ICS65.020.01 CCSB15T/ZJSIA 浙江省种子产业协会团体标准 T/ZJSIA0001—2024 甜瓜主要病害抗性鉴定与评价技术规程 第1部分：甜瓜枯萎病、甜瓜根腐病抗性鉴定与评价 技术规程 Technicalcodeofpracticeforevaluationofmelonresistancetodiseases Part1:Technicalcodeofpracticeforevaluationofmelonresistancetofusariumwiltand rootrot 2024-12-11发布 2024-12-30实施 浙江省种子产业协会发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/ZJSIA0001—2024 I前  言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 T/ZJSIA0001—2024《甜瓜主要病害抗性鉴定与评价技术规程》为系列标准，共5部分： ——第1部分：甜瓜枯萎病、甜瓜根腐病抗性鉴定与评价技术规程； ——第2部分：甜瓜蔓枯病抗性鉴定与评价技术规程； ——第3部分：甜瓜炭疽病抗性鉴定与评价技术规程； ——第4部分：甜瓜白粉病抗性鉴定与评价技术规程； ——第5部分：甜瓜霜霉病抗性鉴定与评价技术规程； 本文件是T/ZJSIA0001—2024《甜瓜主要病害抗性鉴定与评价技术规程》的第1部分。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由浙江省种子产业协会提出并归口。 本文件主要起草单位：浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所、浙江省种子管理总站、杭州市 富阳区农业技术推广中心、浙江省苍南县农业技术推广站。 本文件主要起草人：武军、王汉荣、陈小央、吴早贵、李燕、祝玮、胡敏骏、董代幸、沈年桥。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/ZJSIA0001—2024 1甜瓜主要病害抗性鉴定与评价技术规程 第1部分：甜瓜枯萎病、甜瓜根腐病抗性鉴定与评价技术规程 1范围 本文件规定了甜瓜枯萎病、甜瓜根腐病抗性鉴定与评价的术语和定义、接种体制备、鉴定用苗培育、 鉴定方法、病情调查、结果统计和结果评价。 本文件适用于所有种类的甜瓜品种、品系及种质资源的甜瓜枯萎病、甜瓜根腐病的抗性鉴定与抗性 评价。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB16715瓜菜作物种子第1部分瓜类 NY/T2118蔬菜育苗基质 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 抗病性diseaseresistance 植物所具有的能够克服或减轻病原物致病作用的可遗传性状。 3.2 抗性评价resistanceevaluation 根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述。 3.3 致病性pathogenicity 病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。 3.4 病情级别diseaserating 全国团体标准信息平台 T/ZJSIA0001—2024 2人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。 3.5 病原分离物pathogenisolate 采用人工方法从植物发病部位分离获得的、在特定环境条件下培养的病原物。 3.6 接种体inoculum 用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。 3.7 接种液inoculumsuspension 用于接种的、含有接种体的悬浮液。 3.8 发病率incidenceofdisease 发病植株数占总植株数的百分率。 3.9 病情指数diseaseindex（DI） 通过对植物个体发病程度（病情级别）数值的计算获得的群体发病程度的数值化描述形式，是描述 发病严重度的综合指标。 4接种体制备 4.1基本设备 无菌室、恒温箱培箱、恒温振荡箱培箱、超净工作台、高压灭菌锅、冰箱、可控温的温室（温度保 持在20℃～30℃）、塑料盆、铝锅、电炉、培养皿、试管、剪刀、镊子、广口瓶、酒精灯、滤纸、三 角瓶、各种培养基等。 4.2接种体分离 采用常规组织分离法进行单孢分离纯化。