SN 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准 SN/T.0804-1999 进出口菜籽油中芥酸含量的检验方法 高效液相色谱法 HPLC method for determination of erucic acid in rapeseed oil for import and export 2000-05-01实施 1999-12-01发布 中华人民共和国国家出人境检验检疫局发布 SN/T0804—1999 前言 本标准是根据GB/T1.1一1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则 第1部分： 标准编写的基本规定》的要求编写的。其中测定方法是参考国内外有关文献，经研究、改进和验证后制定 的。 本标准的附录A是提示的附录 本标准由中华人民共和国国家出人境检验检疫局提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：潘坤永、蔡志群、蓝芳、梁通雯。 - 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口菜籽油中芥酸含量的检验方法 SN/T0804-1999 高效液相色谱法 HPLCmethod for determination of erucic acid in rapeseed oil for import and export 1范围 本标准规定了进出口菜籽油中芥酸含量的液相色谱测定方法。 本标准适用于进出口菜籽油中芥酸含量的测定。 2引用标准 2 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 SN/T0800.1—1999 9进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法 3抽样和制样 按照SN/T0800.1执行。 4测定方法 4.1方法原理 试样经氢氧化钠-甲醇溶液皂化，水解成脂肪酸，在三氟化硼催化下，脂肪酸甲酯化后，用配有紫外 检测器的液相色谱仪测定，外标法定量。 4.2试剂和材料 4.2.1甲醇：色谱纯。 4.2.2氢氧化钠。 4.2.3 氢氧化钠溶液：10%水溶液。 4.2.4 三氟化硼-甲醇溶液：1十4(V/V）)。 4. 2. 5 正己烷。 4.2.6 芥酸标准品：纯度90%。 4.3·仪器和设备 4.3.1高效液相色谱仪并配有紫外检测器。 4. 3. 2 微量注射器：20μL。 4.3.3水浴装置。 4.4测定步骤 4.4.1样品处理 称取（60～70）mg菜籽油样于25mL具塞三角瓶中，加人12mL甲醇及1mL10%氢氧化钠溶液， 2000-05-01实施 中华人民共和国国家出入境检验检疫局1999-12-01批准 1 SN/T0804—1999 于（90～100）℃的水浴上加热约15min，稍冷却后，加入5mL三氟化硼-甲醇溶液，再置微沸水浴中加 热约5min后冷却，加人5mL正已烷，振摇1min，静置分层后，准确吸取2mL上层溶液于10mL试管 中，在约80℃水浴上挥干正已烷，准确加入1mL甲醇溶解残渣，供液相色谱仪测定。 4.4.2.测定 4.4.2.1色谱条件 a）色谱柱Zorbax-ODS4.6mmX250mm。 b）检测器：紫外检测器。 c）流动相：甲醇，使用前经0.45μm滤膜过滤，超声波脱气。 d）流速：2.2mL/min。 e）柱温：（22～25）℃。 f）检测波长：215nm。 4.4.2.2色谱测定 用微量注射器准确吸取20μL处理后样液注人液相色谱仪，并测量其峰面积。在上述色谱条件下， 芥酸甲酯的保留时间为7.7min，标准品甲酯化的色谱图见附录A中图A1。 4.4.2.3工作曲线的制定 准确称取0.0，4.0，8.0，16.0，32.0，64.0mg芥酸于25mL具塞三角瓶中，按4.4.1和4.4.2.2方 法操作，以峰面积为纵坐标，以芥酸毫克数为横坐标，绘制工作曲线。 4.4.2.4空白试验：除不加试样外，按上述测定步骤进行。 4.5结果计算 用样品测量所得的峰面积在工作曲线上查出相应的芥酸量，按式（1)计算试样中芥酸含量： A X(%) = × 100 .(1) m 式中：X一一样品中芥酸的含量，%； A—样品溶液测得芥酸质量，mg； 一样品质量，mg。 m- 注：计算结果需将空白值扣除。 2 SN/T0804-1999 附录A （提示的附录） 芥酸标准品液相色谱图 t=7.7min 芥酸甲酯 图A1 芥酸标准品甲酯色谱图 SN/T 0804—1999 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 进出口菜籽油中芥酸含量的检验方法 高效液相色谱法 SN/T0804—1999 * 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 电 话：68522112 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 版权专有不得翻印 * 开本880×12301/16 印张1/2 字数6千字 2000年5月第一版 2000年5月第一次印刷 印数1-2000 * 书号：155066·2-13000 定价6.00元 SN/T 0804—1999 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 进出口菜籽油中芥酸含量的检验方法 高效液相色谱法 SN/T0804—1999 * 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 电 话：68522112 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 版权专有不得翻印 * 开本880×12301/16 印张1/2 字数6千字 2000年5月第一版 2000年5月第一次印刷 印数1-2000 * 书号：155066·2-13000 定价6.00元