ICS 67.080.10 CCS GBC X 04 团体 标准 T/GBC 105—2025 沃柑中二氰蒽醌残留量的测定 液相色谱 -串联质谱法 Determination of dithianon in Orah — Liquid chromatography -tandem mass spectrometry 2025 - 10 - 14发布 2025 - 11 - 14实施 广西物品编码与标准化促进会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/GBC 105 —2025 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由广西壮族自治区标准技术研究院提出。 本文件由广西物品编码与标准化促进会归口。 本文件起草单位： 广西壮族自治区标准技术研究院、广西壮族自治区产品质量检验研究院、广西西 大检测有限公司、广电计量检测（南宁）有限公司、广西速竟科技有限公司。 本文件主要起草人： 王全永、徐江成、林翠霞、缪璐、黄利娟、吴敏、何善廉、覃雪、 罗超雁、 罗 统梅、何美玲、 朱栢源、黄菲、韦元杰、杨金诚、 陈艳、韦娜、梁艺川、陈淑梅、钟鹏、卢柏玲 。 本标准版权为广西物品编码与标准化促进会所有，除了用于国家法律或事先得到广西物品编码 与标准化促进会的许可外 ，不得以任何形式或任何手段复制、再版或使用本标准及其章节 ，包括电子 版、影印件 ，或发布在互联网及内部网络等。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/GBC 105 —2025 1 沃柑中二氰蒽醌残留量的测定 液相色谱 -串联质谱法 1 范围 本文件描述了沃柑中二氰蒽醌残留量的液相色谱 -串联质谱测定方法。 本文件适用于沃柑中二氰蒽醌残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样中二氰蒽醌使用甲酸 -乙腈溶液提取，提取液经分散固相萃取净化，液相色谱 -质谱仪检测，外 标法定量。 5 试剂和材料 试剂 5.1.1 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为 符合GB/T 6682 要求的一级水。 5.1.2 甲酸（HCOOH，CAS号：64-18-6）：色谱纯。 5.1.3 乙腈（CH 3CN，CAS号：75-05-8）：色谱纯。 5.1.4 甲酸铵（HCOONH 4，CAS号：540-69-2）：色谱纯。 5.1.5 无水硫酸镁 （MgSO 4，CAS号：7487-88-9）。 5.1.6 氯化钠（NaCl，CAS号：7647-14-5）。 标准品 二氰蒽醌（ C14H25N3O9，CAS号：3347-22-6）标准品：纯度 ≥98％。 溶液配制 5.3.1 甲酸-乙腈（1.0％＋99％）溶液 ：量取10 mL甲酸（见5.1.2），用乙腈（ 见5.1.3）释至1 000 mL摇匀备用。 5.3.2 流动相A：甲酸铵水溶液（ 10 mmol/L）：准确称取 0.630 6 g甲酸铵 （见5.1.4） 溶于100 mL水， 并稀释至 1 000 mL摇匀备用。 5.3.3 流动相B：乙腈（见5.1.3）。 全国团体标准信息平台 T/GBC 105 —2025 2 标准溶液配制 5.4.1 二氰蒽醌标准储备液（ 1 000 mg/L）：称取 10 mg（精确至 0.1 mg）的二氰蒽醌标准品（ 见5.2） 于10 mL容量瓶中， 使用甲酸-乙腈溶液（ 见5.3.1）溶解并定容至刻度，避光 -18 ℃及以下条件保存， 有效期1年。 5.4.2 二氰蒽醌标准储备溶液（ 10 mg/L）：吸取二氰蒽醌标准储备液（ 1 000 mg/L）（见5.4.1） 0.1 mL于10 mL容量瓶中，使用甲酸 -乙腈（见 5.3.1）定容至刻度， －18 ℃及以下条件避光保存，有 效期1个月。 5.4.3 二氰蒽醌 标准溶液（0.2 mg/L）：吸取二氰蒽醌标准溶液（ 10 mg/L）（见5.4.2）0.2 mL于 10 mL容量瓶中，用甲酸 -乙腈（见5.3.1）定容至刻度，现用现 配。 材料 5.5.1 陶瓷均质子： 2 cm（长）×1 cm（外径），或相当者。 5.5.2 微孔滤膜（有机相）： 0.22 μm，或相当者。 6 仪器和设备 液相色谱 -质谱仪联用：配有电喷雾离子源（ ESI）。 分析天平： 0.1 mg、0.01 g。 