从甜瓜枯萎病、甜瓜根腐病的发病植株的病健交界部位获 取病组织，接种于PDA培养基分离纯化病原物。分离物经形态学和分子生物学鉴定，以及致病性测定确 认为甜瓜枯萎病菌（FusariumoxysporumSehl.f.sp.niveum（E.F.Smith）Synder＆Hensen）、甜瓜 根腐病菌（Fusariumsolani），见附录B。 4.3接种体确定 选择分布较广、致病力较强的甜瓜枯萎病菌、甜瓜根腐病菌的优势菌株作为人工接种鉴定使用的接 种体。 全国团体标准信息平台 T/ZJSIA0001—2024 34.4接种体保存 将甜瓜枯萎病菌、甜瓜根腐病菌接种于PDA平板培养基，并在接种点周围放置一定数量的灭菌滤纸 片，在25℃～28℃培养7d后，取出滤纸片，经真空干燥后于-20℃～-30℃的低温冰箱中保存，或将甜瓜 枯萎病菌、甜瓜根腐病菌接种于PDA斜面培养基，在25℃～28℃培养7d后，置于冰箱中4℃～8℃下保 存。 4.5接种体悬浮液制备 将保存的用于人工接种鉴定的甜瓜枯萎病菌、甜瓜根腐病菌接种体移植于PDA平板培养基，25℃～ 28℃下培养7d。在无菌操作下，将甜瓜枯萎病菌、甜瓜根腐病菌接种体接种于装有PL液体培养基或绿 豆液体培养基的三角瓶中（液体培养基的体积是三角瓶容量的30%～40%），置于25℃～28℃下恒温振 荡培养箱中，160r/min～180r/min振荡培养7d～10d。培养液经双层纱布过滤，滤液以4000r/min离心 10min，去除上清液，加适量的无菌水稀释，制成分生孢子悬浮液。 5鉴定用苗培育 5.1种子质量 应符合GB16715的要求。 5.2浸种催芽 将甜瓜种子置于5%次氯酸钠溶液中浸种10min，再用清水冲洗3次，然后用清水浸泡5h，沥干水， 置于30℃～32℃恒温箱中保湿催芽。 5.3播种 采用营养钵盆栽法育苗，营养钵直径11cm～13cm、高10cm～13cm，基质应符合NY/T2118的要 求。将甜瓜种子露白后播种，每钵1粒种子，重复3次，每重复30钵，共90钵，待用。 5.4接种前管理 播种后将营养钵置于温室中进行培育，出苗前温度保持在25℃～30℃，保持基质湿润；出苗后温 度保持在23℃～28℃，基质湿度保持在60%～80%，正常栽培管理，不施用杀菌剂。 6鉴定方法 6.1对照品种设置 抗病性鉴定时，设置一个感病对照品种和一个抗病对照品种，感病对照不得缺省，抗病对照品种可 缺省。感病对照品种宜选用本地区的常规感病品种，选择标准为在常规接菌量下病情指数大于50。抗病 对照品种宜选用本地区的常规抗病品种，选择标准为在1.0×106个孢子/mL～4.0×106个孢子/mL接菌量 下病情指数小于15。 6.2定时间 每年4月～6月和9月～11月为甜瓜对枯萎病和根腐病抗性鉴定与抗性评价的最佳时间。 6.3接种时期 全国团体标准信息平台 T/ZJSIA0001—2024 4在甜瓜苗三叶一心至五叶一心时进行。 6.4接种液配制 用无菌水稀释接种体悬浮液，配制成浓度为1.0×106个孢子/mL～4.0×106个孢子/mL的接种液。 6.5接种方法 6.5.1伤根接种 在距离甜瓜苗茎基部周围2.0cm～3.0cm范围内，定点六个方向，用宽度为1.5cm～2.0cm的无菌竹 片垂直向下损伤根系后，每株用200mL～250mL接种液浇根，采用小拱棚保湿24h～48h。 6.5.2浸根接种 取出甜瓜幼苗，清洗去除根部基质，在距幼苗根尖端1cm处用剪刀断根，然后将幼苗根部浸泡在接 种液中，20min后移植于营养钵，采用小拱棚保湿24h～48h。 6.6接种后管理 接种后的甜瓜苗置于23℃～28℃设施中，黑暗保湿（RH85%～100%）24h；之后保持正常光照， 适时浇水，保持正常栽培管理，不施用杀菌剂。 7病情调查 7.1调查时间 接种后20d～25d时进行调查。也可根据感病的对照品种病级扩展到最高病级的时间作适当调整。 7.2病情分级 病情调查的分级采用0级、1级、3级、5级、7级、9级的6级分级法。病情分级划分参见表1。 表1甜瓜枯萎病、甜瓜根腐病的病情分级 病级 症状描述 0级 甜瓜植株健康，无病症。 1级 甜瓜植株茎杆出现轻微病斑，但生长正常。 3级 甜瓜植株茎杆病斑较明显，5%～20%病变，植株叶片出现萎缩或轻微萎蔫现象； 5级 甜瓜植株茎杆病斑明显，20%～50%病变，植株叶片明显出现枯萎现象； 7级 甜瓜植株茎杆病斑明显，50%～75%病变，植株叶片萎蔫或枯萎； 9级 甜瓜植株茎杆病斑明显，75%以上病变，植株叶片枯萎或枯死。 7.3调查方法 根据病害症状描述，调查每份鉴定品种（系）的发病情况，逐份材料进行分株调查，分别记载病情 的分级。 8结果统计 全国团体标准信息平台