ICS 65. 160 YC X 87 备案号：23583—2008 中华人民共和国烟草行业标准 YC/T244--2008 烟草及烟草制品 1,2-丙二醇、丙三醇和 山梨醇的测定 高效液相色谱法 Tobacco and tobacco products--Determination of 1,2-propylene glycol, glycerol and sorbitolHigh performance liquid chromatographicmethod 2008-04-14发布 2008-04-14实施 国家烟草专卖局 发布 YC/T244—2008 前言 本标准参照CORESTA第61号推荐方法《高效液相色谱法测定烟草及烟草制品中1，2-丙二醇、丙 三醇和山梨醇的含量》制定。 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家烟草专卖局提出。 本标准由全国烟草标准化技术委员会（TC144)归口。 本标准起草单位：国家烟草质量监督检验中心、广东中烟工业有限责任公司、红塔烟草（集团)有限 责任公司。 本标准主要起草人：唐纲岭、孔浩辉、秦云华、赵辉、庞永强、边照阳、沈光林、胡清源。 YC/T244—2008 烟草及烟草制品1，2-丙二醇、丙三醇和 山梨醇的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了烟草及烟草制品中1，2-丙二醇、丙三醇和山梨醇的高效液相色谱测定方法。 本棕准适用于烟草及烟草制品中1，2-丙二醇、丙三醇和山梨醇的测定。 本标准不适用于添加了其他保润剂的烟草及烟草制品。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T5606.1卷烟第1部分：抽样 GB/T19616烟草成批原料取样的一般原则（GB/T19616一2004，ISO4874：2000，MOD） YC/T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法 3原理 用水萃取试样中的1，2-丙二醇、丙三醇和山梨醇，萃取液经净化过滤后，使用配有示差折光检测器 的高效液相色谱仪测定，采用外标法定量。 4试剂与材料 4.1） 应使用分析纯级试剂。 4.2水，二次蒸馏水或其他相同质量的水。 4.3 乙二胺四乙酸二钠钙(Ca，Na-EDTA）。 4.41,2-丙二醇，纯度应不低于99.5%，应存放于干燥器中。 4.5 丙三醇，纯度应不低于99.5%，应存放于干燥器中。 4.6山梨醇，纯度应不低于99.5%，应存放于干燥器中。 硅藻土，粒径不大于5μm。 4.7 4.8标准溶液 4.8.1混合储备液 分别称取约0.25g的1，2-丙二醇（4.4）、丙三醇（4.5）和山梨醇（4.6），精确至0.0001g，置于 250mL容量瓶中，用水（4.2)定容至刻度后摇勾。混合储备液应避光贮存于0℃～5℃条件下，至少可 稳定12d。 4.8.2工作标准溶液 分别移取一定体积的混合储备液（4.8.1)，用水（4.2)稀释定容至刻度。制备至少5个标准溶液，其 浓度范围应覆盖预计在试样中检测到的1，2-丙二醇、丙三醇和山梨醇的含量。 5仪器 5.1分析天平，精确至0.1mg。 1 YC/T244—2008 5.2振荡器，250r/min~275r/min。 5.3高效液相色谱仪，配二元泵、自动进样器、柱温箱、带恒温池的示差折光检测器及数据处理系统。 6分析步骤 6.1取样 卷烟试样按照GB/T5606.1进行取样。 烟叶试样按照GB/T19616进行取样。 6.2试样制备 按照YC/T31制备试样并测定水分含量。 注：分析所用的试样也可以是卷烟烟丝。 6.3萃取 称取2.5g试样，精确至0.01g，置于250mL三角瓶中。加入100mL水，具塞振荡萃取30min。 然后使用滤纸上均匀分布有3g～4g硅藻土（4.7)的布氏漏斗真空抽滤，弃去初始抽滤2次～3次的约 40mL滤液，收集剩余滤液转移至进样瓶中并密封，待分析用。 6.4测定 6.4.1仪器准备 按照制造商操作手册运行液相色谱仪。所采用色谱条件应能使1，2-丙二醇、丙三醇、山梨醇与其 他物质完全分离。 以下液相色谱仪分析条件可供参考，采用其他条件应验证其适用性： 色谐柱：300mm×6.5mmi.d.；固定相：磺化苯乙烯-二乙烯苯共物的钙盐；推荐使用同样 填料的保护柱； 一流动相：50mg/L乙二胺四乙酸二钠钙水溶液； 一流速：0.5mL/min； 柱温：80℃； 进样体积：20μL； 检测池温度：40℃； -进样量：20μL。 6.4.2标准曲线的制作 对工作标准溶液（4.8.2)进行色谱测定，建立线性回归方程，相关系数R²应不小于0.99。 每20次试样测定后，应注入一个中等浓度的标准溶液，如测得值与原值相差超过5%，则应重新进 行整个标准曲线的制作，其相关试样应用新的标准曲线重新测定。 标准溶液和试样萃取液色谱图参见附录A。 7结果的计算与表述 试样中1,2-丙二醇，丙三醇和山梨醇的含量以质量分数w计，数值以%表示，按式（1)计算： cXV (1) W= 式中： c—萃取液中1,2-丙二醇，丙三醇和山梨醇的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）； V—萃取液体积，单位为毫升（mL)； m——试样的质量，单位为克(g); w-—试样水分的质量分数，%。 结果以两次平行测定结果的平均值表示，精确至0.01%。 2 YC/T244-2008 8回收率和检出限 本方法的回收率和检出限结果见表1。 表1方法的回收率和检出限结果 保润剂 回收率/% 检出限/(μg/mL) 1,2-丙二醇 99. 4 16. 05 丙三醇 99. 9 23.06 98. 8 18.75 6 测试报告 测试报告应说明使用的方法和得到的结果，还应包括本标准未规定的或选择性的条件，以及可能影 响结果的其他条件。测试报告应包括试样的唯一性资料。 3 YC/T244—2008 附录A （资料性附录） 色谱图示例 按照本标准所规定的方法对标准溶液和试样萃取液进行液相色谱分析，色谱图如图A.1和图A.2 所示。 1 2 4 5 6 70 7.523 60 113 373 5 20 5 0.51.52.5 3.54.55.56.5 7.58.59.510.511.512.513.514.515.516.517.518.519.5 1.02.0 3.0 4.05.06.07.0 8. 0 9. 0 10. 0 11.0 12. 0 13. 0 14.0 15.0 16.0 17.0 18.0 19. 0 时间 / min 1—蔗糖； 2——葡萄糖； 3-果糖; 4——丙三醇； 5——1,2-丙二醇； 6——山梨醇。 图A.1标准溶液色谱示例图 4 YC/T 244—2008 70 2 3 5 60- 11.309 40 '6 528 ≥4.560 20- 113 E0 0.5"1.5 .2.53.5 9.510.511.512.513.514.515.516.517.518.519.5 4.5 5.5 6.5 7. 5 8.5 1.02.0 3.0 4.05.0 6.07.0 8.09.010.0 11.0 12.0 13.0 14.0 15.0 16.0 17.0 18.0 19.0 时间/min 一蔗糖； 2- 葡萄糖； 3——果糖； 4一一丙三醇； 5一—1,2-丙二醇。 图A.2 试样萃取液色谱示例图