SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0526—20 15 代替SN0526-1996 出口食品中增效醚残留量的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of piperonyl butoxide residues in foodstuffs for export- LC-MS/MS method 2015-09-02发布 2016-04-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T0526--2015 前言 本标准代替SN0526一1996出口粮谷中增效醚残留量检验方法。 本标准与SN0526-1996相比主要修改如下： 修改了标准名称。 删除了“抽样”部分。 修改了样品的前处理方法。 修改了仪器测定方法。 一增加了方法适用范围。 一修改了标准结构。 降低了方法测定低限。 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国河南出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：杨冀州、祝伟霞、袁萍、刘亚风、孙转莲、魏蔚、王彩娟。 I SN/T0526—2015 出口食品中增效醚残留量的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了食品中增效醚残留量的制样方法与液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于猪肉、鸡肝、牛肾、牛脂肪、鸡蛋、牛奶、柑桔、大豆、花生、大蒜、马铃薯、菠菜、芹菜、小 麦、大米、大麦、芝麻等食品中增效醚残留量的液相色谱-质谱/质谱的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本文件的引用而成为本文件的条款。凡是注日期的引用文件，仅注日期的 版本适用于本文件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 食品中增效醚残留用三氯甲烷提取，经氟罗里硅土柱净化，丙酮-三氯甲烷混合溶液洗脱，液相色 谱-质谱质谱测定，外标法定量。 4试剂和材料 除特别规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 乙腈：HPLC级。 4.2 甲酸：HPLC级，≥96%。 4.3 三氯甲烷。 4.4 正已烷。 4.5 5丙酮。 4.6 氯化钠。 4.7 无水硫酸钠：使用前于650℃灼烧4h，贮存干燥器中备用。 4.8 石墨化碳。 4.9 丙酮十三氯甲烷（1十2，体积比）。 4.10 0.1%甲酸溶液：量取1mL甲酸用水定容至1000mL。 4.11 乙腈十0.1%甲酸溶液（80十20，体积比）。 4.12 标准品：增效醚（piperonylbutoxide，CAS号51-03-6），纯度>94%。 4.13 3标准储备溶液：准确称取增效醚标准品10mg（4.12），用三氯甲烷溶解并定容至100mL，浓度相 当于100μg/mL，储备液贮存于一18℃以下，有效期为3个月。 4.14标准中间溶液：准确量取1mL标准贮备溶液（4.13），氮吹至干后用乙腈溶解并定容至100mL， 该溶液浓度为1μg/mL，贮存于2℃～4℃，有效期为1个月。 1 SN/T0526—2015 4.15基质标准工作溶液：根据需要按本方法所述前处理步骤，制得空白样品提取液，用该样品提取液 将标准中间溶液（4.14)稀释至适当浓度，该溶液使用前配制。 4.16氟罗里硅土柱（florisil，1g/3mL)或相当者。 4.17 有机相滤膜：0.22μm。 5仪器和设备 5.1 液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2 分析天平：感量0.1mg、0.01g。 超声提取仪。 5.3 5.4 涡旋混匀器。 5.5 离心机：4000r/min。 5.6 固相萃取装置。 5.7 氮吹仪。 5.8 组织捣碎机。 5.9 粉碎机。 试样的制备与保存 6.1猪肉、鸡肝和牛肾 从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约500g，用组织捣碎机充分捣碎均匀，装入洁净容 器中，密封，并标明标记，于18℃以下冷冻存放。 6.2牛脂肪 从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，于50℃~ 60℃水浴中，使样品完全融化，充分混 匀，装入洁净容器中，密封，并标明标记，于一18℃以下冷冻存放。 6.3牛奶 从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，充分混勾。装人洁净容器中，密封，并标明标记，于 一18℃以下冷冻保存。 6.4鸡蛋 从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，去壳后混匀，装人洁净容器中，密封，并标明标记，于 一18℃以下冷冻存放。 6.5柑桔、大蒜、马铃薯、菠菜和芹菜 从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，用组织捣碎机将样品加工成浆状，装人洁净容器中， 密封，并标明标记，于18℃以下冷冻保存。 6.6大豆、花生、小麦、大米、大麦和芝麻 从所取全部样品取出有代表性样品500g，用粉碎机粉碎并通过20*目圆孔筛，混匀，装人洁净容器 中，密封，并标明标记，于2℃～4℃冷藏存放。 在制样过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 2 SN/T0526—2015 7测定步骤 7.1提取 7.1.1猪肉、鸡肝、牛肾、鸡蛋和牛奶 准确称取1.0g均匀试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加人1g无水硫酸钠（4.7）、0.5g氯化 钠，混合均匀后，加人12.5mL三氯甲烷，涡旋混匀3min，超声提取10min，4000r/min离心5min，转 移上清液至另一具刻度试管。再加人12.5mL三氯甲烷，重复涡旋混匀、超声、离心步骤，合并上清液， 并定容至25mL。 7.1.2牛脂肪 准确称取1.0g均匀试样（精确至0.01g）手50mL离心管中，将样品置于50℃~60℃水浴中加 热，待样品完全融化后取出，加入0.5g氯化钠，并用之氯甲烷溶解至25mL，涡旋混勾3min，超声提取 10min，4000r/min离心5min，转移上清液至另一试管。 7.1.3柑桔、大蒜、马铃薯、菠菜和芹菜 准确称取1.0g均匀试样（精确至0.01g）于50mL离心管中加人1g无水硫酸钠（4.7）、0.5g氯化 钠、0.1g石墨化碳、12.5mL三氯甲烷，涡旋混匀3min，超声提取10min,4000r/min离心5min，转移 上清液至另一具刻度试管。再加人12.5mL三氯甲烷，重复涡旋混匀、超声、离心步骤，合并上清液，并 定容至25mL。 7.1.4大豆、花生、小麦、大米、大麦和芝麻 准确称取1.0g均匀试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加人0.5g氯化钠、12.5mL三氯甲 烷，涡旋混匀3min，超声提取10min，4000/min离心5min，转移上清液至另一具刻度试管。再加人 12.5mL三氯甲烷，重复涡旋混匀、超声、离心步骤合并上清液，并定容至25mL。 7.2净化 7.2.1牛脂肪 加人3mL三氯甲烷活化氟罗里硅土柱（4.16），取5mL样液以小于1mL/min的流速通过柱体， 待样液全部流过后，加人5mL正已烷、5mL三氯甲烷淋洗抽平柱体后，用6mL丙酮十三氯甲烷 （4.9)洗脱固相萃取柱，收集洗脱液于50℃水浴中氮吹浓缩至干，加人1mL乙睛十0.1%甲酸溶液 （4.11）溶解残渣，过0.22μm滤膜，待测定。 7.2.2其他食品（除牛脂肪外） 加人3mL三氯甲烷活化氟罗里硅土柱（4.16），将5mL上清液样液以小于1mL/min的流速通过 柱体，待样液全部流过后，加人5mL三氯甲烷淋洗，抽干柱体后，用6mL丙酮十三氯甲烷（4.9）洗脱固 相萃取柱，收集洗脱液于50℃水浴中氮吹浓缩至干，加人1mL乙十0.1%甲酸（4.11溶解残渣，过 0.22μm滤膜，待测定。 7.3测定 7.3.1 液相色谱参考条件 液相色谱参考条件如下： 3