EJ 中华人民共和国核行业标准 EJ/T 953-95 20022827 人血清促甲状腺素 放射免疫分析试剂盒 1995-07-05 发布 1995-11-01实施 中国核工业总公司 发布 中华人民共和国核行业标准 人血清促甲状腺素 EJ/T953-95 放射免疫分析试剂盒 1主题内容与适用范围 本标准规定了人血清促甲状腺素（以下简称TSH)放射免疫分析试剂盒的技术条件及 检验方法。 本标准适用于双抗体-聚乙二醇法的TSH放射免疫分析试剂盒，也适用于其它免疫沉 淀剂为分离剂的TSH放射免疫分析试剂盒。 2引用标准 GB11806放射性物质安全运输规定 EJ/T804·放射性同位素产品代号 3产品代号及试剂盒的组成 3.1产品代号 应按EJ/T804规定编写产品代号。 TSH放射免疫分析试剂盒的代号为：TSHRIAI125062x 3.2试剂盒的组成及主要试剂特性 3.2.1试剂盒组成 试剂盒主要组成如下： *HSL-Ist b. ·TSH标准品； 抗TSH抗体， c. 第二抗体； d. 乙二（PEG） e. f. 缓冲液。 3.2.2主要试剂特性 主要试剂特性如下： 息。“标记抗原 比活度：62.2~124.3GBq·μmol-1(60~120μCi.μg~"); 放射化学纯度：不小于90%。 b.抗TSH抗体 中国核工业总公司1995-07-05批准 1995-11-01实施 EJ/T953-95 亲合常数：K≥1×101L·mol-"， 交叉反应：与HCG交叉反应不大于4×10-3%，与FSH交叉反应不大于2×10-2%，与 LH交叉反应不大于1X10-1%。 c.、标准品 标准品应是国家标准品。 4技术指标 主要技术指标如下。 4.1灵敏度 最小检出值不大于1.0mIU，L-1。 4.2非特异结合率(NSB) 不大于5%。 4.3最大结合率(B。） 应大于30%。 4.4精密度 用变异系数(CV)表示。 批内CV不大于13%（n≥10)， 批间CV不大于15%（n≥10)。 4.5准确度 在一次测定中，低、中、高三个剂量的质量控制血清测定值均应在允许范围（士2SD) 内。 4.6回收率(R) 应在90%~110%之间。 4.7相关系数(r)和有效剂量值(ED) 剂量响应曲线的相关系数r的绝对值应不小于0.99， 有效剂量ED25、ED50、ED75（即结合率分别为25%、50%、75%时的对应剂量值)均应 在剂量响应曲线范围内，其变化均在（士2SD)范围内。 4.8测定范围 推荐在1~60mIU·L-1之间。 4.9有效期 在2～8℃条件下贮存，从生产日期计算，有效期为4周。 5检验方法 按附录A（补充件）实验程序操作，也可以用其它等效方法。 5.1灵敏度的测定 求出零管结合率(B。)的标准差SD(n≥10)，以零管结合率的均值减去2SD所得结合率 的相应剂量值，即为试剂盒的灵敏度。 2 EJ/T953-95 5.2NSB的测定 取两支放免试管，分别加入与测定样品相同体积的正常人血清和与抗TSH抗体相同 体积的缓冲液操作。NSB按公式（1)计算： NSB=[(C, -C)/(C,-C,)]× 100% (1) 式中;C.非特异管计数率，计数/min ，Cg——仪器本底计数率，计数/min多 ！.C一总放射性管计数率，计数/min。 5.3.B。的测定 B。按公式(2)计算： B; = [(C. - C,)/(C, - C,)J × 100% ***(2) 式中;C。一 一零标准管计数率，计数/min。 5.4精密度的测定 精密度用样品测定值的变异系数表示。CV按公式（3）计算： CV =(SD/)× 100% *(3) 式中：SD- 一n次测定TSH值的标准差， 一n(n≥10)次测定TSH的均值。 5.5准确度的测定 用低、中、高三个剂量的质量控制血清测定值计算 SD。 5.6·R的测定 在已知TSH含量的血样中加入一定量的TSH，然后测定血样中总TSH含量。R按公 式(4)计算： R=[(D,-D,)/DJ×100% (4) 式中：D.一 一血样中测得的总TSH的值，mIU·L-"， D-血样中已知的TSH值，mIU·L~1 D.