SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T0801.15—2012 代替SN/T0801.15-1999 出口动植物油脂检验方法 第15部分：不皂化物 Determination of animal and vegetable oils and fats for export-- Part 15:Unsaponifiable matter 2012-05-07发布 2012-11-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0801.15-2012 前言 第1部分：不溶性杂质； 第2部分：含磷量检测方法； -第3部分：过氧化值检验方法； -第4部分：华司脱加热试验； 第5部分：熔点检验方法； 第6部分：豆油中沉积物的检验方法； 一第7部分：不溶漠化物试验； -第8部分：密度检验方法； 第9部分：透明度、气味、滋味检验方法； 第10部分：浊点检验方法； 第11部分：油脚检验方法； -第12部分：闪点限值试验宾斯基-马丁闭口杯法； 第13部分：干燥时间检验方法； 第14部分：色泽检测方法； 第15部分：不皂化物； -第16部分：磷酸试验值检验方法； 一第17部分：脂肪酸凝固点测定方法； -第18部分：水分及挥发物检测方法； -第19部分：游离脂肪酸和酸价检验方法； 一第20部分：羟值检验方法； 一第21部分：叶绿素检验方法； 第22部分：聚乙烯类聚合物检验方法； 第23部分：溶剂残留量检验方法； -第24部分：水分的测定卡尔·费休法。 本部分为SN/T0801的第15部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分代替SN/T0801.15一1999《进出口动植物油脂不皂化物检验方法》。 本部分与SN/T0801.15--1999相比，主要技术变化如下： 增加了石油醚提取法的详细操作步骤； 一溶剂蒸发过程要求在氮吹下进行； 恒重过程采用真空烘箱； -增加了精密度数据。 本部分参考了美国油脂化学家协会（AOCS)方法AOCSCa6a-40(09)《商业油脂取样和分析不 皂化物石油醚提取法》和AOCSCb6b-53(09)《商业油脂取样和分析不皂化物 乙醚提取法》。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 I SN/T 0801.152012 本部分起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局。 本部分主要起草人：杨勇、张继东、张琳、陈蕴之 本部分所替代标准的历次版本发布情况为： ZBX04017-1986.SN/T0801.15—1999。 SN/T0801.15-2012 出口动植物油脂检验方法 第15部分：不皂化物 1范围 SN/T0801的本部分规定了出口动植物油脂不皂化物的两种测定方法：乙醚提取法和石油醚提 取法。 本部分中乙醚提取法适用于不皂化物含量比普通动物油脂高的油脂，尤其适用于海洋动物油，也适 用于植物油脱臭蒸馏物及残渣的测定。 石油醚提取法适用于常见动植物油脂，不适用于不皂化物含量 很高的油脂，例如海洋动物油。两种方法均不适用于饲料级脂肪不皂化物的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T5535.1动植物油脂不皂化物测定第1部分：乙醚提取法 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SN/T0800.1进出口粮油、饲料检验一抽样和制样分法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 不皂化物unsaponifiablematte 动植物油脂中不能皂化的但溶于常用油脂溶剂的物质，包括高级脂肪醇、固醇、色素以及多碳烷烃。 4方法提要 在回流条件下使用氢氧化钾溶液对油脂进行皂化，然后用乙醚或石油醚萃取皂化液中的不皂化物， 蒸发溶剂并对残留物干燥后称量。 5试剂 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂。纯水应使用符合GB/T6682二级水要求的 蒸馏水、去离子水或者相当纯度的水。 5.195%乙醇。 5.2乙醚。 5.3丙酮。 5.4石油醚：馏程为30℃～60℃。 1 SN/T0801.15—2012 5.550%的氢氧化钾溶液：60g氢氧化钾溶于40mL水中，冷却至室温。 5.6氢氧化钾溶液（0.5mol/L)：30g氢氧化钾溶于水中，冷却至室温，稀释至1L。 5.7乙醇溶液(1十9)。 5.8氢氧化钠标准滴定溶液：c(NaOH)=0.02mol/L，根据GB/T601配制并标定0.1mol/L氢氧化 钠标准溶液，用水稀释至0.02mol/L。 