ICS 65.020 B 20 团 体 标 准 T/HXCY 130-2025 紫花苜蓿维生素 E测定技术规程 Technical specification for determination of vitamin E in Medicago sativa 2025 -7-23发布 2025 -7-24实施 北京华夏草业产业技术创新战略联盟 发布 全国团体标准信息平台 T/HXCY 130—2025 目 次 前 言 ................................ ................................ ................................ .......................... III 1 范围 ................................ ................................ ................................ .............................. 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ................................ .......... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ................................ .................. 1 4 原理 ................................ ................................ ................................ .............................. 1 5 试剂和材料 ................................ ................................ ................................ .................. 1 6 仪器设备 ................................ ................................ ................................ ...................... 3 7 分析步骤 ................................ ................................ ................................ ...................... 3 8 分析结果的表述 ................................ ................................ ................................ .......... 4 9 精密度 ................................ ................................ ................................ .......................... 4 10其他 ................................ ................................ ................................ ............................. 4 全国团体标准信息平台 T/HXCY 130—2025 前 言 本文件按照 GB/T1.1 -2020《标准化工作导则第 1部分： 标准化文件的结构和起草规则》 的规定起草。 本文件由北京华夏草业产业技术创新战略联盟提出并归口。 本文件起草单位： 中国农业大学 、北京市营养源研究所有限公司、 北京畜牧兽医研究所 。 本文件主要起草人：姜霁珊、冯润滋、孔凡华、刘梦兰、张蕴薇、王学敏、张振甲、毕 晓静。 本文件为首次发布。 本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 全国团体标准信息平台 T/HXCY 130—2025 1 紫花苜蓿维生素 E测定技术规程 1 范围 本文件规定了紫花苜蓿中维生素 E测定技术的术语和定义、原理、试剂和材料、仪器设 备、分析步骤、分析结果的表述、精密度等内容。 本文件适用于紫花苜蓿中维生素 E的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本 适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件， 其最新版本 （包括所有的修改单） 适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 术语和定义 3.1 紫花苜蓿 Medicago sativa L. 紫花苜蓿为豆科苜蓿属多年生草本植物，有 “牧草之王 ”的美誉。紫花苜蓿根系发达， 固氮能力强。茎直立中空，高 60 cm~120 cm，多分枝。三出复叶，小叶倒卵形，托叶尖长。 腋生总状花序， 蝶形花冠呈紫或蓝紫色。 荚果螺旋状盘曲 （ 2旋~4旋） ， 含肾形黄绿色种子。 3.2 维生素E vitamin E 维生素 E是生育酚类物质的总称，是一种金黄色或者淡黄色的油状物，在动物机体中 无法合成，是最主要的抗氧化剂之一。 4 原理 试样中的维生素 E经甲醇：三氯甲烷溶液提取、浓缩后， C30反相液相色谱柱分离，荧 光检测器检测，外标法定量。 5 试剂和材料 5.1 试剂 5.1.1 水（H2O）：符合 GB/T 6682 中三级水的要求。 5.1.2 2，6-二叔丁基对甲基苯酚（简称 BHT）：分析纯。 5.1.3 无水乙醇 （C2H5OH）：优级纯。 5.1.4 三氯甲烷 （CHCL 3）：分析纯。 全国团体标准信息平台 T/HXCY 130—2025 2 5.1.5 甲醇（CH 3OH）：色谱纯。 5.1.6 标准品 α-生育酚（ C29H50O2，CAS号： 10191 -41-0）：纯度 ≥95%，或经国家认证并授予标准物 质证书的标准物质。 β-生育酚（ C28H48O2，CAS号： 148-03-8）：纯度 ≥95%，或经国家认证并授予标准物质 证书的标准物质。 γ-生育酚（ C28H48O2，CAS号：54-28-4）：纯度 ≥95%，或经国家认证并授予标准物质证 书的标准物质。 δ-生育酚（ C27H46O2，CAS号： 119-13-1）：纯度 ≥95%，或经国家认证并授予标准物质 证书的标准物质。 5.2 试剂配制 5.2.1 甲醇：三氯甲烷溶液（ 2：1，V：V） 称取 0.015 g 2，6-二叔丁基对甲基苯酚于烧杯中， 加入 100 mL甲醇和 50 mL三氯甲烷， 混匀备用。 5.2.2 甲醇：水溶液（ 95：5，V：V） 量取 475 mL甲醇，加入 25 mL水，混匀备用。 5.3 标准溶液配制 5.3.1 维生素 E标准储备溶液（ 1.00 mg/mL ） 称取 4种生育酚异构体标准品各 50.0 mg（准确至 0.1 mg），用无水乙醇溶解于 50 mL 容量瓶中，定容至刻度，此溶液浓度约为 1.00 mg/mL 。将溶液转移至棕色试剂瓶中，密封 后，在 -20℃避光保存，有效期 6个月。临用前将溶液回温至室温，并进行浓度校正（校正 方法参见附录 A）。 5.3.2 维生素 E标准溶液中间液（ 10.00 μ g/mL） 准确吸取维生素 E标准储备溶液各 1.00 mL于同一 100 mL容量瓶中，用甲醇：水溶液 （95：5，V：V）定容至刻度，此溶液中维生素 E各生育酚浓度为 10.00 μ g/mL。 5.3.3 维生素 E标准系列工作溶液 分别准确吸取维生素 E混合标准溶液中间液 0.20 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、 5.00 mL、10.00 mL 于10 mL棕色容量瓶中，用甲醇：水溶液（ 95：5，V：V）定容至刻度， 该标准系列中 4种生育酚浓度分别为 0.20 μ g/mL、0.50 μ g/mL、1.00 μ g/mL、2.00 μ g/mL、 全国团体标准信息平台 T/HXCY 130—2025 3 5.00 μ g/mL、10.00 μ g/mL。 5.4 材料 5.4.1 植物材料：紫花苜蓿新鲜叶片。 5.4.2 有机系滤膜（孔径为 0.45 μ m）。 6 仪器设备 6.1 天平：感量为 0.0001 g。 6.2 离心机：转速 14000 g。 6.3 旋涡混合器。 6.4