ICS65.020.20 LY B 65 中华人民共和国林业行业标准 LY/T2346—2014 竹秆锈病诊断及防治技术规程 Technical regulation of diagnosis and control on Puccinia corticioides 2014-08-21发布 2014-12-01实施 国家林业局 发布 LY/T2346—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由全国竹藤标准化技术委员会（SAC/TC263)提出并归口。 本标准起草单位：国际竹藤中心、首都师范大学。 本标准主要起草人：高健、侯成林、林英任、肖正东、戴其生、赖广辉、张教元、方明刚、朱维双、 李本祥。 LY/T2346—2014 竹秆锈病诊断及防治技术规程 1范围 本标准规定了竹秆锈病的术语、定义、诊断方法和防治技术要求。 本标准适用于对竹秆锈病的诊断和防治。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 竹秆锈病bamboostemrust(PucciniacorticioidesBerk,&Syn.) 由真菌界（Fungi）、担子菌门（Basidiomycota）、锈菌目（Uredinales）、柄锈菌科（Pucciniaceae）、柄锈 菌属（Puccinia）、皮下柄锈菌（P.corticioidesBerk.&Syn.），异名为皮下硬层锈菌（Stereostratumcori- cioides（Berk.&Br.）Magn.引起的竹秆锈病。 2.2 症状symptom 竹株感病后所表现出来的所有特征。 2.3 病征sign 竹株感病后病原物所表现出来的特征。 2.4 核糖体内转录间隔区序列 (ITS,rDNA internal transcribed spacers) 位于核糖体小亚基（18SrDNA）和大亚基（28SrDNA）之间的所有核苷酸序列 3技术要求 3.1形态诊断 3.1.1病害发生部位：通常发生在竹秆的中下部和秆基，严重时竹秆的上部及小枝也可发病。 3.1.2症状：4月～5月在发病部位产生黄褐色粉质层，即病菌的夏孢子堆，11月份至次年3月前后形 成冬孢子堆。冬孢子堆呈椭圆形、长条形或者不规则形状，棕褐色，成熟后可脱落。 3.1.3病原菌形态：夏孢子单生，卵形至近球形，单胞，（18μm～30μm）×（15μm～20μm），无色或者 淡黄色，具短柄，有刺状突起。冬孢子单生，广椭圆形至近圆形，（20μm～35μm）×（18μm～25μm）， 淡黄色，双胞，偶见单细胞，隔膜处稍缢缩或者不缢缩，柄无色，长达100μm。每-个细胞具有3～5个 萌发孔。性孢子和锈孢子阶段不明。 3.2分子生物学诊断 3.2.1DNA提取方法：取少许病原真菌孢子（以肉眼可见即可）置于微型塑料试管中，采用通用真菌 DNA提取试剂盒提取病原真菌DNA。病斑上未见病原真菌的，则直接取不少于10mg的病斑组织用 于DNA提取。 1 LY/T2346—2014 3.2.2PCR扩增：引物为ITS1-F/ITS4；反应体系为25μL；反应程序采用预变性（94℃，3min），变性 （94℃，30s），退火（50℃，45s）和延伸（72℃，1min），循环35次，延伸（72℃，7min）。 3.2.3ITS区域测序：将PCR产物测序。 3.2.4序列比对以及同源性分析：将病原菌的核糖体ITS序列与GenBank中皮下柄锈菌的标准序列 （GenBank注册号为HM446348)进行比对，相似性98%以上可确定为皮下柄锈菌。皮下柄锈菌的标准 序列HM446348如下： GTGTGTATTTAGGAGTCTTCCTTAATAAAATGGCAGTATTGCTACTTTCCTTGATGTT CAAAAAATTATTACACCAAGTCAATCCAATTTGTTAAAAAATAAAAGACTTATATAT TTAAAGTGAGCTAATTACAGCAACACTCAACATCCATTAAACAATTCATATTAATAA ATTGGTTAATGAGAGGGTTTCATGACACTCAAACAGGTGTGCTTTTTGGAATACCAAA AGGCACAAGATGCGTTCAAAGATTCAATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACT TATCACATTTCACTGTGTTCTTCATCGATGTGAGAGCCTAGAGATCCATTGTTAAAAG TTATATTTAAATTAAATTAATTTACATTCTTTCAAAAACATGTGTATAAAGAAAAA AATTAAGTGCACTCTATTTCTTTTAATAATGATCCTTCCGCAGGTT 3.3防治方法和技术 3.3.1清除病原物：在冬季或春季出笋前，砍除病株或清除病枝、梢，并集中烧毁。 3.3.2病害发生后，及时伐除全株，或者用刀刮除冬孢子堆或夏孢子堆及其周围的组织，然后用20%三 唑酮乳油5倍液或其他高效、低毒内吸杀真菌剂涂抹伤口，每隔7天10天涂抹1次，连续涂抹2~ 3次。连续防治1年～2年。 2 LY/T2346-2014 参考文 献 GB/T15161 1林业资源分类与代码 [1] 林木病害