QB ICS 67.080.10 分类号：X50 备案号：51147-2015 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T4855-2015 果汁中水的稳定氧同位素比值（180/1%0） 测定方法同位素平衡交换法 Determination of the oxygen isotope ratio (18o/°0) of water in fruit juices -Method using isotopic eguilibrium exchange reaction 2015-07-14发布 2016-01-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T4855-2015 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国食品发酵标准化中心归口。 本标准起草单位：中国食品发酵工业研究院、农夫山泉股份有限公司、康师傅中央研究所。 本标准主要起草人：钟其顶、徐胜、章鹏、王道兵。 本标准为首次制定。 QB/T48552015 果汁中水的稳定氧同位素比值（180/10）测定方法 同位素平衡交换法 1范围 本标准规定了果汁（浓缩果汁除外）中水的稳定氧同位素比值（180/10）的测定方法。 本标准适用于果汁及果汁饮料中水的稳定氧同位素比值（180/1%）的测定，不适用于浓缩果汁中 的稳定氧同位素比值（180/l%0）测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性 与再现性的基本方法 3符号和缩略语 下列符号和缩略语适用于本文件。 180/160：稳定氧同位素比值，是稳定氧同位素180与10的原子丰度之比。 al8O：样品的稳定氧同位素比值相对于参考物质的稳定氧同位素比值的千分差。 VSMOW：维也纳-标准平均海洋水（ViennaStandardMeanOceanWater），是稳定氧同位素比值的 国际基准物质。 SLAP：标准南极轻降水（StandardLightAntarctic Precipitation），其sl8OvsMow=-55.50%o，是与 VSMOW共同构建稳定氧同位素比值测定尺度的参考物质。 IRMS：稳定同位素比值质谱仪（IsotopeRatioMassSpectrometry）。 4原理 Cl602 + H2180 C1%0180 + H21%0 果汁中的水和二氧化碳进行上述反应，待反应达到平衡状态后，用IRMS测定平衡后二氧化碳中的 稳定氧同位素比值，再通过公式计算得出样品的水中sl80。 5 在线平衡交换联用稳定同位素比值质谱法（第1法） 5.1试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯。 5.1.1参考物质：可选择国际原子能机构或全国标准物质管理委员会认可的，或其他获得认可的同类 参考物质，参见附录A。 5.1.2电解铜丝。 5.1.3炭黑。 5.1.4无水乙醇。 5.1.5 氢气（He）：纯度不应小于99.999%。 5.1. 6 二氧化碳气体（CO2）：纯度不应小于99.99%。 5. 1.7 二氧化碳-氨气混合气：二氧化碳体积分数为0.3%。 1 QB/T48552015 5.21 仪器和设备 5.2.1IRMS：分析内精度优于0.05%o，配套连续流进样接口。 5.2.2全自动水-二氧化碳平衡装置：配套全自动进样器和进样针。 5.2.3微量移液枪：1000μL。 5.2.4硼硅玻璃样品瓶：12ml/ 5.2.5电子天平：感量0.01mg。 5.3分析步骤 5.3.1试样的制备 分别吸取450μL参考物质（5.1.1）和450μL样品置于相互独立的硼硅玻璃样品瓶（5.2.4）中，再 分别加入50uL无水乙醇、0.1mg~0.2mg电解铜丝和1.0mg~1.5mg炭黑：拧紧瓶盖后向瓶中充入二 氧化碳-氢气混合气（5.1.7），充气时间保持5min以置换瓶中空气；将硼硅玻璃样品瓶置于全自动水- 二氧化碳平衡装置（5.2.2）中进行氧同位素平衡交换反应时间应为24h～50h，得到平衡后的二氧化 碳气体，待测。 5.3.2测定 5.3.2.1将IRMS调整到正常工作状态，利用全自动水二氧化碳平衡装置（5.22）将53.1中由参考 物质参与反应制备的二氧化碳气体导入IRMS中测定，连续进行8次～10次测定，取后6次的算术平 均值为测定结果[(10/O)RM]。 