T/HSPP02 5—2025 纳米农药室内生物测定试验准则 杀螨剂 叶碟喷雾法 Guideline for laboratory bioassay of nanopesticides acaricides leaf-disc spraying method （发布稿） 、 2025- 12-01发布 2026- 01-01实施 湖 北 省 植 物 保 护 学 会 发布 ICS 65.100.01 CCS B15/19 团体标准 全国团体标准信息平台 T/HSPP00 25—2025 II 目次 前 言 .......................................................................... III 1、范围............................................................................ - 1 - 2、规范性引用文件 .................................................................. - 1 - 3、术语和定义 ...................................................................... - 1 - 4、仪器设备 ........................................................................ - 1 - 5、试剂与材料 ...................................................................... - 1 - 5.1 生物材料 ................................................................... - 1 - 5.2 试验药剂 ................................................................... - 1 - 6、试验步骤 ........................................................................ - 1 - 6.1 试材准备 ................................................................... - 1 - 6.2 药剂配制 ................................................................... - 2 - 6.3 Potter 喷雾塔准备 .......................................................... - 2 - 6.4 药剂处理 ................................................................... - 2 - 6.5 饲养与观察 ................................................................. - 2 - 6.6 检查 ....................................................................... - 2 - 7、数据统计与分析 .................................................................. - 2 - 7.1 计算方法 ................................................................... - 2 - 7.2 统计分析 ................................................................... - 3 - 8、结果............................................................................ - 3 - 附录 A............................................................................. - 4 - 全国团体标准信息平台 T/HSPP00 25—2025 II 前 言 本文件按照GB/T 1.1《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。 本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由华中农业大学提出。 本文件由湖北省植物保护学会归口。 本文件起草单位：华中农业大学、北京化工大学。 本文件主要起草人：何顺，万虎，马洪菊，李建洪，谢宗周，叶俊丽，王丹，王洁欣， 陈建峰。 本文件实施应用中的疑问， 可咨询湖北省植物保护学会， 邮箱： [email protected]。 对本文件的有关修改意见建议请反馈至华中农业大学，联系电话：13871116779 ，邮箱： [email protected]。 全国团体标准信息平台 T/HSPP00 25—2025 - 1 - 纳米农药室内生物测定试验准则 杀螨剂 叶碟喷雾法 1 范围 本文件规定了测定纳米农药杀螨活性的室内生物活性测定试验方法。 本文件适用于纳米农药登记用杀螨剂室内生物测定试验。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期 的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括 所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 1154.13 农药室内生物测定试验准则杀虫剂第13 部分：叶碟喷雾法 NY/T 4451 纳米农药产品标准编写规则 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 仪器设备 体视显微镜、孔径2 cm 打孔器、直径9 cm 海绵块、直径9 cm 培养皿、Potter 喷雾塔、超 声分散仪、恒温培养箱或恒温养虫室。 5 试剂与材料 5.1 生物材料 柑橘全爪螨 （Panonychus citri McGregor ）、朱 砂 叶 螨（ Tetranychus cinnabarinnus Boisduval ） 等螨类。 5.2 试验药剂 根据NY/T 4451 纳米农药产品标准编写规则，本标准中杀螨剂的纳米剂型，包括纳米 乳剂、纳米悬浮剂、纳米水分散粒剂等。 6 试验步骤 6.1 试材准备 选择室内饲养、生理状态一致的雌成螨 作为试材。 根据NY/T 1154.13 农药室内生物测定试验准则杀虫剂第13部分：叶碟喷雾法，本标准 中选取新鲜健康、发育一致的寄主植物叶片（例如柑橘叶片（温州蜜柑）、棉花叶片（陆地棉）、蚕豆叶片（春播蚕豆）等），使用打孔器制成叶碟。在培养皿内放置一湿海绵块，其 全国团体标准信息平台 T/HSPP00 25—2025 - 2 - 上铺放滤纸，滤纸上放置叶碟，每皿放置2个叶碟。将室内饲养的雌成螨 接种到叶碟上，每 叶碟接种15 头~20头。 6.2 药剂配制 基于纳米农药有效成分含量，使用超声分散仪用蒸馏水制备悬浮均匀、稳定的母液，再 用0.05%~0.1% TritonX -100（或0.1% 的吐温 -80）水溶液按照等比或等差的方法配置5 个~7个 系列质量浓度。 6.3 Potter喷雾塔准备 将Potter喷雾塔（ Burkard ADPT -1）的喷雾压力调整在 1.47 × 105 Pa的稳定状态，将喷雾 头先用丙酮清洗2次，再用蒸馏水清洗2 次。 6.4 药剂处理 将培养皿平稳放置于Potter 喷雾塔的底盘中央，以喷雾量为1.0 mL 进行均匀喷雾操作。 待药液自然沉降1 min 后，取出培养皿，转移至饲养条件下饲养。 每处理4次~5 次重复，以与最高浓度纳米农药处理组相同质量浓度的纳米载体和乳化剂 混合悬浮液作为阴性对照，并置清水为空白对照。 6.5 饲养与观察 将处理的试虫置于温度为25 ± 1℃ 、光周期 L:D = 16:8 h条件下饲养和观察。特殊情况可 以适当调整试验环境条件。 6.6 检查 处理后24 h、48 h和72 h 检查试虫死亡情况，分别记录总虫数和死虫数，所统计的死亡 率均应在0%~100% 之间，如果出现无死亡或全部死亡的情况，应提出该实验结果。根据试 验要求、药剂特点及纳米农药释放特性，可以缩短或延长检查时间。 7 数据统计与分析 7.1 计算方法 根据调查数据，计算各处理的矫正死亡率。按公式（1 ）和（ 2）计算，计算结果均保留 到小数点后两位： 𝑃𝑃=𝐾𝐾 𝑁𝑁×