ICS_11.100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1455—2016 应用参考测量程序对酶催化活性浓度赋值 及其不确定度评定指南 Guidelines for values assignment of catalytic activity concentrations of enzymes using reference measurement procedures and evaluation of uncertainty 2016-01-26发布 2017-01-01实施 发布 国家食品药品监督管理总局 YY/T1455—2016 目 次 前言 1范围 2 规范性引用文件 3 符号和缩略语 赋值 4 4.1 参考测量程序的选择 4.2 建立溯源性 4.3参考测量程序的评定 4.4实验室内部质量控制 4.5 样本测量 5测量不确定度评定 5.1不确定度的来源分析 5.2测量模型的建立 5.3标准不确定度的评定 5.4合成标准不确定度的计算 10 5.5扩展不确定度的确定 1 6测量结果及其不确定度评定结果的报告 11 附录A（资料性附录） 酶学参考测量程序信息表 12 附录B（资料性附录） 限值在其他文献或活动中给出的信息 13 14 附录C（资料性附录） LDH赋值过程及不确定度评定方法举例 附录D（资料性附录） 使用灵敏系数进行LDH测量不确定评定举例 19 参考文献 22 YY/T1455—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的费任 本标准由国家食品药品监督管理总局提出。 本标准起草单位：北京市医疗器械检验所、四川迈克科技生物股份有限公司、上海复星长征医学科 学有限公司、深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司、宁波美康生物科技股份有限公司。 本标准主要起草人：杨宗兵、吕磊、吴杰、王英国、邹继华。 I YY/T1455—2016 应用参考测量程序对酶催化活性浓度赋值 及其不确定度评定指南 1范围 本标准规定了应用参考测量程序对酶催化活性浓度赋值及其不确定度评定的方法。 本标准适用于体外诊断系统的参考测量实验室应用参考测量程序对酶催化活性浓度赋值及其不确 定度评定工作。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T15000.3标准样品工作则（3）标准样品定值的一般原则和统计方法 YY/T0638体外诊断医疗器械 生物样品中量的测量校准品和控制物质中酶催化浓度赋值的 计量学溯源性 WS/T403—2012 临床生物化学检验常规项目分析质量指标 3符号和缩略语 3.1符号 下列符号适用于本文件。 U：扩展不确定度。 Url：相对扩展不确定度。 uerel：合成不确定度。 α1;α2：预先选择的调整值。 3.2缩略语 下列缩略语适用于本文件。 ALP：碱性磷酸酶（AlkalinePhosphatase) ALT：丙氨酸氨基转移酶（AlanineAminotransferase） AMY：淀粉酶（α-amylase) AST：天门冬氨酸氨基转移酶（AspartateAminotransferase） BIPM：国际计量局（BureauInternationaldesPoidsetMesures) CK：肌酸激酶（CreatineKinase) CNAS：中国合格评定国家认可委员会（ChinaNationalAccreditationServiceforConformity Assessment) CRM：有证参考物质（CertifiedReferenceMaterial) CV：变异系数（CoefficientofVariance) 1 YY/T1455—2016 GGT：y-谷氨酰基转移酶（y-Glutamyltransferase） IFCC：国际临床化学和检验医学联合会（InternationalFederationofClinicalChemistryandLabo- ratory Medicine) ILAC：国际实验室认可合作组织（InternationalLaboratoryAccreditationCooperation） JCTLM：国际检验医学潮源联合会（JointCommitteeforTraceabilityinLaboratoryMedicine） LDH：乳酸脱氢酶（LactateDehydrogenase) RELA：检验医学参考实验室室间质量评价（ExternalQualityAssessmentforReferenceLaborato ries in Laboratory Medicine SD：标准（偏）差（StandardDeviation） 4赋值 4.1参考测量程序的选择 4.1.1概述 人血清中酶催化活性浓度测定是临床诊断、治疗、监测的重要医学指标。