团 体 标 准 食源性污染物所致胎儿生 长受限的母血清脂质生物 标志物的筛查技术规程 Technical regulation for screening maternal blood lipid biomarkers of fetal growth restriction caused by foodborne contaminants 安徽省食品科学技术学会 发布T/AHFS 001-2026 ICS 67.050 CCS C 05 2026-01-05发布 2026-01-16实施 全国团体标准信息平台 T/AHFS 001-2026 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则 》的规定起 草。 本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由 安徽医科大学、合肥综合性国家科学中心大健康研究院 提出。 本文件由 安徽省食品科学技术学会 归口管理。 本文件起草单位： 安徽医科大学、合肥综合性国家科学中心大健康研究院。 本文件主要起草人： 王华、常伟、韦田、袁智、陆淇、吴兰兰、熊永伟、朱华龙、黄以超、徐德祥 本文件为首次制定。 全国团体标准信息平台 T/AHFS 001-2026 1 食源性污染物所致胎儿生长受限的母血清脂质生物标志物的筛查技 术规程 1 范围 本文件描述了食源性污染物所致胎儿生长受限（ FGR）的母血脂质生物标志物筛查试验的原理、仪 器设备、试剂与材料，规定了试验步骤、数据处理、质量控制、结果报告和生物安全措施 。 本文件适用于医疗卫生机构和第三方检测实验室等检测机构使用。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 GB/T 38736 人类生物样本保藏伦理要求 DB4403/T 86 涉及人的生命科学和医学研究伦理审查规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本 文件。 3.1 胎儿生长受限 fetal growth restriction, FGR 受母体、胎儿、胎盘等病理因素影响，胎儿生长未达到其应有的遗传潜能。 注：多表现为胎儿超声估测体重或腹围低于相应胎龄第 10百分位，是导致围产儿患病和死亡的重要 原因，还可能带来远期的不良结局，包括儿童期的认知障碍及成人期疾病（如肥胖、 2型糖尿病、心血 管疾病、中风等）的发生风险增加。 [来自胎儿生长受限专家共识（ 2019版） ] 3.2 同位素标记内标 internal standard, IS 在样品处理前加入的、结构与待测物相似但同位素标记的化合物。 3.3 质控样本 quality control sample, QC 在分析批次中额外插入的、已知特性（如浓度）的样本。用于监控分析过程的重复性、精密度以 及可能的批量效应，评估分析系统的稳定性。 全国团体标准信息平台 T/AHFS 001-2026 2 3.4 受试者工作特征曲线与曲线下面积 receiver operating characteristic curve and area under the curve, ROC/AUC 用于评估二元分类模型性能的计量学指标。受试者工作特征曲线以模型灵敏度为纵坐标、 1-特异度 为横坐标绘制；曲线下面积（ AUC）用于量化模型的整体判别能力，其值越接近 1表示判别性能越好。 3.5 变量重要性投影 variable importance in projection, VIP 在偏最小二乘等多元统计模型中，用于衡量每个自变量对模型解释与预测能力贡献大小的指标。 通 常以VIP值大于1.0作为该变量具有显著重要性的常用阈值。 3.6 错误发现率 false discovery rate, FDR 在进行多重假设检验时，控制被错误地判定为显著的假阳性结果所占比例的统计校正方法。 4 原理 通过建立发现队列和验证队列，在孕晚期（如 34-41周）采集母血清，鉴定出与 FGR显著相关的脂质 类别及特定分子。进一步，通过预测队列，在妊娠早期（孕 14周前）、中期（孕 14-28周）、晚期（孕 28 周后）纵向采集母血清，动态观察脂质变化轨迹，并确定用于早期预测 FGR的最佳时间窗口。通过丁醇 -甲醇 -甲酸铵混合液进行脂质提取和蛋白沉淀。