ICS 65.160 YC CCS X 87 中华人民共和国烟草行业标准 YC/T 468—2021 代替YC/T468—2013 烟草及烟草制品 总植物碱的测定 连续流动（硫氰酸钾）法 Tobacco and tobacco productsDetermination of total alkaloids- Continuous flow (potassium thiocyanate) method (ISO 22980 :2020,Tobacco—Determination of the content of total alkaloids as nicotine-Continuous-flow analysis method using KSCN/DCIC,MOD) 2021-12-03发布 2022-03-01实施 国家烟草专卖局 发布 YC/T468—2021 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替YC/T468一2013《烟草及烟草制品 总植物碱的测定 连续流动（硫氰酸钟）法》，与 YC/T468一2013相比，除编辑性修改外，主要技术变化如下： 增加了5%乙酸溶液（见5.3）； 一增加了系统冲洗液（见5.4）； 修改了缓冲溶液A（见5.7，2013年版的4.10）； 修改了缓冲溶液B（见5.8，2013年版的4.11）； 修改了总植物碱的连续流动分析仪流程图（见附录A）； 增加了重复性和再现性（见附录B）。 本文件使用重新起草法修改采用ISO22980：2020《烟草总植物碱含量（以烟碱计）的测定 连续流 动KSCN/DCIC法》。 本文件与ISO22980：2020相比，在结构上有较多调整，两个文件之间的章条编号变化对照一览表 见附录C。 本文件与ISO22980：2020相比，存在技术性差异，在所涉及的条款的外侧页边空白位置用垂直单 线（I)进行了标示，这些技术差异及其原因的一览表见附录D。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由国家烟草专卖局提出。 本文件由全国烟草标准化技术委员会卷烟分技术委员会（SAC/TC144/SC1)归口。 本文件起草单位：国家烟草质量监督检验中心、上海烟草集团北京卷烟厂有限公司、中国烟草标准 化研究中心、江苏中烟工业有限责任公司、郑州烟草研究院、云南中烟工业有限责任公司、贵州中烟工业 有限责任公司、西北烟草质量监督检测站、山东中烟工业有限责任公司、河南省烟草质量监督检测站、云 南中烟再造烟叶有限责任公司、云南省烟草质量监督检测站、四川省烟草质量监督检测站。 本文件主要起草人：张威、刘楠、马雁军、周骏、何声宝、丁丽、冯晓民、徐如彦、罗安娜、王英元、杜国荣、 彭黔荣、彭丽娟、龚珍林、成涛、张海燕、陈志浩、马莉、刘剑、刘恩芬、李苓、王菲、刘巍、王错、郭军伟、 石红雁、张杰、王春琼、秦云华、张春晖、廖惠云、王洪波、韶济民。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为： YC/T468—2013; 一本次为第一次修订。 YC/T 468—2021 烟草及烟草制品总植物碱的测定 连续流动（硫氰酸钾）法 1范围 本文件规定了烟草及烟草制品（烟叶、烟梗、再造烟叶和烟草混合物）中总植物碱（以烟碱计）的连续 流动（硫氰酸钾）测定方法。 本文件适用于烟草及烟草制品（烟叶、烟梗、再造烟叶和烟草混合物）中总植物碱（以烟碱计）的 测定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 本文件。 GB/T 6682 2分析实验室用水规格和试验方法 YC/T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法 YC/T247烟草及烟草制品烟碱纯度的测定硅钨酸重量法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 用水萃取烟草样品，萃取液中的总植物碱（以烟碱计)与对氨基苯磺酸和氯化氰反应，氯化氰由硫氰 酸钾和二氯异氰尿酸钠在线反应产生。反应产物用比色计在460nm测定 注：用5%乙酸溶液作为萃取液亦可得到相同的结果。