SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4052—2014 出口保健食品中荷叶碱的测定 Determination of nuciferine in health foods for export 行业标准信息服务平台 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T40522014 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国湖南出人境检验检疫局、湖南省检验检疫科学技术研究院。 本标准主要起草人：焦艳娜、颜鸿飞、付善良、王美玲、李拥军、张莹、黄志强。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 4052—2014 出口保健食品中荷叶碱的测定 1范围 本标准规定了保健食品中荷叶碱的两种测定方法，即液相色谱-质谱/质谱法和高效液相色谱法。 本标准适用于降脂胶囊、减肥咀嚼片和减肥茶中荷叶碱的定量测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 第一法液相色谱-质谱/质谱法 3原理 试样中的荷叶碱用甲醇超声提取，提取液经稀释后进样，高效液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法 定量。 4试剂和材料 除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。 甲醇：液相色谱级。 4.2 乙腈：液相色谱级。 4.3 乙酸。 4.4 0.1%乙酸溶液：准确移取1ml乙酸（4.3），用水稀释至1000mL。 4.5 甲醇-水混合溶液（1+1，体积比）：量取100mL甲醇，加入100mL水，混匀备用。 4.6 荷叶碱标准品（CAS号：475-83-2，分子式：C19H21NO）：纯度≥99%。 荷叶碱标准贮备液：准确称取适量的荷叶碱标准品，用甲醇溶解，配制成浓度为1.0mg/mL的标 准贮备溶液，0℃～4℃下避光保存。 成不同浓度系列的标准工作溶液。 5仪器 5.1 高效液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。 5.2超声仪。 5.3粉碎机。 5.4 分析天平：感量为0.0001g和0.01g。 1 SN/T4052—2014 5.5 离心机（最大转速10000r/min）。 6试样制备与保存 6.1 试样制备 取20粒片剂粉碎后，混匀，均分成两份，分别装人洁净容器内；取20粒胶囊试样连同胶囊壳一起粉 碎，混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内。减肥茶试样取5包～10包充分混匀，粉碎后均分成两份， 分别装人洁净容器内。 6.2试样的保存 将试样于0℃～4℃下保存。在取样、制样过程中，应防止样品受到污染或发生目标物含量的 变化。 7 测定步骤 7.1提取 称取1g（精确至0.01g）试样于50mL具塞锥形瓶中，加人30mL甲醇超声提取30min。取出冷 却至室温，将样品全部转移至50mL容量瓶中，用15mL甲醇分数次清洗锥形瓶，合并清洗液至容量瓶 中并用甲醇定容至刻度，摇匀后，静置5min。移取5mL提取液至15mL离心管中，在6000r/min离 心5min后，取0.5mL上清液，加入0.5mL甲醇-水混合溶液（4.5），混匀后过0.45um有机微孔滤膜， 供液相色谱-质谱/质谱仪分析。 7.2测定 7.2.1 液相色谱条件 液相色谱条件如下： a) 色谱柱：C18柱（粒径5um，柱长150mm，内径4.6mm）或相当者； b) 流动相：梯度洗脱程序见表1； 标准信 c) 流速：0.5mL/min； d) 柱温：30℃； e) 进样量：10μL。 表1 流动相梯度洗脱程序 时间 0.1%乙酸水溶液 乙腈 % min % 90 0 10 4 60 40 10 10 90 12 10 90 12.1 90 10 15 06 10 2