ICS 67.180.20 QB 分类号：X69 备案号：43646-2013 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T4614-2013 工业用过氧化氢酶制剂 Catalasepreparations forindustry 2013-12-31发布 2014-07-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T4614-2013 前言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准全国食品工业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口。 本标准起草单位：山东隆大生物工程有限公司、江南大学、湖南鸿鹰祥生物工程有限公司、武汉新 华扬生物股份有限公司、青岛蔚蓝生物集团有限公司、江阴市百圣龙生物工程有限公司、绵阳禾本生物 工程有限公司、中国生物发酵产业协会。 本标准主要起草人：李晓燕、郭庆文、李江华、詹连生、陈亮珍、樊淳红、张晓华、刘捷、杨滔。 1 QB/T4614-2013 工业用过氧化氢酶制剂 1范围 本标准规定了工业用过氧化氢酶制剂的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则、标志、 包装、运输及贮存。 本标准适用于经微生物发酵或动植物提取、提纯制得的工业用过氧化氢酶制剂的生产、检验和销售。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T191包装储运图示标志（GB/T191-2008，ISO780:1997，MOD） GB5009.3-2010食品安全国家标准食品中水分的测定 GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法（ISO3696:1987，MOD） GB/T23527蛋白酶制剂 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 过氧化氢酶catalase 催化H2O2分解为H2O和O2的酶。国际酶学委员会编号为EC1.11.1.6，其催化反应简式如下： 3.2 过氧化氢酶活力 activityofcatalase 一定时间内，催化过氧化氢分解为水和氧的能力。 3.3 酶活力单位 enzymeactivityunit 在pH7.0和30℃（滴定法）或25℃（比色法）下，1min内分解1μmol过氧化氢所需的酶量，即为 1个酶活力单位U。 注：1g固体酶（或1mL液体酶）中含有的酶活力单位即为酶的比活力，以w/g（或u/mL）表示。 4产品分类 产品按形态分为固体剂型和液体剂型。 5要求 5.1感官 5.1.1固体剂型应色泽均匀，呈粉状。 5.1.2液体剂型应为淡黄色至深褐色液体，可有少量凝聚物。 5.2理化性能 应符合表1的规定。 1 QB/T4614-2013 表1理化性能 固体 剂型 液体剂型 项目 酶活力%[u/g或u/mL） 10:000 00 干燥失重/% 8.0 过率）6% 细度（0.4mm标准筛通过 80 “具体规格可按供需 双方合同的 要求执行。 b如有特殊要求，按 安双方合同确 定。 试验方法 6 本标准中所有的试剂和水， 在未注明其他要求时，均指分析纯（AR）和符合GB/T6682一2008规定 的水。本标准中所用的溶液，在未注明任何溶剂配制时，均指水溶液。 6.1感官 取样品约约10g（或10mL） 放入烧杯中， 在白色的自然光下进行目测，做出判断 6.2酶活力 按附录A或附录B规定的方法测定（附录A为仲裁法） 6.3干燥失重 按GB5009.3-2010中第一法进行测定。 6.4细度 按GB/T23527规定的方法测定。 检验规则 7.1批次的确定 以同一次投料生产、 一品种的均一质量的产品为一批 7.2取样规则和样本 7.2.1取样应均午 分布在整个灌装过程中，或均匀分布于灌装后的成品中。 7.2.2取样时风 采用适宜的方法保证取样具有代表性，保证取样部位和取样瓶的清洁。对用于微生物 检验的取样， 使用无菌操作。 7.2.3成品 由样的样本 本量见表2。取样的样本量可以按照估计的批量按表2执行，或由生产企业和（或） 相关方确定 批取样量不应小于500g（或500mL），不足时补至500g（或500mL）。 表2成品抽样的样本量 比量/桶或箱 样本量/（桶或较） ≤50 2 500 注：批量是指批中所包含的单位商品数，单位为桶或箱：样本量是指样本中所包含的样本单位数，单位为桶或袋。 7.3出厂检验 7.3.1每批产品应经企业质检部门检验合格并附合格证后方可出厂。 7.3.2出厂检验项目为：感官、酶活力、干燥失重（固体剂型） 7.4型式检验 7.4.1型式检验项目为本标准规定的全部项目。 2 QB/T4614-2013 下，型式检验每6个月进行1次。