ICS 07.060;17.020 HY A 45 中华人民共和国海洋行业标准 HY/T 1712014 海洋植物标准物质研制及保存 技术规范 Technical specification for preparation and storage of reference materials for marine plants component analysis 2014-06-25发布 2014-12-01实施 国家海洋局 发布 HY/T 171—2014 前言 本标准依据GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家海洋局第二海洋研究所提出。 本标准由全国海洋标准化技术委员会（SAC/TC283)归口。 本标准起草单位：国家海洋局第二海洋研究所、浙江大学。 本标准主要起草人：吕海燕、王正方、张仕勇、周青松、 HY/T171—2014 海洋植物标准物质研制及保存 技术规范 1范围 本标准规定了海洋植物标准物质研制及保存的方法和技术要求。 本标准适用于海洋中大型藻类（主要指海带、裙带菜、紫菜等大型藻类）无机成分分析标准物质的研 制和保存，其他成分分析标准物质可参考本标准。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。 JJF1005一2005标准物质常用术语和定义 JJF1006一1994一级标准物质技术规范 JJF1135一2005化学分析测量不确定度评定 3术语和定义 JJF1005一2005确立的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 海洋植物 marineplants 具有叶绿素、能进行光合作用、生产有机物的自养型生物，包括海洋藻类、菌类、地衣和维管束植物 等。本标准中海洋植物主要指海带、裙带菜、紫菜等大型藻类。 3.2 真空冷冻干燥 vacuumfreeze-drying -种将物体首先进行冻结以固定其生物特性及结构，然后在真空条件下进行干燥（即将物体中的固 体水分直接升华为气态），从而达到脱水目的的技术 注1：真空冷冻干燥又称升华干燥、冻干、真空冻干。 注2：真空冷冻干燥过程包含三个基本操作：冷冻、升华（初次干燥)和去吸附（二次干燥），物体可以几乎不发生结构 上或生物特性方面的变化，且具有高度的脱水性（可排出95%～99%以上的水分），故有利于长期保存。物体 干燥过程是在真空条件下进行的，故不易氧化， 3.3 ［核］辐照灭菌 irradiation sterilization 通过给定比授[予]能的钴-60射线辐照，杀灭物体内细菌的“冷消毒”方法 4海洋植物标准物质的制备 4.1海洋植物标准物质制备工艺流程 进行分析之前，应将样品（包括均勾性、稳定性检验及多家定值）在（60士1)℃烘干2h。 HY/T 171—2014 海洋植物标准物质制备工艺流程见图1。 采集的海洋植物鲜品 标准值确定、不确定度评定 洗涤与初步处理 多家定值 稳定性检验 切碎 BCo灭菌 均匀度检验 组织匀浆 装瓶 真空冷冻干燥 混磨 高铝瓷球磨机细磨 过0.198mm筛 图1 海洋植物标准物质制备工艺流程图 4.2 海洋植物标准物质的候选物 海洋植物标准物质的候选物宜选用分布地域广泛、较容易获取的新鲜海洋植物作为候选物，如：海 带、裙带菜、紫菜等海洋大型藻类。 4.3海洋植物样品的预处理 4.3.1清洗 在收获季节到养殖场采集海洋植物样品，候选物中含砂土、盐分、杂质等应小于2%。样品运回实 验室后进行清洗，清洗程序分两步，粗洗：去根、芽和杂质，然后放人蒸馏水中浸泡，洗去浮盐和细沙；精 洗：清除腐败烂叶等后，用蒸馏水浸泡、冲洗。 4.3.2匀浆 将清洗过的海洋植物分割成2cm左右的碎段，放入勾浆机中匀浆2min取出，立即倒入清洁的聚 乙烯塑料袋中，放入冷柜中速冻，备用。 2 HY/T171—2014 4.4真空冷冻干燥、粉碎 4.4.1真空冷冻干燥 采用真空冷冻干燥设备，将冰冻海洋植物浆料解冻后，再将浆料平铺在垫有聚乙烯塑料薄膜的冷冻 干燥池中，厚度约为2cm，在浆料层上方覆盖一层脱脂纱布，在一40℃真空环境中脱水56h，制得海洋 植物粉末，含水率约为1%。取出干粉样品立即放人清洁的二层聚乙烯塑料薄膜袋中，在两层之间放入 干燥剂，置于密闭的清洁容器中贮存备用。 4.4.2 粉碎 海洋植物粉末采用高铝瓷球磨机粉碎，研磨49h后，样品通过0.198mm尼龙筛（通过部分占 99.9%），再在球磨机中混磨8h，混匀备用。 4.5分装、辐照、购存 4.5.1分装、辐照 将混匀的样品分装入处理过的60mL棕色玻璃瓶中，每瓶内装海洋植物粉5g～15g，装瓶后的样 品用钻-60（6°Co）辐照48h，辐照剂量为20kGy。 4.5.2贮存 将经过辐照的瓶装海洋植物粉样品套上专用铝箔塑料袋封装，并贮存于聚乙烯塑料桶中，置于阴凉 处保存。海洋植物标准物质保存应根据标准物质的不同特性量选择特定的保存方法。保存容器应能避 光、密封，宜选择棕色中性玻璃瓶；玻璃瓶用普通洗涤剂刷洗，自来水冲洗干净后用（1十3）硝酸浸泡，然 后依次用自来水、蒸馏水、去离子水冲洗干净，并烘干备用；贮存的实验室环境要求保持清洁 5均匀性检验 5.1 检验及抽样要求 凡成批制备并分装成最小包装单元的海洋植物标准物质，应进行均匀性检验。当总体单元数少于 500个时，抽取单元数不少于15个；总体单元数大于500个时，抽取单元数不小于母体数的3%。根据 需要分别在分装的开始、中间和最后抽取，保证总体样品有足够的代表性。 5.2检验方法 采用精密度高的试验方法，通过组间方差和组内方差的比较来判断各组测量值之间有无系统误差。 当所研制的海洋植物标准物质具有多种特性量值时，应选择有代表性和不容易均匀的待测特性量值进 行均匀性检验，并选择同等或高于定值方法的精密度和具有足够灵敏度的测量方法，在重复性的实验条 件下进行均勾性检验。选择合适的统计模式进行统计检验。本标准推荐采用方差分析法即F检验法。 F值的计算公式为： Zn(; -)²m(n-1)· > Zn(; -)2 V2. Q1/v1 F= Q2/V2 式中： Q1--组间差方和；