行业文档 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2573---2010 进出口蜂王浆中杀虫咪及其 代谢产物残留量检测方法 气相色谱一质谱法 Determination of chlordimeforur and its metabolites residues in royal jely for jmport amd export-GC-Ms 2010-12-01实施 2010~05~27发布 中华人民共和国 发布 国家质量监检验检疫总局 数码防伪 SN/T 2573--2010 前 言 本标准按照GB/T1.1---2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：丁慧瑛、谢文、陈笑梅、蒋晓英、周召千。 SN/T2573--2010 进出口蜂主聚中杀虫胖及其 代谢产物残留量检测方法 气相色谱-质谱法 1范围 本标准规定了蜂王浆中杀虫胀及其代谢产物残留量的气相色谱-质谱测定及确证方法。 本标准适用于蜂王浆中杀虫滕及其代谢产物残留量的测定和确证。 方法提要 2 样品用三氟乙酸溶液沉淀蛋白质，在碱性条件下用正已烷-内酮（1十1，体积比）混合溶剂提取，提取 液经正已烷-乙睛液液分配净化后，气相色谱-质谱测定和确证，外标法定量。 3试剂和材料 除另有说明外，所用的试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 3. 1 乙睛：色谱纯。 3.2 丙酮：色谱纯。 3. 3 正已烷：色谱纯。 3.4 三氟乙酸。 3. 5 氢氧化钠。 3.6 氯化钠：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，储于密封瓶中备用。 3.7 正已烷-丙酮(1十1，体积比)混合溶剂。 3.8 三氯乙酸溶液，5%：称取5g三氯乙酸，加水溶解并定容至100mL。 3.9 氢氧化钠溶液，2mol/L：称取8g氢氧化钠溶入100mL蒸馏水中。 3. 10 杀虫滕（Chlordimeform，ClHisCIN.，CA.SNo.6164-98-3。相对分子质量为196.68)标准物质：纯 度大于98.5%。 3.11 4-氯邻甲基苯胺（4-Chloro-2-methylanilinc，CHgCIN，CASNo.95-69-2，相对分子质量为 141.60)标准物质：纯度大于98.5%。 标准溶液：准确称取适量的杀虫滕和4-氯邻甲基苯胺标准物质，用丙酮配成浓度为100g/ml 3.12 的单-标准储备液。根据需要用丙酮稀释混合至适当浓度的混合标准工作液。 4 仪器和设备 4.1 气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI）。 4.2. 旋涡混合器。 4.3 离心机：转速大于10000r/min。 4.4 旋转蒸发器。 SN/T2573---2010 5 试样制备和保存 5.1 试样制备 取代表性样品约500g。将其用力搅拌均51。装人洁净容器内，密封，并标明标记。 5.2 试样保存 于--18℃以下保存。在制样过程中.应防止烊品受到污染或发生所测物残留量的变化。 6 测定步骤 6.1提取 称取2g试样（精确到0.01g）于50mL离心管中，加10ml.三氯乙酸溶液（3.8)涡旋混匀1min， 以8000r/min离心3min。将上层水相转移另--·50mL离心管中，加4mL左右的氢氧化钠溶液 （3.9)调pH大于12。加人5g氯化钠和20mL正已烷-丙酮（1+1。体积比）混合溶剂，涡旋混匀1min， 将上层有机相转移人浓缩瓶中。水相中再加人20mL正已烷-丙酮（1十1，体积比）混合溶剂，重复提取 -次，合并上层有机相，在45℃以下水浴减压浓缩至近十，待净化。 6.2净化 浓缩瓶中残留物用10mL乙晴溶解洗涤二次.转移到50mL离心管中，加入10mL正已烷。涡旋 混匀1min，以3000r/min离心3min.