有下列情况之一时，亦应进行型式检验： 7.4.2 一般情况 a）原辅材料有较大变化时： b）更改关键工艺或设备时： c）新试制的产品或正常生产的产品停产3个月后，重新恢复生产时： d）出检验与 上次型式检验结果有较大差异时： e）国家质量监督机构按有 关规定需要抽检时 7.5判定规则 抽取样品经检验，所检项目全部合格，则判该批产品为合格品。 7.5.1 感官和理化性能有1项不合格， 重新在该批产品中加倍取样进行复检，以复检结果为准。 7.5. 2 8标志、 包装、运输及购存 8.1标志 8.1.1 产品运输包装标志应符 合GB/T191的要求 产品销售包装上应粘贴 有牢固的 标签，标签上的标志应包括：产品名称、产地、 8.1.2 厂名、厂址、 净含量、酶活力、生产日期、批号、保质期、 贮存条件。 8.2包装 产品的内包装和 （或）包装容器的内涂料应采用符合国家批准的材料 8.3运输 产品运输过程中，运输工具应清洁、无毒、无污染，有防雨防晒设施，搬运装卸小心轻放。严禁与 有毒、有害、有腐蚀性的物质混装混运。 8.4购存 不应与有毒、有害、有腐蚀性的物质同存。 产品应贮存在25℃以下、阴凉 的环道中， QB/T4614-2013 附录A （规范性附录） 过氧化氢酶活力的测定硫代硫酸钠滴定法 A.1原理 过氧化氢酶是催化过氧化氢分解成氧和水的酶，存在于细胞的过氧化物体内。利用Amano改进滴 定分析方法测定在稀硫酸中氧化碘化钾，产生定量的碘，后用硫代硫酸钠滴定，可测出过氧化氢酶的总 量，从而计算出过氧化氢酶的活力。 A.2试剂与溶液 除特殊说明外，所用的试剂均为分析纯，水均为符合GB/T6682一2008中规定的二级水。 A.2.1100g/L碘化钾溶液 称取10g碘化钾溶于80mL水中，搅拌至完全溶解，用水定容至100mL。 A.2.2磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液，pH为7.0 准确称取2.33g无水磷酸二氢钠、9.7g十二水合磷酸氢二钠，用去离子水溶解后定容至1000mL， 用pH计校准至7.0，即成磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液。 A.2.31mol/L硫酸溶液 将30mL浓硫酸溶于800mL水，再用水稀释至1000mL。 A.2.410g/L淀粉指示剂 在约30mL沸水中加入1g溶于少量水的可溶性淀粉，加热沸腾2min3min后，定容至100mL， 24h内使用。 A.2.50.01mol/L硫代硫酸钠溶液 将无水硫代硫酸钠24.9g和无水碳酸钠0.2g溶于水并定容至1L，煮沸10min静置10天后标定， 得0.1mol/L硫代硫酸钠溶液，稀释10倍即得0.01mol/L的硫代硫酸钠溶液，棕色试剂瓶保存。 A.2.6底物溶液 用0.2mol/L磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液（A.2.2）将市售的30%过氧化氢稀释400倍，现配 现用。 A.2.71%钼酸铵溶液 称取1g钼酸铵，溶于80mL水中，搅拌至完全溶解，用水定容至100mL。 A.3仪器与设备 分析天平：精确至0.0002g。 A.3.1 A.3.2pH计：精确至0.01。 A.3.3 恒温水浴锅：温度控制范围在（30士0.2）℃之间。 A.3.4 秒表：误差不超过5s/h。 A. 3.5 磁力搅拌器。 A. 3. 6 碱式滴定管。 A.4测定方法 A. 4.1 固体酶液的制备 4 QB/T4614-2013 称取试样两份，精确至0.0002g，加入80mL磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液（A.2.2）溶解，磁 力搅拌30min，定容至100mL，取上清液，再用磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液（A.2.2）做二次稀 释（稀释后的待测酶液中过氧化氢酶活力应控制在8u/mL～12/mL）。 A.4.2液体酶液的制备 液体试样可直接用磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液（A.2.2）稀释、定容（稀释后的酶液中过氧化 氢酶活力应控制在8u/mL~12/mL）。 A.5测定步骤 在100mL的三角瓶中加入5.0mL底物溶液（A.2.6），置于30℃恒温水浴锅保温平衡5min，加 入1.0mL稀释好的待测酶液，立即计时，摇匀，反应5min。加入2.0mL硫酸溶液（A.2.3），摇匀， 终止反应。再加入1.0mL碘化钾溶液（A.2.1），1滴钼酸铵溶液（A.2.7）和2滴～3滴淀粉指示剂（A.2.4）， 用硫代硫酸钠溶液（A.2.5）滴定游离碘，所消耗体积毫升数记为V1。 另做空白对照，在100mL的三角瓶中加入5.0mL底物溶液（A.2.6），置于30℃恒温水浴锅保温 平衡5min，加入2.0mL硫酸溶液（A.2.3），立即计时，摇匀，反应5min，加入1.0mL稀释好的待测 酶液，再加入1.0mL碘化钾溶液（A.2.1），1滴钼酸铵溶液（A.2.7）和2滴～3滴淀粉指示剂（A.2.4）， 用硫代硫酸钠溶液（A.2.5）滴定游离碘，所