）雾化气压力： 45psi。 h）喷嘴电压： 500V。 i）毛细管电压： 3500V。 j）定性离子对、定量离子对、碎裂电压、碰撞能量等参数参见 附录 B。 7.4定性确证 被测物质色谱峰保留时间与标准物质色谱峰保留时间相比较，相对误差应在 ±2.5%以内。相同 实验条件下进行样品测定时 ，如果检出色谱峰的保留时间与标准样品相一致 ，并且在扣除背景后的 样品质谱图中 ，所选择的离子均出现 。而且样品化合物的离子丰度比与质量浓度相当的标准溶液相 对离子丰度的允许偏差不超过 表2规定的范围，则可判定样品中存在目标组分。 表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 ＞50% ＞20%至50% ＞10%至20% ≤10% 允许的相对偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 7.5定量测定 将基质标准溶液与试液依次注入液相色谱 -串联质谱仪中 ，采用基质标准溶液校准曲线外标法定 量，待测试液中目标物的响应值均应在仪器检测的定量线性范围内 ，超过线性范围时应进行适当倍 数稀释后再进行分析。在上述液相色谱质谱条件下， PFNA、PFDA、PFMBA、PFTrDA、PFTeDA 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0448—2025 4和PFBA等6种全氟化合物标准溶液的特征离子质量色谱图见附录