5.9酚酞指示剂：质量分数1.0%的酚乙醇溶液。 6 仪器 6.1磨口锥形瓶：250mL。 6.2与6.1配套的带磨口的回流冷凝管或空气冷凝管。 6.3分液漏斗：250mL和500mL，聚四氟乙烯旋塞和项塞。 6.4 烧杯：250mL。 6.5恒温水浴：可保持水浴微沸。 6.6真 真空烘箱：可控温75℃～80℃，烘箱内压力可控制在不超过26.6kPa(200mmHg）。 6.7天平：感量0.1mg。 6.8 滴定管：10mL，最小分度0.05mL。 7取样和试样制备 根据SN/T0800.1进行。 8方法 乙醚提取法 8.1分析步骤 8.1.1皂化 称取2.0g~2.5g混匀的试样于250mL磨口锥形瓶（6.1)中，精确至0.1mg，再加人25mL95% 乙醇（5.1)和1.5mL50%的氢氧化钾溶液（5.5），安装冷凝管（6.2）。加热至沸腾，保持微沸至少 30min，期间不时摇动锥形瓶，至锥形瓶中的油脂完全皂化。加热过程中保证没有乙醇散失。 8.1.2不皂化物的萃取 8.1.2.1趁热将锥形瓶中的溶液移至500ml.的分液漏斗（6.3)中，用50ml.水分多次洗涤锥形瓶，洗 25℃)。 8.1.2.2盖上塞子，剧烈振荡至少1min，静置至溶液完全分层。放出下层皂化液至另一个250mL分 液漏斗（6.3），乙醚萃取液保留在500mL的分液斗中。 8.1.2.3再重复萃取皂化液2次，每次用50mL乙醚，合并所有的乙醚萃取液至500ml的分液漏 斗中。 注；有些脂肪的不皂化物含量很高，尤其是海洋动物毛油，仅仅3次萃取是不够的。最好的判断方法是，再用乙醚 萃取一次，根据8.1.4.1的操作步骤蒸发称量。如果在该次萃取过程中仍有不皂化物存在，加入少量乙醚溶解 后，合并入乙醚萃取液中。重复以上萃取过程，直至萃取液中没有不皂化物存在。 2 SN/T0801.15—2012 8.1.3乙醚萃取液的洗涤 8.1.3.1用水洗涤乙醚萃取液3次，每次20mL水，轻轻摇动分液漏斗（避免剧烈振荡，以免产生乳化 现象），静置至完全分层后弃去下层水溶液。 8.1.3.2用20mL0.5mol/L的氢氧化钾溶液（5.6)洗涤乙醚萃取液，剧烈振荡，再用20mL水洗涤 乙醚萃取液。如果洗涤过程中有乳化现象发生，尽可能地待两相分离，弃去下层分离清晰的水溶液，将 乳化层和乙醚层一同保留在分液漏斗中。再重复以上洗涤过程2次后，继续用水洗涤，直至加人1滴酚 酞指示剂（5.9），洗涤液不再呈粉红色。 8.1.4溶剂蒸发及残留物的干燥和测定 8.1.4.1将乙醚萃取液转移至已称量的烧杯(6.4)中，用乙醚润洗分液漏斗，润洗液并人烧杯中。将烧 杯置于水浴（6.5)中，缓慢通人洁净干燥的氮气（氮气纯度大于99%，氮气流速以不产生溶液飞溅为 宜），蒸发溶剂至干。加入2mL～3mL丙酮（5.3），继续蒸发溶剂至干。将烧杯置于75℃～80℃的真 空烘箱（6.6）中干燥至恒重（连续两次称量相差不超过1.5g），烘箱内压力不超过26.6kPa （200mmHg）。取出烧杯放人干燥器中冷却后称量，结果作为计算式（2)中的“A”。 8.1.4.2称量后，烧杯中加人2mL乙醚，待不皂化物溶解后再加人10mL中性乙醇（在95%的乙醇 中滴加2滴酚酥指示剂，用氢氧化钠溶液中和至终点）。用0.02mol/L的氨氧化钠标准滴定溶液（5.8） 滴定至与中性乙醇相同的颜色，根据消耗的氢氧化钠标准溶液的体积计算游离脂肪酸的质量（以油酸 计，油酸相对分子质量为282，并对不皂化物的含量进行校正。 根据式（1)计算残留物中游离脂肪酸的质量B，单位为克（g）： B=0.28cV ·(1) 式中： B-一残留物中游离脂肪酸的质量，单位为克（g）； c—氢氧化钠标准滴定溶液(5.8)的浓度，单位为摩尔每升（mol/L)； V消耗的氢氧化钠标准滴定溶液（5.8)的体积，单位为毫升（mL）。 8.1.5空白试验 随同试样做空白试验，试验结果作为式(2)中的“C”。 8.2结果与计算 按照式（2)计算不皂化物的含量U，以质量分数表示： ·(2) m 式中： U—不皂化物的含量（质量分数），%； A 残留物的质量，单位为克（g）； B一一残留物中游离脂肪酸的质量，单位为克（g）； C一空白试验中残留物的质量，单位为克（g)； 试样的质量，单位为克（g）。 8.3精密度 8.3.1 植物油脱臭蒸馏物及残渣的精密度 植物油脱臭蒸馏物及残渣的精密度如下： 3 SN/T0801.15—2012 同一实验室内两次测定结果差异不超过2.6%； 不同实验室两次测定结果差异不超过3.8%。 8.3.2其他油脂的精密度 醚和洗涤溶液用量，其精密度数据见表1～表3。 表11995年6月国际油、油籽、油脂协会（FOSFA)组织的协同实验结果 豆油 样品名称 B 可接受结果的数目 49 50 平均值（质量分数)/% 0. 38 0.69 重复性标