如果要同时进行总植物碱（以烟碱计）和还原糖（参见 YC/T159一2019)的测定，则应使用5%的乙酸提取物 5试剂 除非另有说明，在分析中仅使用分析纯及以上的试剂，以及符合GB/T6682规定的一级水。 5.1标准物质 烟碱或二水二酒石酸烟碱[C1H14N²（C4HO。）2·2HO]，按YC/T247检查烟碱或二水二酒石酸 烟碱的纯度。 5.2聚乙氧基月桂醚溶液（Brij35溶液） 将250g聚乙氧基月桂醚[（C2H,O)，C12H2O]加人到1000mL水中，加热搅拌直至溶解。 YC/T468—2021 5.35%乙酸溶液 量取50mL冰乙酸，用水稀释至1000mL，用于样品萃取或工作标准溶液的配制，有效期为1周。 5.4系统冲洗液 液（5.3)或水稀释至1000mL。该溶液用于连续流动分析仪管路冲洗，有效期为1周。 5.5硫氰酸钾溶液 称取2.88g硫氰酸钾（KSCN)至烧杯中，用水溶解，然后转人250mL容量瓶中，用水定容至刻度。 5.6二氯异氰尿酸钠溶液 称取2.20g二氯异氰尿酸钠（CClzNsNaO）至烧杯中，用水溶解，然后转人250mL容量瓶中，用 水定容至刻度。该溶液应现配现用。 5.7缓冲溶液A 分别称取71.6g磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）、11.76g柠檬酸钠（CH,Na:O，·2HzO)至烧杯 5.8缓冲溶液B 分别称取71.6g磷酸氢二钠（Na2HPO·12H2O）、6.2g磷酸二氢钠（NaH2PO4·2HzO）、11.76g 柠檬酸钠（CH,Na:O，·2H,O）、7.0g对氨基苯磺酸（NH,C.H,SO3H)至烧杯中，用水溶解，然后转入 1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，加人1mLBrij35溶液（5.2），混匀。 5.9解毒溶液A 分别称取1g柠檬酸(C.HO，·HzO)、10g硫酸亚铁（FeSO4·7H.O)至烧杯中，用水溶解，然后 转入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。 5.10解毒溶液B 称取10g碳酸钠（Na2CO3）至烧杯中，用水溶解，然后转入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。 5.11标准储备液 称取适量标准物质（5.1）于250mL容量瓶中，精确至0.0001g，用水溶解，定容至刻度。此溶液烟 碱含量应在2.5mg/mL左右。标准储备液应贮存于0℃～4℃冰箱中，使用前溶液温度应恢复至室 温。标准储备液有效期为1个月。 5.12系列工作标准溶液 预计检测到的样品含量。该标准工作溶液在0℃～4℃冰箱中保存，使用前应恢复至室温。工作标准 溶液有效期为2周。 6仪器及材料 6.1连续流动分析仪，由下述各部分组成： 2 YC/T468—2021 取样器； 一比例泵； 渗析器； 加热槽； 一螺旋管； 比色计，配460nm滤光片； 一 数据处理装置。 连续流动分析仪流程图参见附录A。 6.2天平，感量0.0001g。 6.3振荡器。 6.4定量加液器或移液管。 6.5 具塞三角瓶，50mL。 6.6 快速定性滤纸。 7 分析步骤 7.1 试样制备 按YC/T31制备试样，并测定其水分含量。 7.2样品处理 称取0.25g试样置于50mL具塞三角瓶（6.5）中，精确至0.0001g，加入25mL萃取溶液（水或 5%乙酸溶液），盖上塞子，在振荡器（6.3）上振荡（转速约150r/min）萃取30min。用快速定性滤纸 （6.6)过滤萃取液，弃去前面2mL～3mL滤液，收集后续滤液作连续流动分析仪分析用。 7.3仪器分析 上机运行系列标准工作溶液（5.12）和样品处理后续滤液（7.2）。如样品浓度超出标准工作溶液浓 度范围，则应稀释后再测定。洗针液应与萃取液一致。 8 结果计算与表述 8.1 结果计算 试样中以干基计的总植物碱含量α以烟碱计，数值以质量百分数（%)表示，按式（1)计算： nXcXV X 100 ·( 1 ) m×(1-W)×1000 式中： 77 稀释倍数； 萃取液总植物碱的仪器观测值，单位为毫克每毫升（mg/mL）； C V 萃取液的体积，单位为毫升（mL）； 试样的质量，单位为克（g）； m W 试样水分含量，以质量分数计。 8.2 结果表述 以两次平行测定结果的平均值作为测定结果，结果精确至0.01%。