ICS65.020.30 CCSB44 SHAAV 团 体 标 准 T/SHAAV028—2025 副猪格拉瑟菌MALDI-TOFMS快速鉴定方 法 MALDI-TOF-MSRapidIdentificationMethodofGlaesserellaparasuis 2025-08-13发布 2025-08-13实施 上海市畜牧兽医学会  发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/SHAAV028—2025 I目次 前 言...................................................................................................................................................................II 1范围............................................................................................................................................................................1 2规范性引用文件........................................................................................................................................................1 3术语和定义................................................................................................................................................................1 4缩略语........................................................................................................................................................................1 5原理............................................................................................................................................................................1 6试剂和材料................................................................................................................................................................1 7仪器与设备................................................................................................................................................................2 8操作步骤....................................................................................................................................................................2 9结果报告....................................................................................................................................................................3 10生物安全及防污染措施..........................................................................................................................................3 附录A（规范性）质谱仪的校准..............................................................................................................................4 附录B（资料性）副猪格拉瑟菌质谱数据库的建立..............................................................................................5 全国团体标准信息平台 T/SHAAV028—2025 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由上海市畜牧兽医学会提出并归口。 本文件起草单位：上海市动物疫病预防控制中心、上海市松江区农产品质量安全检测中心、郑州安 图生物工程股份有限公司、中元汇吉生物技术股份有限公司。 本文件主要起草人：沈莉萍、徐锋、王晓旭、张玉杰、齐新永、王建、赵洪进、金一春、徐平、唐 聪圣。 本文件首批承诺执行单位名单：中国农业科学院上海兽医研究所、上海市动物疫病预防控制中心、 河北省动物疫病预防控制中心、梅里埃诊断产品（上海）有限公司、郑州安图生物工程股份有限公司、 中元汇吉生物技术股份有限公司、上海中江举帆科技有限公司。 全国团体标准信息平台 T/SHAAV028—2025 1副猪格拉瑟菌MALDI-TOFMS快速鉴定方法 1范围 本文件规定了副猪格拉瑟菌的MALDI-TOFMS鉴定方法。 本文件适用于副猪格拉瑟菌病的病原学检测与鉴定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，标注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用 于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T33682基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴别微生物方法通则 GB/T34750副猪嗜血杆菌检测方法 GB19489实验室生物安全通用要求 NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 副猪格拉瑟菌Glaesserellaparasuis 副猪格拉瑟菌原属于巴氏杆菌科（Pasteurellaceae），嗜血杆菌属（Haemophilus），因遗传特征差 异被划归至新属，其分类地位现属于巴氏杆菌科（Pasteurellaceae），格拉瑟菌属（Glaesserella），故 特说明副猪格拉瑟菌（Glaesserellaparasuis）与副猪嗜血杆菌（Haemophilusparasuis）为同一种细菌。 4缩略语 下列缩略语适用于本文件。 CHCA：α-氰-4-羟基肉桂酸（α-Cyano-4-HydroxycinnamicAcid，C10H7NO3）。 TSA：胰蛋白胨大豆琼脂（TrypticaseSoyAgar）。 MALDI-TOFMS：基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（Matrix-AssistedLaserDesorption/Ionization TimeofFlightMassSpectrometry）。 5原理 MALDI-TOFMS主要由两部分组成：MALDI（基质辅助激光解析电离离子源）和TOF（飞行时间 质量分析器）。MALDI-TOFMS是近年来发展起来的一种新型软电离技术，原理是利用激光照射微生 物标本与基质形成的共结晶体，基质吸收激光能量并传递给微生物所含生物分子，同时将质子转移到生 物分子或从生物分子得到质子而使生物分子电离，电离后的生物分子进入真空管，由于在真空管飞行过 程没有外力作用，到达真空管顶端离子检测器的时间与其质量有关，即质量越大、飞行速度越慢，到达 检测器的时间越长，按照质量/电荷（m/z）比值大小，将采集的数据与微生物指纹图谱库对照鉴定。 6试剂和材料 全国团体标准信息平台 T/SHAAV028—2025 2除非有特殊说明，仅使用色谱级试剂，实验用水应符合GB/T6682的规定。 6.1乙腈（Acetonitrile，CH3CN）。 6.2无水乙醇（Ethanol，CH3CH2OH）。 6.3三氟乙酸（Trifluoroaceticacid，CF3COOH）。 6.4α-氰-4-羟基肉桂酸（α-Cyano-4-HydroxycinnamicAcid，