ICS 67.060 LS B 20 备案号：44931—2014 中华人民共和国粮食行业标准 LS/T6110--2014 粮油检验 谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇测定 胶体金快速测试卡法 Inspection of grain and oils--Detection of deoxynivalenol in cereal-- Rapidmethod of colloidalgoldtechnique 2014-04-28发布 2014-06-01实施 国家粮食局 发布 中华人民共和国粮食 行业标准 粮油检验 谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇测定 胶体金快速测试卡法 LS/T6110—2014 * 中国标准出版社出版发行 北京市朝阳区和平里西街甲2号(100029) 北京市西城区三里河北街16号(100045) 网址www.spc.net.cn 总编室：(010)64275323 发行中心：(010)51780235 读者服务部：(010)68523946 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 各地新华书店经销 * 开本880×1230 01/16 印张0.5 字数8千字 2014年6月第一版 2014年6月第一次印刷 书号：155066·2-27111 如有印装差错 由本社发行中心调换 版权专有 侵权必究 举报电话：(010)68510107 LS/T 6110—2014 前 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草， 本标准由全国粮油标准化技术委员会（SAC/TC270)归口。 本标准起草单位：北京市粮油食品检验所、湖北省粮油食品质量监测站、四川省粮油中心监测站、辽 宁省粮油检验监测所、重庆市粮油质量监督检验站、广西壮族自治区粮油质量监督检验站、国家粮食局 标准质量中心、河南省商丘市粮油科技检验所。 本标准主要起草人：郭健、王郑平、刘坚、杨军、朱旭东、彭超、柳永英、刘征、张艳、杨卫民、邵慧。 LS/T 6110—2014 粮油检验 谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇测定 胶体金快速测试卡法 1范围 本标准规定了脱氧雪腐镰刀菌烯醇的胶体金快速测试卡检测方法的原理、试剂及材料、仪器及设 备、样品制备、样品测定、结果判定、阳性样品确认。 本标准适用于小麦和玉米等谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的快速筛查。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB2761食品安全国家标准食品中真菌毒素限量 GB5491粮食、油料检验扦样、分样法 GB/T6682--2008分析实验室用水规格和试验方法 GB/T23503食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法 3原理 本方法基于抗原抗体反应、免疫金标记技术及毛细管层析技术，以微孔膜为固相载体，将可特异性 识别脱氧需腐镰刀菌烯醇的抗体标记为红色或紫红色的胶体金颗粒，检测卡膜上的两个色带分别固定 脱氧雪腐镰刀菌烯醇抗原，以及抗鼠源性抗体的二抗，根据色带的颜色变化进行检测结果判定。 4试剂及材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T6682一2008中三级水。 4.1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇胶体金测试卡"：测试卡的性能应满足附录A的要求。在不同品牌不同批次 的测试卡使用前，应按照附录A进行测试卡性能测定。 4.23 提取液：水或与胶体金测试卡配套的专用提取液。 5仪器及设备 除实验室常规仪器设备外，应注意下列仪器设备。 镰刀菌烯醇胶体金测试卡是当前应用广泛的快速测试卡。提供此信息只是为了方便本标准的使用者，不代表 本标准对产品的认可。任何满足本标准附录A规定的测试卡均可使用。 1 LS/T 6110—2014 5.1 天平：分度值0.01g。 2粉碎机。 5.2 5.3 3离心机：转速4000r/min。 5.4振荡器。 5.5 5计时器。 离心管。 5.6 样品制备 6.1 扦样与分样：按GB5491执行。 6.2样品粉碎：将被测样品（6.1)粉碎至全部通过20目筛，充分混合均匀，以保证脱氧雪腐镰刀菌烯醇 分布均匀。 6.3待测溶液制备：准确称取粉碎混匀样品（6.2)2.00g于离心管中，加入10mL水或专用提取液 （4.2），振荡提取3min，4000r/min转速下离心1min（或静置），上清液为待测溶液。 注：也可根据测试卡使用说明书要求进行样品制备。 7样品测定 用吸管缓慢滴加3滴待测溶液（6.3)至测试卡（4.1)加样孔中（若加入待测溶液后30s内在测试窗 口无液体移动，则补加1滴待测溶液），测试窗口有液体移动时开始计时，5min～10min内观察测试 结果。 注：测试卡在每次检测时必须出现质控色带，同时在5min～10min内观察测试结果，否则检测结果将出现偏差。 8 结果判定 8.1无效 质控色带不显色，说明此测试卡无效，需重新检测。 8.2 阴、阳性样品 质控色带显色，检测色带显色，判为阴性。质控色带显色，检测色带不显色或颜色非常模糊时，判为 阳性。 9 阳性样品确认 需对本方法筛查出的阳性样品进行确认时，判定应根据GB2761中规定的脱氧雪腐镰刀菌烯醇限 量标准，检测方法应参照GB/T23503规定的方法。 2 LS/T6110—2014 附录A （规范性附录） 谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇胶体金快速测试卡的技术要求与验证方法 A.1 技术要求 A.1.1基本要求 A.1.1.1 工作环境要求 气温：20℃30℃。 A.1.1.2 交叉反应 对黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素及其他真菌毒素均无交叉反应。 A.1.2 性能要求 A.1.2.1 外观 外观应符合以下要求： a) 测试卡表面应光滑平整，颜色均匀一致，纤维膜面无露底、气泡、麻点、起皱、刷痕等缺陷； b) 点样孔应洁净； ( 文字符号等标志应字体端正、清晰、正确。 A.1.2.2 准确性 样品的检测结果误判率应不超过15%。对于脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量在800μg/kg～1200ug/kg的 样品，检测结果允许存在假阳性，不允许存在假阴性。 A.1.2.3 稳定性 同批次测试卡的误判率应不超过10%，不同批次测试卡的误判率应不超过15%。 A.2 验证方法 A.2.1 阳性样品定值 按照GB2761中规定的方法对阳性样品进行定值。 A.2.2 性能测定 A.2.2.1 准确性 在800μg/kg～1200μg/kg脱氧雪腐镰刀菌烯醇浓度范围内，选取10个不同浓度的阳性样品进 行测定，计算误判率。 LS/T6110—2014 A.2.2.2 稳定性 A.2.2.2.1 批间稳定性 随机选取3个批次产品，每个批次用同一阳性样品进行至少6次测定，计算误判率。 A.2.2.2.2 批内稳定性 随机选取1个批次产品，用同一阳性样品进行至少6次测定，计算误判率。 A.2.2.3 产品失效率 保质期内产品失效率应符合厂家提供的允许值。 A.2.2.4 约定误差范围 约定误差范围应符合厂家提供的允许值。 版权专有侵权必究 书号：155066·2-27111 LS/T6110-2014