ICS 67.160.10 QB 分类号：X62 备案号：51145-2015 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T4850-2015 葡萄酒中挥发性酯类的测定方法 静态顶空一气相色谱法 Determination of volatile ester components in wine- Static headspace-gas chromatography 2015-07-14发布 2016-01-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T4850—2015 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国酿酒标准化技术委员会（SAC/TC471）归口。 本标准起草单位：中国食品发酵工业研究院、深圳市华测检测技术股份有限公司、中国食品有限公 烟台张裕集团有限公司、广东省食品工业研究所。 司、 本标准主要起草人：钟其顶、高红波、郭勇、李长征、李福东、李记明、于英、许佩勤、廖伟。 本标准为首次制定。 QB/T4850-2015 葡萄酒中挥发性酯类的测定方法静态顶空-气相色谱法 1范围 本标准规定了葡萄酒中挥发性酯类的静态顶空-气相色谱法的原理、试剂和材料、仪器和设备、分 析步骤、结果计算和精密度。 本标准适用于葡萄酒中乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸异戊酯和已酸乙酯的测定。 本标准方法的检出限分别为：乙酸乙酯0.2mg/L；乙酸丁酯0.1mg/L；乙酸异戊酯0.4mg/L；已酸 乙酯0.6mg/L。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682一2008分析实验室用水规格和实验方法 3原理 在密闭容器中，易挥发的酯类组分在一定温度下气液两相间达到动态平衡，此时酯类组分在气相中 的浓度和它在液相中的浓度成正比，吸取上部气体进样，经色谱柱分离后，采用氢火焰离子化检测器检 测，内标法定量获得酯类组分的含量 4试剂和材料 除另有说明外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682一2008规定的二级水。 4.1 乙醇：色谱纯。 4.2氯化钠。 4.3 乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸异戊酯、已酸乙酯、叔戊醇标准物质：纯度不应小于99%。 4.42 乙醇溶液（60%，体积分数）：量取60mL乙醇（4.1），用水定容至100mL，混匀。 4.52 乙醇溶液（12%，体积分数）：量取12mL乙醇（4.1），用水定容至100mL，混匀。 定容至100mL，混匀。0℃～4℃低温冰箱密封保存，1个月内使用。 4.7酯混合标准储备液：分别准确称取5.000g乙酸乙酯、0.100g乙酸丁酯、0.100g乙酸异戊酯、0.100g 已酸乙酯于100mL容量瓶中，用乙醇溶液（4.4）定容混匀，配制成的标准储备液于0℃～4℃低温 冰箱保存，1个月内使用。 5仪器和设备 5.1气相色谱仪：配氢火焰离子化检测器。 5.2分析天平：感量为1mg和0.01g。 5.3顶空进样设备。 5.4顶空进样针。 5.5顶空进样瓶：20mL。 QB/T4850-2015 6分析步骤 6.1 参考色谱条件 6.1.1 色谱桩： 聚乙二醇毛细管柱（50m×0.25mm×0.25um）或等效色谱柱 6.1. 2 气相色谱仪升温程序：初温35℃， 保持1min，以3.5℃/min升到120℃后，再以15℃/min 升到200 保持2min C 6.1.3 检测器温度：250℃ 6.1. 4 进样口温度：200℃ 6.1.5 载气流量：1.0mL/min。 6.1.6 进样量：1.0mL 6. 1.7 不分流。 6.2 参考顶空条件 6.2.1 平衡温度：50℃ 6.2.2 平衡时间：30min。 6.2.3振荡频率：500r/min 6.3校正因子（f值）的测定 准确吸取酯混合标准储备液（4.7）0mL0.1QmL、0.20mL0.30mL0.40mL于5个100mL 容量瓶中，用同一葡萄酒样品定容至刻度，混匀。分别吸取上述制备的5个样品各5.00mL，于5个20mL 顶空进样瓶中，加入2.00g氯化钠和0.10mL叔戊醇内标储备液（4.6），压紧瓶盖后混匀。按照参 考色谱条件(6.1）及参考顶空条件（6.2）测定，记录各酯类组分的峰面积（或峰高），按照公式（1） 和公式（2）计算各酯类组分的校正因子f。 ... (1) 式中： A's 加标样品中各酯类组分校正后的峰面积（或峰高） 未加标样品中叔戎醇内标峰面积（或峰高）； Ai 加标样品中的叔戊醇内标峰面积（或峰高）： A2 A3 加标样品中各酯类组分峰面积（或峰高）。 Al (2) A'3-A4C1 式中： f 各酯类组分的校正因子； A1 未加标样品中叔成膜内标峰面积（或峰高）： A'3 加标样品中各酯类组分校正后的峰面积（或峰高）： A4 未加标样品中各酯类组分峰面积（或峰高）： 美品中加入的各酯类组分标准溶液的浓度，单位为毫克每升（mg/L） C2 样品中加入的叔戊醇内标浓度，单位为毫克每升（mg/L）。 6.4样品前处理 准确吸取5.00mL样品于20mL顶空进样瓶中，加入2.00g氯化钠和0.10mL叔戊醇内标储备液 （4.6），压紧瓶盖后，混匀。 2 QB/T48502015 6.5样品测定 在与值测定相同的条件下进样，根据酯 指类标准物质的保留时间，与待测样品中各酯类组分的保留 时间进行定性，定性色谱图参见附录A。 根据各酯类组分和内标峰面积（或峰高），求出峰面积（或峰 高）之比， 采用内标法计算样品中各酯类组分的含量。 结果计算 样品中各酯类组分的含量按公式（3）计算： A5 X=CiX (3) A6 式中： x 样品中各酯类组分的含量，单位为毫克每升（mg/L）； 样品中加入的叔戊醇内标浓度，单位为毫克每升（mg/L）； Ci As 样品中各酯类组分的峰面积（或峰高） A6 样品中叔戊醇内标的峰面积（或峰高） 各酯类组分校正因子的算术平均值。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 精密度 在重复性测定条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过其算术平均值的10%。 QB/T4850-2015 附录A （资料性附录） 4种酯标准物质及葡萄酒样品的色谱图 /pA 50 45 内标 40 - 晟T 35 30 25 + 乙能异虎品 20 - 1s 12.5 17.5 22.5 15 20 25 /ain 图A.1 4种酯标准物质的色谱图 乙龄乙酯 45 内标 40 35 30 25 - TR乙酯 己酸乙酯 乙酸异虎临 20 /nin 图A.2 葡萄酒样品中4种酯的色谱图