SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2919—2011 出口食品中异丁子香酚残留量的测定 液相色谱法 Determination of isoeugenol residues in food for export- Liquid chromatography method 行业标准信息服务平台 2011-05-31发布 2011-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2919—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国海南出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：徐志伟、纪少凡、卓海华、林正锋、刘红专、陈文慧 行业标准信息服务平台 I SN/T 2919—2011 出口食品中异丁子香酚残留量的测定 液相色谱法 1范围 本标准规定了出口食品中异丁子香酚的液相色谱测定方法。 本标准适用于鱼、虾、猪肉、猪肝、饮料、饼干中异丁子香酚的超高效液相色谱法检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样中的异丁子香酚用叔丁基甲醚提取，氢氧化钠溶液反萃取，甲醇-盐酸-水混合溶液定容，用配 荧光检测器的液相色谱仪检测，外标法定量。 4试剂和材料 所有试剂除特殊注明外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1叔丁基甲醚：色谱纯，使用前用冰水浴充分冷却。 4.2甲醇：色谱纯。 4.3乙睛：色谱纯。 4.4乙酸铵：色谱纯。 4.5氢氧化钠。 4.6浓盐酸：35%~37%。 4.75%乙酸铵溶液（质量浓度）：准确称取50g乙酸铵（4.4），用水溶解并定容至1L，使用前用冰水浴 充分冷却。 4.80.25mol/L氢氧化钠溶液：准确称取1.00g氢氧化钠（4.5），用水溶解并定容至100mL，使用前 用冰水浴充分冷却。 4.950%甲醇（体积分数）：量取100mL甲醇和100mL水，混合均勺。 4.10甲醇-盐酸-水混合溶液（1.1mol/L）：准确量取9.2mL浓盐酸（4.6），用50%甲醇（4.9）稀释并定 容至100mL，使用前用冰水浴充分冷却。 4.1110%甲醇（体积分数）：量取10mL甲醇和90mL水，混合均匀，使用前用冰水浴充分冷却。 4.120.1%乙酸铵（质量浓度）：准确称取1.00g乙酸铵，用水溶解并定容至1L。 4.13异丁子香酚（isoeugenol，CAS编号：97-54-1，分子式：CioH12O2）标准品：纯度≥99%。 4.14标准储备液：准确称取适量异丁子香酚标准品，用甲醇配制成浓度约为200μg/mL的标准储 备液。 1 SN/T 2919—2011 4.15 标准中间液：取适量标准储备液（4.14），用10%甲醇（4.11）稀释成浓度为1ug/mL的标准中 间液。 4.16 0.02μg/mL0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.2μg/mL的标准工作溶液。取适量标准储备液（4.14），用 10%甲醇（4.11）稀释成浓度分别为0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、5μg/mL的标准工作溶液。该标准 工作溶液于使用时配制。 4.17微孔滤膜：0.20μm，有机系。 5仪器和设备 5.1走 超高效液相色谱仪：配荧光检测器。 5.2分析天平：感量分别为0.1mg和0.01g 5.3粉碎机。 5.4组织捣碎仪。 5.5涡旋混合器。 5.6冷冻离心机。 6试样制备和保存 6.1基本要求 制样过程中应防止样品受到污染或发生异丁子香酚含量的变化 6.2鱼、虾、猪肉、猪肝试样的制备和保存 从所取全部样品中取出有代表性样品，取可食部分约500g，用组织捣碎仪充分捣碎均匀。制备好 的试样存放于密封洁净容器中，于一18℃避光冷冻存放。 6.3饮料试样制备和保存 从所取全部样品中取出有代表性样品，取约500mL，搅拌均匀。制备好的试样存放于密封洁净容 器中，于4℃避光冷藏存放。 6.4饼干试样的制备和保存 从所取全部样品中取出有代表性样品，取500g.用粉碎机充分粉碎均匀，过0.771mm筛。制备好 息服务平 的试样存放于密封洁净容器中，于4℃避光冷藏存放。 7测定步骤 7.1提取 称取5g试样（精确至0.01g），置于50mL聚丙烯离心管中，加入10mL5%乙酸铵溶液（4.7)， 10.0mL叔丁基甲醚（4.1），3000r/min涡旋混勾2min，4℃下以9000r/min离心3min，吸取上清液 4.0mL转移至另一离心管中，待净化。 7.2净化 在7.1中得到的上清液中加1.60mL0.25mol/L氢氧化钠溶液（4.8），3000r/min涡旋混匀 2