NS 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准 SN/T 0744—1999 200:0734 出口饮料中维生素C和咖啡因检验方法 Method for determination of vitamin C and caffeine in beverages for export 1999-05-05发布 1999-08-01实施 中华人民共和国国家出人境检验检疫局发布 SN/T 0744—1999 前言 本标准是根据GB/T1.1一1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部分： 标准编写的基本规定》要求进行编写的。其中测定方法是参考国内外有关文献，经研究、改进和验证后制 定的。本标准同时规定了抽样和制样方法。 测定低限是根据测定方法的灵敏度而制定的。 本标准的附录A是提示的附录。 本标准由中华人民共和国国家出人境检验检疫局提出并归口。 本标准由中华人民共和国厦门进出口商品检验局负责起草。 本标准主要起草人：黄丽玲、周昱、庄宿燕。 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 出口饮料中维生素C和咖啡因检验方法 SN/T 0744—1999 Method for determination of vitamin C and caffeine in beverages for export 1范围 本标准规定了出口饮料中维生素C和咖啡因检验的抽样、制样和液相色谱测定方法。 本标准适用于出口菊花茶饮料中维生素C、出口罐装乌龙茶饮料中维生素C和咖啡因的测定。 2抽样和制样 2.1.检验批 以不超过1500件为一检验批。 同一检验批的商品应具有同一的特征，如包装、标记、产地、规格、等级等。 2.2抽样数量 表 1 批量，件 最低抽样数，件 1~25 1 26~100 5 101~250 10 251~1500 15 2.3抽样方法 按表1规定的抽样件数随机抽取，逐件开启，每件至少取一罐作为原始样品，加封后标明标记，及时 送实验室。 2.4试样制备 将取得的全部原始样品倒人洁净的塘瓷混样桶内，充分搅拌混匀，再将混匀样品分装出两份（每份 500mL），密封，并标明标记，作为试样。 2.5试样保存 将试样于4℃～5℃冷藏保存。 注：在抽样和制样的操作过程中必须防止样品受到污染和发生被测物含量变化。 3测定方法 3.1方法提要 样品经水适当稀释后，用液相色谱法测定。以C18反相柱为分离柱，紫外检测器检测，外标法定量。 3.2试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 3.2.1乙酸。 3.2.2甲醇。 中华人民共和国国家出入境检验检疫局1999-05-05批准 1999-08-01实施 1 SN/T0744—1999 3.2.3乙酸铵。 3.2.4乙酸铵溶液：0.02mol/L，称取1:542g乙酸铵溶于水中并定容至1000mL，再用乙酸调节pH 值为4.0。 3.2.5维生素C标准品：纯度≥99.5%。 3.2.6咖啡因标准品：纯度99.5%。 3.2.7维生素C标准贮备液：准确称取适量维生素C标准品，用水溶解，配制成浓度为1mg/mL的维 生素C标准贮备液（临用时配制）。 3.2.8咖啡因标准贮备液：准确称取适量咖啡因标准品，用水溶解，配制成浓度为1.mg/mL的咖啡因 标准贮备液。 3.2.9混合标准工作液：根据需要，吸取适量的上述维生素C标准贮备液和咖啡因标准贮备液，用水 稀释成适当浓度的混合标准工作液。 3.3仪器、设备 3.3.1.液相色谱仪：配有紫外检测器。 3.3.2超声波发生器。 3.3.3微孔过滤器：0.45μm。 3.3.4微量注射器：25μL。 3.4测定步骤 3.4.1样品制备 准确移取适量样品，视样液中维生素C和咖啡因的含量高低，用水适当稀释定容（含二氧化碳的样 品应先搅动或在超声波发生器上除去二氧化碳），样液经0.45μm微孔过滤器过滤后，供液相色谱测 定。 3.4.2色谱条件 a）色谱柱：150mm×3.9mm（id）不锈钢柱； b）固定相：C18键合固定相，粒度10μm； c）流动相：0.02mol/L乙酸铵溶液-甲醇（75+25）； d）流速：1.0mL/min; e）检测器波长：230nm； f）进样体积：10μL。 3.4.3色谱测定 根据样液中维生素C和咖啡因的含量情况，选择峰高相近的混合标准工作液。混合标准工作液和 样液中的维生素C和咖啡因的响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作液和样液等体积参插进样 测定。在上述色谱条件下，维生素C的保留时间约为1.2min，咖啡因的保留时间约为4.9min。标准色 谱图见附录A中图A1。 3.4.4空白试验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。 3.5结果计算和表述 用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中维生素C或咖啡因的含量： h.c.V X = hs·m 式中：X -试样中维生素C或咖啡因含量，mg/L； 样液中维生素C或咖啡因的峰高，mm; h- hs- 混合标准工作液中维生素C或咖啡因的峰高，mm； 一混合标准工作液中维生素C或咖啡因的浓度，μg/mL； 2 SN/T 0744—1999 V样液最终定容体积,mL; m所取的试样量，mL。 注：计算结果需将空白值扣除。 测定低限、回收率 4 4.1 测定低限 本方法测定低限：维生素C和咖啡因均为2.5μg/mL。 4.2 2回收率 菊花茶饮料中维生素C的添加浓度及其回收率的实验数据： 10μg/mL时，回收率为87%； 20μg/mL时，回收率为101%； 30μg/mL时，回收率为105%。 罐装乌龙茶饮料中维生素C的添加浓度及其回收率的实验数据： 15μg/mL时，回收率为102%； 20μg/mL时，回收率为101%； 35ug/mL时，回收率为100%。 罐装乌龙茶饮料中咖啡因的添加浓度及其回收率的实验数据： 20μg/mL时，回收率为101%； 30μg/mL时，回收率为102%； 40μg/mL时，回收率为102%。 SN/T 0744—1999 SN/T0744-1999 附录A （提示的附录） 标准品色谱图 维生索C .27 1 咖啡因 4. 91 5.00* 图A1 标准品液相色谱图 版权专有不得翻印 书号：155066·2-12694 定价： 6.00元 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 出口饮料中维生素C和咖啡因检验方法 SN/T 0744—1999 * 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 电 话：68522112 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 新华书店北京发行所发行各地新华书店经售 版权专有不得翻印 * 开本880×12301/16 印张1/2 字数9千字 1999年9月第一版 1999年9月第一次印刷 印数1-2000 * 书号：155066·2-12694 定价6.00元