ICS 11.220 CCS B 41 团体标准 T/CVMA 259—2025 犬猫生殖系统组织取材及固定技术规范 Technical specification for tissue sampling and fixation of reproductive organs in canine and feline 2025 - 6 - 11发布 2025 - 6 - 11实施 中国兽医协会 发布 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 中国兽医协会 CVMA全国团体标准信息平台 T/CVMA 259—2025 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由 北京中农大动物医院有限公司 提出。 本文件由中国兽医协会归口。 本文件起草单位： 北京中农大动物医院有限公司、中国农业大学、北京小动物诊疗行业协会 。 本文件主要起草人： 李娜、陈丝雨、张兆霞、郁诗辉、刘洋、吕艳丽、夏兆飞 。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 中国兽医协会 CVMA全国团体标准信息平台 T/CVMA 259—2025 1 犬猫生殖系统组织取材及固定技术规范 1 范围 本文件规定了兽医病理诊断过程中犬猫生殖系统组织取材及固定环节的程序和操作步骤。 本文件适用于兽医临床中手术摘取的组织样本的取材及固定， 为院内病理检测的开展及送检外院做 准备。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 信息记录 4.1 院内检测 填写病理检查申请单，详细记录动物主人名字、联系方式、动物名字、物种、品种、年龄、性别、 病史、样本类型、组织个数、组织位置和样本评估要求并登记。可将样本按照统一编号方式从 1号开始 进行标记 ，标记内容包括年份 -序号，如 2024 -1，2024 -2。如需评估边缘，需要在病理检查申请单上标明 需要边缘评估。 4.2 送检 按照病理检查申请单上的项目，填写送检医师及医院、动物主人名字、联系方式、动物名字、物种、 品种、年龄、性别、病史、样本类型、组织个数、组织位置和样本评估要求，将信息在院内备份。备份 方式同院内检测。 5 准备材料 病理标本保存瓶、载玻片、 5 mL注射器、 10 % 中性福尔马林固定液、 PBS（pH 7.0 ~ 7.4） 、纱布 块、刀片、乳胶手套、带有标尺的载物板、相机。 6 取材及固定 6.1 留存细胞学涂片 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 259—2025 2 对采集的组织留存细胞学涂片以便与组织病理学结果进行对比，方便后续分析。可使用 5 mL注射 器对病变部分进行细针抽吸，进行细胞学涂片，或将组织切开后轻触载玻片，将得到的细胞学涂片或触 片使用罗曼诺夫斯基染色法进行染色并标记保存。标记形式应与样本保持一致，方便后续整理及查找。 6.2 组织取材及固定 6.2.1 组织取出后 应尽快取材、固定。记录组织病变位置及数量，置于带有标尺的载物板上，放置日 期记录纸，拍照留存。然后将组织块置于 PBS（pH 7.0 ~ 7.4）中，轻柔冲洗掉多余血液及其他污渍，使 用纱布吸去多余液体，投入 10 %中性福尔马林液中固定。 6.2.2 睾丸及附睾：若睾丸体积较小，可将睾丸沿纵轴连同附睾一并切开，注意切开至两半组织可以 平铺在台面上但没有完全切断为宜（此时组织块大小通常在 3×3cm左右，若组织太小则不容易观察到 病变，太大则固定液渗透不全，影响固定效果）；若睾丸体积过大，可将睾丸组织沿纵轴按照吐司样切 开（即连续切片，具体方法参见附录 A中图 A.1，切片厚度 ≤1 cm），应同时保留被膜及实质结构。将 组织浸泡于 10 %中性福尔马林固定液中（若有试剂，首选 Modified Davidson's 固定液，通常由 30 %的 37 % ~ 40 %甲醛、 15 %的乙醇、 5 %的冰醋酸和 50 %的蒸馏水组成），要求固定液体积为样本体积的 5 ~ 10倍，以完全覆盖样本。 6.2.3 前列腺、卵巢、子宫：若体积较小（ 3×3cm左右，同上），则直接浸泡于 10 %中性福尔马林 固定液中。若体积较大，可将组织吐司样切开（厚度 ≤1 cm）后浸泡于 10 %中性福尔马林固定液中。 6.2.4 乳腺： 确认乳腺肿物数量后， 在每个肿物的位置分别用刀片切开皮肤进行标记， 然后浸泡于 10 % 中性福尔马林固定液中。若肿物较大，可记录肿物位置及数量后，将肿物及周围组织单独取出，取出的 肿物吐司样切开（厚度 ≤1 cm）后浸泡于 10 %中性福尔马林固定液中。 6.3 固定液防冻处理 冬季温度较低时，固定液容易结冰，导致组织被冻裂无法诊断，可将 1份异丙醇加入到 10份10% 中性福尔马林固定液中，防止组织被破坏。 6.4 样本信息标记 在装有固定液和样本的病理标本保存瓶上标注信息，包括组织编号、主人 /动物信息、组织类别、 固定时间。组织编号应与送检单、院内登记信息及保存的玻片信息相对应。 7 注意事项 7.1 对采集到的组织或待送检组织进行编号并留存基本信息，组织编号应单一、连续且方便复查，在 登记信息或送检前发现编号重复或编号不连续时，应及时核对信息，避免遗漏。 7.2 存放样本的病理标本保存瓶应选择密封性良好的广口瓶，组织与固定液的比例约为 1:10，避免存 放过程中福尔马林渗漏、挥发或固定后的组织难以倒出或取出。 7.3 体积较大的样本可能存在质地不均的情况，应确保不同质地的组织均被切开，必要时在送检单上 标记组织病变的位置及数量，并拍照或绘图，方便后续病理组织处理人员检查核对。若存在部分组织固 定不完全的情况，可在固定一段时间后，先将固定完全的组织取材，剩余组织继续固定。 7.4 睾丸及附睾组织取材时 应保留精索，便于分析肿瘤转移情况。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 259—2025 3 7.5 注意区分成对组织的位置，可将左右两侧组织分装到不同的样本盒中，并做好标记，或者一侧横 切一侧纵切，以区分左右。 7.6 取材刀片应锋利，避免破坏切面组织结构，以求保留原本的组织结构。 7.7 如组织需要冲洗，使用 PBS（pH 7.0 ~ 7.4）冲洗，切忌自来水冲洗。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 259—2025 4 附 录 A （资料性） 吐司样切开示意图 吐司样切开示意图见图 A.1。 图A.1 吐司样切开示意图 _________________________________ 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台