酶学测量是临床化学中测 量频率很高的项目，其标准化工作尤为重要。目前IFCC颁布的37C时酶学测量的参考方法主要有 始运行参考测量程序实验室之间的质量评价（RELA）活动，为学测量的标准化起到了重要的推动 作用。 4.1.2参考测量程序的选择 酶催化活性浓度测量的参考测量程序主要包括：JCTLM网站列表的参考测量程序（见附录A）、相 关国家标准、行业标准中规定的参考测量程序。 4.2建立潮源性 酶学测量中，IFCC出版了一系列的一级参考测量程序。使用这一系列参考测量程序时，SI单位定 义为“摩尔每秒立方来（mols-"m-"）”，国际计量局将其命名为“卡特每立方米（katalm-"）”，是溯源等 级的最高级，通常以μkat/L或U/L表示，1katalm3=10°μkat/L=6×10*U/L。作为酶学测量的测 量标准，其催化活性浓度的测量按照37C时IFCC参考测量程序进行。运行参考测量程序时，试剂配 制及每一步骤的测量均应严格按照IFCC程序详细规定进行，其中涉及的温度、质量、体积均溯源至我 国法定计量单位。 为了建立、证明活性浓度测量的溯源性，对参考测量程序中规定的以下步骤应进行严格控制： a） 称量：使用计量合格的万分之一天平（或十万分之一）进行所有称量； b) 溶液配制过程中所涉及化学试剂的称量，全部按照试剂纯度换算后称进行称量； c) 测量过程中的温度控制使用计量合格的高精度温度测量仪进行监测； d)月 所使用的分光光度计应定期检定和期间核查； e) 溶液配制用容量瓶和量简应使用称重法进行确认； 结果处理使用合理有效的统计学方法。 具体溯源性建立过程参见YY/T0638的规定。 4.3参考测量程序的评定 4.3.1概述 4.3.1.1 实验室运行参考测量程序时应使用CRM验证程序的正确度，使用特性值稳定的质量控制物 2 YY/T1455--2016 质验证程序的精密度，即测量结果的SD或CV和偏倚应落在实验室预定的限度内，该限度通常有多种 来源。 4.3.1.2使用正确度验证物质进行测量过程的评定时，其测量结果的平均值应落在正确度验证物质规 定的限度内，精密度（重复性）应落在实验室预定的限度内。 正确度验证物质宜选用国家或国际相关权威机构提供用于正确度验证的物质、IFCC提供的用于 参考测量实验室室间质量评价的物质等。 4.3.1.3关于预定的限度的确认通常考虑以下几点： a）认可方案的限度，如从CRM定值报告中获得； b）程序使用者或组织者给出的限度，如从正确度验证物质提供者获得； c) 经验的限度，程序使用者根据先前测量过程中获得的值制定预定的限度或依据多家实验室测 量结果的中位值制定预定的限度； d）采用标准文件给定的限度，如CNAS-CL33文件规定：IFCC参考方法对酶学参考物质的测量 结果应在统计学达到无差异。 4.3.2CRM的选择 使用者在选择CRM时，应考虑参考测量程序和CRM的特性，同时应考虑CRM定值方法、预期用 途及CRM证书上关于该CRM的详细使用说明。 b）水平：CRM的标示值应在参考测量程序的测量范围内； c）基质：CRM的基质尽可能接近人血清基质； d）分析物：CRM的分析物应与参考测量程序相同或是参考测量程序分析物的同工酶； e）最小取样量：CRM规定的最小取样量应小于参考测量程序规定用量； f) 数量：CRM的量应满足整个实验用量； g）稳定性：CRM的稳定性应满足参考测量程序相关要求。 4.3.3 参考测量程序测量精密度评定 4.3.3.1概述 精密度的评定，是将重复性条件或其他规定条件下实验室内SD（或CV)与预定的限度进行比较。 4.3.3.2重复测量次数n的选择 重复测量的次数n主要取决于α和β的值以及评定精密度所选择的假设条件。 通常假设在自由度v=n一1时α=0.05、β=0.01的临界值与。和α比率的关系作为判定标准，表 1给出了不同自由度下α=0.05、β=0.01时，测量过程标准偏差和所要求标准偏差之比的判定临界值。 推荐的测量次数不少于10次。 表1不同自由度下α=0.05、β=0.01时，测量过程标准偏差和所要求标准偏差之比 1 2 3 5 6 7 8 α=0.05 159.3 17.3 6.25 5.65 4,47 3.80 3,37 3.07 2.85 β=0.01 10 12 15 20 24 30 40 60 120 v α=0.05 2.67 2.43 2.19 1.95 1.83 1.71 1.59 1.45 1.30 β