EJ 中华人民共和国核行业标准 EJ/T 857--94 游离甲状腺素、游离三碘甲腺原氨 酸放射免疫分析试剂盒 1994-07-18发布 1994-12-01实施 中国核工业总公司 发布 中华人民共和国核行业标准 游离甲状腺素、游离三硕甲腺原氨酸 EJ/T857—94 放射免疫分析试剂盒 1主题内容与适用范围 离三碘甲腺原氨酸（以下简称FT3）放射免疫分析试剂盒的技术条件。 本标准适用于以磁性一抗为分离剂的FT4、FT：放射免疫分析试剂盒。 2引用标准 GB11806放射性物质安全运输规定 EJ/T804放射性同位素产品代号 3术语 3.1游离甲状腺素（FT.）、游离三碘甲腺原氟酸（FT，） 体液中不与载体蛋白相结合的微量的甲状腺素（T。）、三碘甲腺原氨酸（T3）即为FT，、 FT3，它们具有生物活性，并与结合态处于动态平衡。 3.2二步法（反滴定法） 第一步利用过量抗体与抗原充分反应，第二步用过量的标记抗原滴定抗体上剩余的结 合部位的一种放射免疫分析法。 3.3磁性一抗分离剂 偶联第一抗体的磁性颗粒作抗原与抗体反应后，结合相与游离相的分离剂。 4产品代号及试剂盒的组成 4.1产品代号 应按EJ/T804规定，FT4、FT放射免疫分析试剂盒的代号为： RIAI125 包装大小 分离剂类型 产品代码 产品大类 质量数代码 元素代号 放射免疫试剂盒代号 中国核工业总公司1994-07-18批准 1994-12-01实施 1 EJ/T 857—94 4.2试剂盒组成及主要试剂特性 4.2.1试剂盒组成 试剂盒组成见表1。 表1试剂盒组成 试剂名称 FT, FT: I125-T, I125-T3 标记抗原 标准 FT,血清标准 FT:血清标准 磁抗分离剂 T,磁性一抗 T;磁性一抗 洗涤液 洗涤液 洗涤液 4.2.23 主要试剂特性 主要试剂特性见表2～4。 表2·标记抗原 I125-T. 特性 I125-T3 放射性比活度 ≥3×10* ≥1.7×104 MBq. nmol 1 放化纯度 ≥95 ≥95 % 表 3磁性一抗分离剂 特性 磁性一抗 T。 磁性一抗 T3 抗体滴度 1.10,000~1.20,000 1:150,000~1:200,000 亲合常数 ≥1.1×1010 ≥5.5×1010 L. mol! 与T:交叉反应率 与T,交叉反应率 交叉反应 小于1.0×10-4 小于2.9×10-4 磁性粒子粒度 1~10 1~10 μm 2 EJ/T857-94 表 4 标准血清基质 特性 FT, FT; 人去激素血清 澳抗阴性 澳抗阴性 蛋白浓度 4~6 4~6 g/100mL 状态 透明液态 透明液态 5技术指标 技术指标见表5。 表5FT、FT3放射免疫分析试剂盒技术指标 技术指标 FT, FT: 灵敏度（最小检出值） 90> ≤1.0 pmol.L"1 非特异结合率 NSB% 最大结合率 30~45 30~45 B.% 精密度1) 批内 ≤12 ≤12 批间 ≤16 ≤16 Cv% 准确度2) 三个质控血清全部在允许范围内 三个质控血清全部在允许范围内 相关系数3) ≥0.99 ≥0. 99 有效剂量值" 三个ED值全部 三个ED值全部在允许范圈内 ED 在允许范内 有效期5) PS&> PS> 注：1)用样品测定值的变异系数(Cv%）表示(n≥10）。 2)用质量控制血清的测定结果表示。在一次测定中低、中、高三个不同剂量的质量控 制血清的测定结果，全部在允许范围(X士2SD)内。 3)剂量反应曲线的相关系数。 4)在一次放免分析实验中，剂量反应曲线的三个有效值ED85、ED70、ED50，全部在 允许范围(X士2SD)内。 5)在2～8℃条件下贮存。从出厂日期计算有效期不少于35d。 测定方法 6 6.1灵敏度的测定 按附录A（补充件）实验程序操作。以（B/T)%值为纵坐标，以FT：或FT浓度为横坐 3 EJ/T 857—94 标，在直角坐标纸上作剂量反应曲线。