氧化碳气体导 入IRMS中测定，连续进行8次～10次测定，取后6次的算术平均值为测定结果[(18o/)sA]。 5.4计算 5.4.1分析结果的表述 样品的s180以其对参考物质中相应回位素比值的于分差（记为%o）表示，按照公式（1计算： 810- ... (1) 180/1:0RM 式中： (180/160)sA 群品中水的180/1%0测定值： ("0/0) 参考物质的180/1%测定值。 结果保留两位小数。 5.4.2结果计算 样品中水的OvsMOW/SLAp按照公式（2）计算： X55.5% (2) OW/SLAP 式中： SI8OvSMOW/SLAR s180 sl8OvsMOW 18OsLAP SLAP的18O/l%0测定值相对于参考物质的18O/%O测定值的千分差。 结果保留至小数点后两位。 2 QB/T4855-2015 5.5精密度 按GB/T6379.2的规定进行确定，重复性和再现性的值以95%的可信度计算 5.5.1重复/性限 在重复/性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不应超过重复性限（r）：=0.24%0。如果 差值超过重复性限（），应舍奔试验结果并重新完成两次单个试验的测定。 5.5.2再规性限 在再现性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限（R）：R=0.50%0 6离线平衡联用气相色谱-稳定同位素比值质谱法（第2法） 6.1试剂和材料 同5.1 6.2仪器和设备 6.2.1 气相色谱仪 6.2.2IRMS：分析内精度优于0.05%o配套连续流进样接口 6.2.3 气密进样针：10mL 6.2.4顶空进样瓶：20mL 6.2.5毛细管柱：柱长25m55m，内径0.2mm~0.5mm 6.2.6恒温振荡水浴锅：土0.5℃。 6. 2.7 不锈钢或玻璃导气系统：导气系统由减压阀、不锈钢管（Φ3.175mm）或玻璃管（Φ6mm） 进气歧管、硅胶管和不锈钢毛细管（Φ0.5mm）构成，参见附录B。 6.3分析步骤 6.3.1试样的制备 分别吸取3.0mL5.0mL样品和3.0mL~5.0mL参考物质（51.1）置于相互独立的顶空进样瓶 （6.2.4）中，再分别加入0.6mg~1.2mg电解铜丝和6.0mg~12mg炭黑，拧紧瓶盖后用不锈钢或玻璃 导气系统（6.2.7）向顶空进样瓶中充入 氧化碳气体（5.1.6）置换其中的空气，充气过程保持10min。 将顶空进样瓶置 250~ 30℃恒温振荡水浴锅（6.2.6）中并保持温度恒定，使瓶内样品中水与二氧 化碳进行氧同位素交换：反应时间应为8h～24h，得到平衡后的一氧化碳气体，待测。 6.3.2参考测定条件 设定气 相色谱仪的参数：进样日100℃，柱温100℃，流量12mL/min，分流比301。 6.3.3 测定 6.3.3.1 将IRMS 调整到正常工作状态，利用气密进样针（6.2.3）取46.3.1中由参考物质参与反 应制备的 氧化碳 气体导入IRMS中测定，连续进行8次～10次测定，取后6次的算术平均值为测定 结果[(% ORMI 6.3. 3. 2 将IRMS调整到正常工作状态，利用气密进样针（6.2.3）取4μL6.3.1中由样品参与反应制 备的二氧化 体导入IRMS中测定，连续进行8次～10次测定，取后6次的算术平均值为测定结果 [VS(Og//Og])] 6.4计算 同5.4。 6.5精密度 同5.5。 3 QB/T4855-2015 附 录 （资料性附录） 参考物质示例 表A.1 参考物质 名称 918OvsMOw/%o 机构 VSMOW 维也纳-标准平均海洋水 0 国际原子能机构 SLAP 标准南极轻降水 -55.50 GBW04401 氢氧同位素标准水样 0.32±0.19 GBW04402 氢氧同位素标准水样 -8.79 ± 0.14 全国标准物质管理委员会 GBW04403 氢氧同位素标准水样 -24.52±0.2 GBW04404 氢氧同位素标准水样 55.16±0.24 QB/T48552015 附录B （资料性附录） 不锈钢或玻璃导气系统 说明： 二氧化碳钢瓶； 1 2- 减压阀； 3- Φ3.175mm不锈钢管或Φ6mm玻璃管； 4 进气歧管： 5 硅胶管； Φ0.5mm不锈钢毛细管。 6 图B.1 导气系统示意图 说明： @0.5mm不锈钢毛细管； 20mL顶空进样瓶。 图B.2向上排气法示意图 5