组织捣碎机。 振荡仪。 离心机：转速不低于 4 500 r/min。 塑料离心管。 聚乙烯样品瓶。 7 试样制备和储存 试样制备 样品去柄取全果（ 1 kg～3 kg），直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆，匀浆放入聚乙烯样品瓶中。 摇匀后，分为 2份，一份作为试样、另一份作为备样，同步制作空白样品。 试样储存 试样和备样于 －18 ℃及以下条件避光储存。 8 分析步骤 样品提取与净化 8.1.1 提取 称取10 g试样（精确至 0.01 g）于50 mL塑料离心管中，加入 10 mL甲酸-乙腈溶液（ 见5.3.1），及1 颗陶瓷均质子 （ 见5.5.1） ， 使用振荡仪振荡 1 min， 加入1 g无水硫酸镁 （ 见5.1.5）、4 g氯化钠 （见5.1.6）， 振荡1 min后，4 500 r/min离心5 min，得到上清液备用。 8.1.2 净化 吸取上清液 4 mL至15 mL塑料离心管中，加入 0.5 g无水硫酸镁 [每毫升上清液使用 125 mg无水硫酸镁 （见5.1.5）]，振荡1 min，4 500 r/min离心5 min，吸取上清液过微孔滤膜（ 见5.5.2），待测定。 全国团体标准信息平台 T/GBC 105 —2025 3 基质匹配标准工作曲线 空白样品（ 见7.1）按照8.1.1、8.1.2进行前处理得到空白基质溶液。 分别移取二氰蒽醌 标准溶液 （0.2 mg/L）（见5.4.3）25 μL、50 μL、100 μL、250 μL、400 μL、500 μL，用空白基质溶液稀释 至1.0 mL，曲线各点浓度分别为 0.005 mg/L、0.010 mg/L、0.020 mg/L、0.050 mg/L、0.080 mg/L、 0.100 mg/L，根据仪器性能和检测需要选择不少于 5个浓度点，供液相色谱 -质谱联用仪（ 见6.1）测定。 以二氰蒽醌定量用子离子的质量色谱图面积为纵坐标、相对应的基质标准工作溶液质量浓度为横坐标， 绘制基质标准工作曲线。 测定 8.3.1 液相色谱参考条件 参考条件如下： —— 色谱柱： C18，柱长100 mm，内径2.1 mm，粒径2.2 μm，或性能相当者； —— 流动相：流动相 A为甲酸铵水溶液（ 10 mmol/L）（见5.3.2），流动相 B为乙腈（ 见 5.1.2），流动相及其梯度条件见表 1； —— 流速：0.3 mL/min； —— 柱温：25 ℃； —— 进样量： 1 μL。 表1 流动相及其梯度条件 时间（min） 流动相A（％） 流动相B（％） 0 90 10 1 90 10 5 5 95 6 5 95 6.5 90 10 7.5 90 10 8.3.2 质谱参考条件 参考条件如下： —— 离子源类型：电喷雾离子源； —— 扫描方式：负离子扫描； —— 电喷雾电压：负离子 4 500 V； —— 离子源温度： 550 ℃； —— 雾化气压力： 0.379 MPa； —— 气帘气压力： 0.207 MPa； —— 辅助加热气压力： 0.379 MPa； —— 多反应监测：选择至少 2个子离子。二氰蒽醌的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参 数，参见表 2。 表2 二氰蒽醌的质谱参数 电离方式 保留时间（ min） 去簇电压（ V） 定量离子对 碰撞能（ V） 定性离子对 碰撞能（ V） 负 5.93 -80 295.8/264.0 -37 295.8/294.8 295.8/237.9 -36 -26 8.3.3 定性及定量 8.3.3.1 保留时间 被测试样中目标二氰蒽醌色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在 ±2.5％之内。 全国团体标准信息平台 T/GBC 105 —2025 4 8.3.3.2 离子丰度比 在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样相一致，并且在扣除背 景后的样品质谱图中，目标化合物选择的子离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品目标 化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表 3规定的范围，则可判 断样品中存在二氰蒽醌。二氰蒽醌