2 0 2 5 0 4 2 7 发 布 － － 2 0 2 5 0 8 0 1 － － 实 施 蜂 蜜 中 花 粉 相 对 含 量 的 测 定 4 7 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 备 案 号 ： X X X X - X X X X Ｉ Ｃ Ｓ 6 5 . 1 4 0 C C S B 4 7 4 3 — 2 0 2 5 D e t e r m i n a t i o n o f r e l a t i v e p o l l e n c o n t e n t i n h o n e y Ｎ Ｙ ／ Ｔ 中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部 发 布NY/T４７４３—２０２５ 前　　言 本文件按照GB/T１􀆰１—２０２０«标准化工作导则　第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定 起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部畜牧兽医局提出. 本文件由全国畜牧业标准化技术委员会(SAC/TC２７４)归口. 本文件起草单位:中国农业科学院蜜蜂研究所. 本文件主要起草人:张金振、王鹏、赵文、黄京平、金玥、胡菡、薛晓锋、常硕、吕冬兰. ⅠNY/T４７４３—２０２５ 蜂蜜中花粉相对含量的测定 １　范围 本文件描述了蜂蜜中花粉相对含量测定方法. 本文件适用于蜂蜜中花粉相对含量的测定. ２　规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件. GB/T６６８２　分析实验室用水规格和试验方法 ３　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. ３􀆰１ 花粉相对含量　relativepollencontent 特定植物花粉粒数占总花粉粒数的百分比. ４　原理 试样用水溶解、离心后,在显微镜下观察花粉形态和粒数,计算花粉相对含量. ５　试剂或材料 ５􀆰１　水:符合GB/T６６８２规定的三级水. ５􀆰２　甘油明胶. ６　仪器设备 ６􀆰１　生物显微镜:×１０目镜,１０×物镜,４０×物镜,６０×物镜. ６􀆰２　电子天平:精度为０􀆰１g. ６􀆰３　不锈钢筛:孔径０􀆰４２５mm. ６􀆰４　离心机:转速不低于３０００r/min. ６􀆰５　试管振荡器. ６􀆰６　恒温水浴锅:控温±１℃. ６􀆰７　电热加热板:控温±１℃. ６􀆰８　载玻片:７６mm×２６mm. ６􀆰９　盖玻片:２２mm×２２mm. ６􀆰１０　计数器. ７　样品 未结晶的蜂蜜直接搅拌均匀;结晶的蜂蜜于不超过６０℃水浴中融化,搅拌均匀;有杂质的蜂蜜用不锈 钢筛过滤除去杂质,搅拌均匀;巢蜜用刀割去蜜脾蜡盖,通过挤压的方式使巢蜜中的蜂蜜和蜂蜡分离,用不 锈钢筛过滤除去杂质,搅拌均匀.分别取不少于２００g样品,于密闭容器中保存. １NY/T４７４３—２０２５ ８　试验步骤 ８􀆰１　提取 平行做２份试验.称取１０g(精确至０􀆰１g)试样于５０mL离心管中.加入２０mL水,于试管振荡器 上振荡５min混匀,于３０００r/min离心１０min,缓慢倾出上清液,再加入２０mL水,重复提取一次,缓慢 倾出上清液,将离心管倾斜倒放在吸水纸上,使管内液体流至近干. ８􀆰２　制片 ８􀆰２􀆰１　在５０℃水浴中液化甘油明胶,并在４０℃加热板上预热载玻片和盖玻片. ８􀆰２􀆰２　向８􀆰１步骤处理好的离心管中加入１mL水使沉淀物分散均匀,吸取０􀆰２mL分散液在预热好的 载玻片上,平铺面积约２０mm×２０mm,将载玻片继续放置在４０℃加热板上加热,直至分散液完全干燥. 然后,在预热的盖玻片上滴一滴甘油明胶,使之在对角形成一个十字,将盖玻片甘油明胶面缓慢地盖在沉 淀物上,以防止形成气泡,不要直接将甘油明胶滴在干燥的沉积物上.将盖好盖玻片的标本于４０℃加热 板上加热５min,确保甘油明胶均匀分布并使花粉充分膨胀,待甘油明胶冷却凝固后置于显微镜下镜检. 如果视野中花粉浓度低,则适当增加称样量或降低离心沉淀物中加入水的体积重新试验. ８􀆰３　计数 先在１０×物镜下找到视野中的花粉粒,然后在４０×物镜下初步鉴定花粉的种类(常见蜜源植物花粉 的形态见附录A),确定目标植物花粉并计数.选择至少２０个视野统计花粉粒数,累计不少于５００个花粉 粒. ９　试验数据处理 试样中花粉相对含量以Xp表示,单位为百分号(％),按公式(１)计算. Xp＝A×１００ n(１) 􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺 式中: A———特定植物花粉粒数的数值,单位为个; n———总花粉粒数的数值,单位为个. 测定结果以平行测定的算术平均值表示,计算结果保留２位有效数字. １０　精密度 在重复性条件下,２次独立测定结果与其算术平均值的绝对差值不超过该算术平均值的１５％. ２NY/T４７４３—２０２５ 附　录　A (资料性) 常见蜜源植物花粉形态 　 常见蜜源植物花粉形态见图A􀆰１~A􀆰９. 图A􀆰１　洋槐花粉形态 图A􀆰２　油菜花粉形态 图A􀆰３　椴树花粉形态 ３NY/T４７４３—２０２５ 图A􀆰４　荆条花粉形态 图A􀆰５　枣花花粉形态 图A􀆰６　紫云英花粉形态 ４NY/T４７４３—２０２５ 图A􀆰７　苕子花粉形态 图A􀆰８　枸杞花粉形态 图A􀆰９　荞麦花粉形态 ５