求出零管结合率（B./T)%的标准差SD(n≥10），以 (B。/T)%的均值减去2SD所得结合率的相应剂量值，即为试剂盒的灵敏度。 6.2非特异结合率(NSB%)的测定 取两支放免试管，分别加入与测定样品相同体积的FT或FT，零标准血清、I125-T。或 I125-T：和正常羊血清偶联的磁性粒子悬浮液。按附录A（补充件）实验程序操作。（NSB）%按 公式（1)计算： NSB%=[(C,-C)/(C,-C,)JX100 (1) 式中：C.—-非特异管计数率，计数/min, C一仪器本底计数率，计数/min； C.总放射性管计数率，计数/min。 6.3最大结合率(B。%)的测定 按附录A（补充件）实验程序操作，B。按公式（2)计算： B。%=[(C。-C,)/(C,-C,)JX100 (2) 式中：C。零标准管计数率，计数/min。 6.4精密度测定 用样品测定值的Cv%表示。按附录A（补充件）实验程序操作。Cv%按公式（3）计算： C%=(SD/X)×100 式中：SD—n次测定FT或FT：值的标准差,nmol.L-* X——n次测定FT,或FT 的均值(n≥10),nmol.L-1。 6.5剂量反应曲线 6.5.1曲线的绘制 6.5.1.1按附录A（补充件)实验程序操作。各标准剂量点的放射性结合物(B)的结合率 (B/B。）%按公式（4)计算： (B/B)%=[(C,-C.)/(C。-C,)}X100 (4) 式中：C,-一各标准剂量点放射性结合物（B)计数率，计数/min。 以（B/B。）%为纵坐标，以FT或FT：标准剂量点的浓度为横坐标，在半对数坐标纸上 绘制剂量反应曲线。 6.5.1.2按附录A（补充件）实验程序操作。用带有多种放射免疫分析数据处理程序的计算 机进行曲线拟合，以选择最优的数学模型绘制剂量反应曲线。 6.5.2相关系数、有效剂量值的计算 由计算机数据处理，曲线拟合得、ED值。 7检验规则 产品的质量检验，包括型式检验和出厂检验二项。 7.1型式检验 产品投产前及投产后工艺流程改变、原料变更，均须按本标准第5章技术指标中规定的 内容检验。 7.2出厂检验 4 EJ/T857—94 7.2.1全检项目 试剂盒组分、包装及标志等。 7.2.2抽检 7.2.2.1抽检项目 NSB%、B。%、剂量反应曲线及质量控制血清测定值等。 7.2.2.2抽检方式 抽检采取随机取样方式。100盒以下抽取1盒，100～300盒抽取2盒，300～500盒抽取 3盒，500～1000盒抽取4盒。如果检验结果有一项不符合本标准的要求时，应重新以两倍的 数量随机取样进行复检。复检的结果，有一项指标不符合本标准的要求，本批试剂盒判为不 合格。 7.2.3检验证书 产品应有检验合格证书，见附录B（补充件）。 8标志、包装、贮存和运输 8.1标志 包括试剂盒封面标志、放射性试剂标志、试剂标志。 8.1.1 试剂盒封面标志 生产厂家； a. b. 产品名称： 注册商标； c. d. 产品代号； 产品批号； e. f. 批准文号； 注意事项； g. h. 有效期。 8.1.2 放射性试剂标志 名称; a. b. 批号； c. 放射性活度； d. 测量日期； 放射性标志。 e. 8.1.3 试剂标志 a. 名称; b. 批号； 浓度; c. d. 贮存条件； e. 有效期。 8.21 包装和运输 8.2.1 包装 5 EJ/T 85794 包装盒内必须附有产品使用说明书。说明书内容包括： 生产厂家； a. b. 产品名称； 产品代号； c. d. 批准文号； 产品批号； e. f. 适用范围； 方法原理； g. h. 试剂配制； i. 操作程序； 结果计算； j. k. 质量指标； 1. 注意事项； m. 有效期； n. 参考文献。 包装必须保证运输及防护安全。应符合GB11806豁免运输包装规定 8.2.2运输 运输应符合GB11806的规定 8.3贮存 试剂盒应于2～8℃。 9