利用高效液相色谱 -串联质谱（ HPLC -MS/MS）技术，对 血清中特定的脂质分子 （包括但不限于 DG 14:0/18:2, DG 16:0/20:4, TG 14:0/16:0/18:1 等） 进行高灵敏度、 高特异性的分离与检测。采用稳定同位素标记的内标进行定量校正。经统计分析筛选出在 FGR组与健康 对照组间存在显著差异的脂质生物标志物，并建立其与食源性污染物所致 FGR风险的预测模型。 5 仪器设备 高效液相色谱 -串联质谱仪（ HPLC -MS/MS），配置电喷雾离子源（ ESI），具备高分辨质谱能力 或至少三重四极杆质量分析器 ；-86℃超低温冰箱 ；高速冷冻离心机（最高转速≥ 14, 000 g）；涡旋混 合器；超声波清洗仪 ；分析天平（十万分之一） ；微量移液器（覆盖 0.5-1000 μL范围）。 6 主要试剂与材料 6.1 基本要求 所用水和试剂均为色谱纯或 LC-MS级。 6.2 脂质提取试剂 正丁醇、甲醇、甲酸铵。 6.3 内标混合物 6.3.1 储备液 全国团体标准信息平台 T/AHFS 001-2026 3 推荐使用以下同位素标记脂质作为内标，配制于甲醇中，作为储备液： Phosphatidylcholine (PC) 14:0 (公司： Sigma Aldrich ，货号： P2663，储备液浓度： 20 mM ) Phosphatidylethanolamine ( PE 17:0 ) (公司： Avanti Polar Lipids ，货号： 830756P，储备液浓度： 20 mM) Cholesteryl -d7 ester ( CE) 16:0 (d7) ( 公司： Sigma Aldrich ，货号： 700149P，储备液浓度： 6 mM ) Cholesferol ( COH ) (d7) (公司： Sigma Aldrich ，货号： 700041P，储备液浓度： 16 mM ) Bis (monomyristoylglycero) phosphate (S,R Isomer) ( BMP ) 14:0 (公司： Avanti Polar Lipids ，货号： 857131P，储备液浓度： 5 mM ) N-lauroyl -D-erythro -sphingosylphosphorylcholine, powder ( SM) 12:0 (公司： Avanti Polar Lipids ，货 号： 860583，储备液浓度： 5 mM ) Phosphatidylglycerol ( PG) 14:0 (公司： Avanti Polar Lipids ，货号： 840445P，储备液浓度： 20 mM ) 1,3(d5) -dihexadecanoyl -2-octadecanoyl -glycerol ( TG 16:0/18:0/16:0 ) (d5) (公司： Sigma Aldrich ，货 号： 860902P，储备液浓度： 100 µM) 脂质生物标志物检测关键试剂配制与保存见附录 A。 6.3.2 工作液 推荐使用流动性 B（水 :乙腈 :异丙醇 = 1:9:90 (v/v) ，含 10 mM甲酸铵）将标准品储备液稀释成工作 液： 除TG 16:0/18:0/16:0 (d5) 稀释为 50 µM外，其余标准品储备液均 稀释成 200 µM作为工作液。再 根据每个样品加入 1 µL标准品工作液，配置内标混合液。 6.4 主要材料 微量内插管（尖底带支架）、 2.0 mL进样瓶、 PP实心盖（配 1.5 mm厚胶垫）和 1.5 mL无酶 EP 管。 7 试验步骤 7.1 样本采集与储存 孕周 人群规定 建立发现、验证队列，用于筛选并确认生物标志物，队列建立要符合 DB4403/T 86 的要求。宜在孕 晚期（建议 28周后，分娩前）采集孕妇外周静脉血，获取母血清。样本需来源于明确诊断为 FGR（出 生体重 <10th百分位）的孕妇及匹配的正常对照孕妇。 建立预测队列，用于评估早期预测价值。需进行前瞻性纵向采样，至少在妊娠早（ 14周前）、中 （14-28周）、晚（ 28周后）三个时期各采集一次孕妇外周静脉血，获取母血清。最佳预测时间窗口为 孕晚期，最早可从 29周开始。 采集的新鲜外周血于促凝管中，室温静置 30 min。 3000 g离心 10 min后吸取上层血清。 将血清分装至无菌冻存管中，每管不小于 100 μL，并于 -80℃超低温冰箱中保存，避免反复冻融（如 为冷藏或冷冻血清， 4℃冷藏不宜超过 7 d，-20℃冷冻样品不宜超过 1月，-80℃冷冻样品不