—血样中加入的TSH值，mIU·L-1 5.7剂量响应曲线的绘制及r、ED值的计算 各标准剂量点的放射性结合率B(习惯用B/B。表示)按公式(5)计算：2:! B=[(C,-C,)/(C,-C,)]×100% 3 EJ/T 953-95 式中：C.一 一各标准剂量点的放射性计数率，计数/min 以各标准剂量点的B为纵坐标，以各相应的标准剂量点的浓度为横坐标，绘制剂量响 应曲线并求出r、ED值。 检验规则 6 产品的质量检验分为型式检验和出厂检验两项。 6.1型式检验 产品投产前及投产后工艺流程改变、原料变更，均须按第4章技术要求中规定的内容检 验. 6.2出厂检验 6.2.1全检项目 试剂盒组份、包装及标志等。 6.2.2抽检项目 NSB、B。、剂量响应曲线及质量控制血清测定值. 6.2.3抽样方式 抽检采用随机取样方式。100盒以下抽取1盒，101～300盒抽取2盒，301～500抽取3 盒，501盒以上抽取4盒。 6.2.4抽检结果判断 如果检验结果有一项指标不符合本标准规定的技术要求时，应重新以两倍的数量随机 取样进行复检。经复检仍不合格，则本批试剂盒判为不合格。 6.2.5检验证书 产品应有检验合格证书，见附录B（参考件）。 标志、包装、贮存和运输 7.1标志 包括试剂盒封面标志、放射性试剂瓶标志、试剂瓶标志。 7.1.1 试剂盒封面标志 试剂盒封面标志内容包括： 生产厂家， a.' b. 产品名称； c. 注册商标， d. 产品代号： 产品批号： e. 批准文号; f. 注意事项， b. 有效期： EJ/T·953-95 7.1.2放射性试剂瓶标志 放射性试剂瓶标志内容包括： 名称； a. b. 批号： 放射性活度； c. d. 测量日期； e：放射性标志。 7.1.3试剂瓶标志 试剂瓶标志内容包括： a. 名称； 批号： &浓度; 贮存条件； e.‘有效期。 7.2包装和运输 7.2.1包装 包装必须保证运输及防护安全，应符合GB11806豁免运输包装规定。 包装盒内必须附有产品使用说明书。说明书内容包括： 生产厂家； B. b. 产品名称； c. 产品代号； d. 批准文号： 产品批号： i. 适用范围， 方法原理， g. h. 试剂盒的组成及试剂配制， 操作程序； 1. 小. 结果计算； k. 技术指标； 注意事项 1. 有效期； m. n.参考文献。 7.2.:2.运输 运输应符合GB11806的规定。 7.3 .贮存 试剂盒应贮存于2~8℃。 2EJ/T953-95 附录A 人血清促甲状腺素放射免疫分析方法 (补充件） A1方法提要 促甲状腺素是一种糖蛋白激素分子量为28.000，本方法用竞争放射免疫分析法测症 人血清中促甲状腺素的含量。样品或标准中的TSH和加入的“I-TSH与有限量的抗体进行 竞争性结合反应，一部分151-TSH与抗体结合，而另一部分厕呈游高状态：其结合的激血 样或标准中TSH的含量有关。TSH含量高，则结合的1I-TSH量就少，反之TSH含量低， 结合的125T-TSH量就多。用二抗和案乙二醇作分离剂，将源-抗体复合沉淀下来，测定其放 射性计数率。用含不同：TSH浓度的血清作标准，获得剂量响应曲线，从剂量响应曲线上查 出被测样品中TSH的含量。 A2.仪器及设备 丫计数器、微量加样器、放免试管、负压泵、离心机、恒温水浴锅和一般生物化学实验室 仪器设备。 A3实验序 A3.1按说明书要求配制有关试剂。 A3.2试管编号。1，2为总放射性管（T）3，4为NSB管：5，6为零标准管：718为标准 管：18号管后依次为质量控制血清及样品管。 A3.3操作顺序，按表A1实验顺序进行操作，逐步加入相应的试剂。游液意以表示。 A4结果计算 各管结合物的放射性计数率减去:NSB管的放射性计数率，按公式(5)计算出标准管的 结合率，按下式计算出样品管的结合率， B(B/B.)=[(C,-C.)/(C,-C)J×100% "(Ai) 式中：C,一一待测样品管结合物的放射性计数率，计数/min。 以各标准管的B为纵坐标，TSH标准剂量点的浓度为横坐标；绘制剂量喇应曲线。根 据待测样品的B，在剂量响应曲线上查得样品TSH含量（现图A1）。