将上层正己烷相转移到另-50mL离心管中，乙睛相再加人 10mL正已烷，重复操作-次：合并正烷相、入10ml.乙睛，涡旋混匀1min，以3000r/min离心 3min，弃去上层正已烷相。合并乙腈相。在45以下水浴减压浓缩至近干，用丙酮溶解并定容至 1.0mL，用气相色谱-质谱测定，外标法定量 6.3测定 6.3.1 气相色谱-质谱条件 a) 色谱柱：DB-5ms石英毛细管柱.30nX0.25mm（内径）×0.25μm，或相当者； b) 色谱柱温度：50℃保持2min.以10（min的升温速率升至160℃，保持1min，以30℃/min 的升温速率升至320℃，保持5min1 c) 进样口温度：250℃； d) 载气：氨气，纯度大于等于99.999%.流速.1.0mL/min； e) 进样量：2uL； f) 进样方式：脉冲不分流进样.脉冲压力172.375kPa（25psi），0.75min后开阀； g) 溶剂延迟时间：10min； h) 离子源：电子轰击源（EI）； i) 接口温度：280℃； j) 电离能量：70eV； k) 离子源温度：280℃； 1) 测定方式：选择离子监测方： m) 选择离子及相对丰度：见表1 2 食品伙伴网htti et SN/T2573---2010 表1 杀虫胖和4-氯邻甲苯胺的定离子、定性离子及相对丰度 定性离子1 定性离子2 定量离子 农药名称 181(85.4) 152(54,1) 杀虫滕 196(100) 143(34.1) 141(100) 77(25.8) 4-氯邻甲苯胺 6.3.2定量 根据样液中杀虫胖和4-氯邻甲苯胺含量的情况，选定与样液中杀虫滕和4-氯邻甲苯胺浓度相近的 标准工作溶液。标准工作溶液和样液中杀虫滕和4-氯邻甲苯胺响应值应在仪器测定的线性范围内。 标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定。在1述色谱条件下，杀虫和4-氯邻甲苯胺的保留时间分 别约为15.0min、12.0min，标准品的总离子流色谱图参见附录A中图A.1。 6.3.3确证 对标准溶液及样液均按6.3.1规定的条件进行测定，如果样液与标准溶液在相同的保留时间有峰 出现。则对其进行质谱确证，在扣除背景后的样品谱图中，所选择离子全部出现，同时所选择的离子的离 子丰度比与标准品相关离子的相对丰度-一致，波动范围符合表2的最大容许偏差之内（见表2），可判定 样品中存在杀虫滕和4-氯邻甲苯胺。被确证的样晶可判定为杀虫滕和4-氯邻甲苯胺阳性检出。杀虫 滕和4-氯邻甲苯胺标准品的质谱图参见附录A中图A.2、图A.3。 表2 质谱相对离丰度最大容许偏差 >50 >20~50 >10~20 N10 相对离子丰度（基峰）/% :1: 15 ±:20 ±50 容许的相对误差/% 10 6.3.4 空白试验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。 6.4 结果计算 AXcXV (1) A,Xm 式中： X 试样中杀虫滕或4-氯邻甲苯胺残留量，单位为毫克每于克（mg/kg）； A 样液中杀虫滕或4-氯邻甲苯胺的峰面积 标准工作液中杀虫滕或4-氯邻甲苯胺的浓度。单位为微克每毫升（ug/mL）； c V 最终样液定容体积，单位为毫升（nl.）： A, 标准工作液中杀虫滕或4-氯邻甲苯胺峰面积； 最终样液所代表的试样量，单位为克（g）。 m 3 食品伙伴网http： SN/T 2573---2010 方法测定低限和回收率 7 7. 1 测定低限 本方法对杀虫和4-氯邻甲苯胺的测定低限为：0.01mg/kg。 7. 2 回收率 样品的添加浓度及回收率的实验数据见表3。 表3 样品的添加浓度及回收率的实验数据 农药名称 添加浓度/（mg/kg） 回收率/% 0. 01 86.7~112 杀虫滕 0. 02 91.0~112 0. 05 81.2~107 0. 01 82.1~118 4-氯邻甲苯胺 0. 02 85.5~107 0. 05 79.4~102 1 IFK, 1B 食品伙伴网httn：